本試劑盒運用間接ELISA檢測原理,將純化的小鼠小核糖核蛋白/Sm(snRNP/Sm)抗原包被于酶標板微孔內(nèi)。檢測時,樣本中的抗snRNP/Sm抗體可與固相抗原特異性結(jié)合,洗滌去除未結(jié)合雜質(zhì)后,加入辣根過氧化物酶標記的抗小鼠IgG二抗,與樣本特異性抗體結(jié)合。后續(xù)加入TMB底物發(fā)生酶促顯色反應,顯色強度與樣本中目標抗體的含量正相關,終止反應后檢測吸光度,對照標準曲線即可完成樣本中抗體的定量檢測。
基本參數(shù)?:

產(chǎn)品名稱:小鼠抗小核糖核蛋白/Sm抗體(snRNP/Sm)ELISA試劑盒
英文名稱:snRNP/Sm ELISA Kit
貨號:Y-E2028
規(guī)格:48T/96T
靈敏度:最低檢出 1.0AU/mL
檢測范圍:2.0AU/mL~180AU/mL
反應時間:封閉后加樣孵育 130min,二抗 75min,避光顯色 32min,終止讀板,總時長 237min
保存條件:整套試劑盒 2~8℃避光;顯色液單獨避光存放,不可接觸金屬離子
顯色系統(tǒng):A+B 混合 TMB 顯色,硫酸終止
檢測波長:450nm+650nm
標準曲線繪制:五點定標法繪制標準曲線,復孔 CV 值小于 10% 方可采信
注意事項:自身免疫血清樣本建議新鮮采集檢測;一次性槍頭杜絕交叉加樣。
試劑盒組成:

預包被抗體/抗原微孔板 96孔/48孔 固定捕獲抗體/抗原,結(jié)合目標物
標準品 6支/套 制備標準曲線,定量檢測依據(jù)
生物素標記抗體/抗原 1瓶 識別并結(jié)合目標物,提供酶結(jié)合位點
辣根過氧化物酶(HRP)標記親和素 1瓶 與生物素結(jié)合,催化底物顯色
底物溶液A、B 各1瓶 混合后作為酶促反應底物,產(chǎn)生顏色變化
終止液 1瓶 終止酶促反應,穩(wěn)定顯色結(jié)果
濃縮洗滌液 1瓶 清洗微孔板,去除未結(jié)合物質(zhì)
封板膜 2張 孵育過程中防止污染和揮發(fā)
實驗步驟如下:

試劑盒室溫放置 27min 平衡溫度,稀釋洗滌液,準備 Sm 抗體陽性梯度標準品。
酶標板加樣標準品、待測小鼠血清樣本、陰性對照孔。
直接加入酶標記二抗工作液,封板避光 37℃孵育 53min。
洗板 4 次,浸泡 34s / 次,棄凈廢液拍干。
顯色底物避光反應 15min。
終止液終止酶促反應,輕搖酶標板。
讀板定量樣本中抗 Sm 抗體水平。
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關鍵字: 小鼠抗小核糖核蛋白/Sm抗體;snRNP/Sm;ELISA試劑盒;
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