本試劑盒基于特異性PCR技術(shù)，靶向豬麻疹病毒特征保守基因，可精準(zhǔn)定性檢測(cè)豬樣本中的豬麻疹病毒核酸，特異性無(wú)交叉反應(yīng)，有效規(guī)避其他豬呼吸道病毒干擾。試劑盒檢測(cè)流程簡(jiǎn)便、耗時(shí)短，可快速完成臨床樣本檢測(cè)，適配血清、拭子、組織樣本。適用于豬麻疹病毒感染病例的臨床診斷、豬場(chǎng)疫病傳入風(fēng)險(xiǎn)排查、畜禽跨物種病毒傳播研究及獸醫(yī)疫病防控檢測(cè)工作。
產(chǎn)品名稱(chēng) | 豬麻疹病毒PCR檢測(cè)試劑盒 | 貨號(hào) | YS-P014623 |
英文名稱(chēng) | Porcine Rubulavirus（PoRV） RTPCR | 規(guī)格 | 50T |
有效期 | 12個(gè)月 | 保存 | -20℃保存 |
基礎(chǔ)原理：
采集豬淋巴結(jié)、呼吸道拭子，提取病毒 RNA 并反轉(zhuǎn)錄為 cDNA 模板。
引物靶向麻疹病毒核蛋白基因保守序列，避免和其他副粘病毒交叉反應(yīng)。
依據(jù) PCR 熒光擴(kuò)增曲線判定核酸存在與否，完成豬麻疹病毒病原檢測(cè)。
?操作步驟?：
樣本處理（樣本處理區(qū)）
推薦使用磁珠法或離心柱法提取核酸，避免交叉污染。
試劑配制（試劑準(zhǔn)備區(qū)）
反應(yīng)體系（20μL/管）：19μL反應(yīng)液 + 1μL酶液，分裝后加入5μL待測(cè)核酸或質(zhì)控品。
PCR擴(kuò)增（核酸擴(kuò)增區(qū)）
循環(huán)參數(shù)：
預(yù)變性：95℃ 2min（1循環(huán)）；
擴(kuò)增：95℃ 15sec → 60℃ 30sec（45循環(huán)，60℃時(shí)采集熒光信號(hào)，F(xiàn)AM通道）。
結(jié)果分析
陽(yáng)性：Ct值≤40，擴(kuò)增曲線呈指數(shù)增長(zhǎng)；
陰性：無(wú)Ct值或曲線平直；
可疑：40<Ct≤45，需復(fù)測(cè)確認(rèn)。
質(zhì)控要求：陽(yáng)性質(zhì)控Ct≤32，陰性質(zhì)控?zé)o擴(kuò)增。
?注意事項(xiàng)?：
所有耗材必須無(wú)核酸酶，吸頭一次性使用，禁止重復(fù)吸??；
陽(yáng)性模板拷貝濃度高，開(kāi)蓋操作輕柔，避免氣溶膠擴(kuò)散造成全域污染；
試劑融化后冰上放置不超過(guò) 2 h，用完立即放回 - 20℃；
廢棄 PCR 管、擴(kuò)增產(chǎn)物、實(shí)驗(yàn)廢液統(tǒng)一 121℃高壓滅菌后丟棄；
試劑盒僅用于動(dòng)植物、水產(chǎn)、微生物疫病科研檢測(cè)，禁止人體臨床檢測(cè)；
移液器、操作臺(tái)定期紫外消毒，長(zhǎng)期污染需更換全新試劑盒全套試劑。
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