本試劑盒專為堪薩斯分枝桿菌檢測研發(fā),靶向該菌株特異性基因片段進行PCR擴增,可精準檢測人體呼吸道、組織樣本中的堪薩斯分枝桿菌核酸。該菌是常見非結核分枝桿菌致病菌,試劑盒檢測精準、特異性高,可快速鑒別感染病原,助力臨床肺部感染的精準診斷與治療。
產(chǎn)品名稱
堪薩斯分枝桿菌PCR檢測試劑盒
貨號
YS-P014456
英文名稱
Mycobacterium kansasiiPCR
規(guī)格
50T
有效期
12個月
保存
-20℃保存
基礎原理:
呼吸道痰液樣本純化分枝桿菌 DNA,靶向堪薩斯分枝桿菌色素合成特異基因擴增。
凝膠電泳特異性條帶判定病原陽性。
其他非結核分枝桿菌陰性對照,驗證引物高度特異性。
?操作步驟?:
1. DNA提?。颖局苽鋮^(qū))
使用自選方法或兼容試劑盒提取樣本DNA,建議濃度≥10 ng/μL,A260/A280比值1.8-2.0。
2. 標準曲線制備(獨立操作區(qū))
標記6管為梯度稀釋點(如7-2),每管加45 μL DEPC水。
取5 μL陽性對照依次稀釋,混勻后作為標準品(避免污染)。
3. PCR反應體系配制(試劑配制區(qū))
按以下比例配制(示例):
| 組分 | 體積(μL) |
| 2× Master Mix | 10 |
| 引物混合液 | 2 |
| DNA模板 | 2 |
| DEPC水 | 6 |
4. 上機檢測
程序設置:預變性95℃ 3 min;40循環(huán)(95℃ 10 s, 60℃ 30 s);熔解曲線分析。
數(shù)據(jù)分析:根據(jù)Ct值及標準曲線計算樣本濃度。
?注意事項?:
1、實驗分區(qū)管理?
實驗全程需嚴格劃分三個獨立區(qū)域:?試劑準備區(qū)、樣本處理區(qū)、PCR擴增區(qū)?,各區(qū)實驗服、移液器及耗材?嚴禁混用?,防止交叉污染。
?2、防止污染操作?
使用帶濾芯槍頭,每步更換槍頭;
陽性對照操作應在專用生物安全柜中進行,避免污染其他試劑;
加樣后立即蓋緊管蓋,避免氣溶膠擴散。
?3、試劑保存與使用?
所有試劑需?-20℃避光保存?,避免反復凍融,確保穩(wěn)定性;
使用前于冰上解凍并輕柔混勻,瞬時離心后使用。
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