本試劑盒靶向黏孢子蟲屬共有保守基因設(shè)計(jì)廣譜PCR擴(kuò)增體系，可廣譜檢測水產(chǎn)養(yǎng)殖中各類致病黏孢子蟲。產(chǎn)品覆蓋菌株全面、特異性強(qiáng)，不與其他水產(chǎn)寄生蟲交叉檢測，適用于水產(chǎn)養(yǎng)殖批量樣本篩查、黏孢子蟲疫病普查、養(yǎng)殖水體安全檢測。
產(chǎn)品名稱 | 黏孢子蟲屬通用PCR檢測試劑盒 | 貨號 | YS-P014493 |
英文名稱 | Myxosporidia spp.PCR | 規(guī)格 | 50T |
有效期 | 12個月 | 保存 | -20℃保存 |
基礎(chǔ)原理：
魚蝦組織提取原蟲總 DNA，引物靶向黏孢子蟲屬共有 18S rRNA 保守基因擴(kuò)增。
樣本含任意黏孢子蟲即可擴(kuò)增出目標(biāo)條帶，實(shí)現(xiàn)屬級廣譜篩查。
水產(chǎn)腐殖酸去除柱，消除水體有機(jī)質(zhì)擴(kuò)增抑制。
?操作步驟?：
樣本制備：
使用CTAB法或商業(yè)DNA提取試劑盒從組織中提取基因組DNA。
建議DNA濃度≥20 ng/μL，A260/A280比值1.8~2.0。
反應(yīng)體系配制（20 μL體系示例）：
預(yù)混PCR Master Mix（含染料、dNTPs、Taq酶等）
特異性引物混合液
模板DNA（2~5 μL）
補(bǔ)充無核酸酶水至終體積。
PCR擴(kuò)增程序：
預(yù)變性：95℃ 5分鐘；
循環(huán)階段（40~45 cycles）：95℃ 10秒 → 60℃ 30秒（采集熒光信號）；
熔解曲線分析：60~95℃（可選，用于驗(yàn)證擴(kuò)增特異性）。
結(jié)果判讀：
陽性：Ct值≤35且熔解曲線峰單一；
陰性：Ct值≥40或無擴(kuò)增曲線；
可疑：35<Ct值<40，建議復(fù)測或結(jié)合熔解曲線分析。
?注意事項(xiàng)?：
所有耗材必須無核酸酶，吸頭一次性使用，禁止重復(fù)吸??；
陽性模板拷貝濃度高，開蓋操作輕柔，避免氣溶膠擴(kuò)散造成全域污染；
試劑融化后冰上放置不超過 2 h，用完立即放回 - 20℃；
廢棄 PCR 管、擴(kuò)增產(chǎn)物、實(shí)驗(yàn)廢液統(tǒng)一 121℃高壓滅菌后丟棄；
試劑盒僅用于動植物、水產(chǎn)、微生物疫病科研檢測，禁止人體臨床檢測；
移液器、操作臺定期紫外消毒，長期污染需更換全新試劑盒全套試劑。
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關(guān)鍵字： 黏孢子蟲屬通用;PCR檢測試劑盒;
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