本試劑盒采用雙抗體夾心ELISA檢測(cè)原理，固相載體酶標(biāo)板微孔內(nèi)包被有抗人PAQR7特異性抗體，實(shí)驗(yàn)中加入的標(biāo)準(zhǔn)品及待測(cè)樣本中的PAQR7抗原可與固相抗體特異性結(jié)合，洗板去除游離雜質(zhì)后，加入酶標(biāo)記抗PAQR7抗體形成免疫復(fù)合物，經(jīng)底物顯色反應(yīng)后，顯色深淺與樣本中PAQR7含量呈正相關(guān)，終止反應(yīng)后檢測(cè)OD值，對(duì)照標(biāo)準(zhǔn)曲線即可實(shí)現(xiàn)對(duì)樣本中PAQR7蛋白的定量檢測(cè)。
產(chǎn)品參數(shù)：
產(chǎn)品名稱 | 人孕酮和adipoQ受體家族成員Ⅶ(PAQR7)ELISA試劑盒 | 貨號(hào) | Y-E2579 |
英文名稱 | PAQR7 ELISA Kit | 規(guī)格 | 48T/96T |
?靈敏度：最低可測(cè) 0.3pg/mL
檢測(cè)范圍：0.6pg/mL - 40pg/mL
反應(yīng)時(shí)間：總耗時(shí) 130min，抗原結(jié)合 45min，二抗 45min，顯色 20min
保存條件：未開封 2～8℃避光；拆分板條密封后冷藏，禁止反復(fù)開蓋
顯色系統(tǒng)：?jiǎn)谓M份穩(wěn)定 TMB 顯色底物
檢測(cè)波長(zhǎng)：450nm 單波長(zhǎng)讀數(shù)
標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制：復(fù)孔檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)品，剔除異常值后構(gòu)建標(biāo)準(zhǔn)曲線方程
注意事項(xiàng)：血清樣本建議新鮮檢測(cè)，長(zhǎng)期儲(chǔ)存需分裝凍存，避免反復(fù)凍融 3 次以上
儲(chǔ)存與有效期：
未開封整套試劑盒：2～8℃避光冷藏，禁止冷凍；有效期 12 個(gè)月。
開封后保存
剩余酶標(biāo)板條：自封袋密封，內(nèi)置干燥劑 2～8℃避光；1 個(gè)月內(nèi)用完。
HRP 酶結(jié)合物、TMB 底物：避光 2～8℃，避免光照失效。
濃縮洗滌液：2～30℃常溫保存，結(jié)晶溫水溶解不影響效果。
復(fù)溶后標(biāo)準(zhǔn)品：分裝 - 20℃凍存，避免反復(fù)凍融，1 個(gè)月內(nèi)使用。
過(guò)期試劑禁止使用。
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實(shí)驗(yàn)操作流程：
所有試劑室溫回溫 32min，倍比稀釋 PAQR7 標(biāo)準(zhǔn)品，組織勻漿上清樣本稀釋處理，對(duì)酶標(biāo)板孔位分類標(biāo)記。
分別向空白、標(biāo)準(zhǔn)、樣本孔加入對(duì)應(yīng)稀釋液、標(biāo)準(zhǔn)品溶液、待測(cè)樣本，垂直加樣防止掛壁損耗。
一步法直接加入酶聯(lián)標(biāo)記抗體工作液至每一個(gè)反應(yīng)孔，低速震蕩混勻 10s。
封板膜封嚴(yán)酶標(biāo)板，37℃恒溫孵育 60min，避光環(huán)境下完成抗原抗體結(jié)合反應(yīng)。
去除封板，倒掉孔內(nèi)液體，洗板 5 次，每次浸泡 30s，拍干所有微孔洗液。
避光加入顯色底物 A+B 混合液，37℃避光顯色 13min，肉眼可見梯度色差后準(zhǔn)備終止。
終止液終止反應(yīng)，450nm 測(cè)定 OD 值，擬合標(biāo)準(zhǔn)曲線換算樣本 PAQR7 受體蛋白濃度。
關(guān)鍵字： 人孕酮和adipoQ受體家族成員Ⅶ;PAQR7;ELISA試劑盒;
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