?產品名稱:多子小瓜蟲PCR檢測試劑盒
英文名稱:Ichthyophthirius multifiisPCR
貨號:YS-P014324
分類:PCR檢測試劑盒
規(guī)格?:50T/盒
檢測原理:病魚體表蟲體刮取后裂解,破碎蟲體細胞膜提取蟲體 DNA
特異性引物靶向多子小瓜蟲 ITS 保守區(qū),區(qū)分魚類其他原蟲病原
雙重 PCR 同步擴增魚宿主內參,校正魚類黏液對擴增的抑制作用實驗流程:1. 樣本處理
提取待測樣本RNA,建議使用商品化RNA提取試劑盒。
2. 陽性對照稀釋(示例:6個梯度)
標記離心管(7至2號),每管加入45μL模板稀釋液。
按10倍梯度稀釋陽性對照,避免交叉污染。
3. PCR反應體系配制(20μL/反應)
| 組分 | 體積(μL) |
| RT-PCR反應液 | 10 |
| 熒光染料 | 0.5 |
| 引物混合液 | 2 |
| RNA模板 | 2 |
| RNase-free水 | 補至20 |
4. 上機程序
逆轉錄:50℃ 15分鐘(可選,根據病毒RNA特性調整)。
預變性:95℃ 2分鐘。
循環(huán):95℃ 15秒 → 60℃ 30秒(采集熒光信號),共40循環(huán)。
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注意事項:避免反復凍融試劑,解凍后需充分混勻。
實驗環(huán)境需嚴格分區(qū)(試劑準備區(qū)、樣本處理區(qū)、擴增區(qū)),防止污染。
陽性對照需與樣本分裝操作。
本產品僅限科研用途,不可用于臨床診斷。
操作時需穿戴防護裝備,避免試劑接觸皮膚或眼睛。
樣本采集需遵循無菌原則,運輸時使用干冰或冰袋保存。
上海研生實業(yè)有限公司
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