本試劑盒基于單胞菌屬通用保守基因設(shè)計廣譜擴(kuò)增體系，可廣譜覆蓋假單胞菌屬各類常見致病菌種，實現(xiàn)屬級病原快速批量篩查。試劑盒特異性強(qiáng)、無跨屬交叉反應(yīng)，擴(kuò)增體系穩(wěn)定，適配各類環(huán)境及臨床樣本。適用于畜禽單胞菌群體性感染篩查、養(yǎng)殖環(huán)境微生物全面監(jiān)測、混合感染疫病初篩及菌群多樣性分析。
產(chǎn)品名稱 | 單胞菌通用PCR檢測試劑盒 | 貨號 | YS-P014652 |
英文名稱 | Pseudomonas spp.PCR | 規(guī)格 | 50T |
有效期 | 12個月 | 保存 | -20℃保存 |
基礎(chǔ)原理：
提取樣本總細(xì)菌 DNA，構(gòu)建擴(kuò)增模板。
引物針對假單胞菌屬保守 16S rRNA 片段設(shè)計，廣譜篩查單胞菌。
擴(kuò)增陽性僅證明存在假單胞菌屬，不細(xì)分具體種類。
?操作步驟?：
1. 樣本處理
提取待測樣本RNA，建議使用商品化RNA提取試劑盒。
2. 陽性對照稀釋（示例：6個梯度）
標(biāo)記離心管（7至2號），每管加入45μL模板稀釋液。
按10倍梯度稀釋陽性對照，避免交叉污染。
3. PCR反應(yīng)體系配制（20μL/反應(yīng)）
| 組分 | 體積（μL） |
| RT-PCR反應(yīng)液 | 10 |
| 熒光染料 | 0.5 |
| 引物混合液 | 2 |
| RNA模板 | 2 |
| RNase-free水 | 補至20 |
4. 上機(jī)程序
逆轉(zhuǎn)錄：50℃ 15分鐘（可選，根據(jù)病毒RNA特性調(diào)整）。
預(yù)變性：95℃ 2分鐘。
循環(huán)：95℃ 15秒 → 60℃ 30秒（采集熒光信號），共40循環(huán)。
?注意事項?：
避免反復(fù)凍融試劑，解凍后需充分混勻。
實驗環(huán)境需嚴(yán)格分區(qū)（試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)、擴(kuò)增區(qū)），防止污染。
陽性對照需與樣本分裝操作。
本產(chǎn)品僅限科研用途，不可用于臨床診斷。
操作時需穿戴防護(hù)裝備，避免試劑接觸皮膚或眼睛。
樣本采集需遵循無菌原則，運輸時使用干冰或冰袋保存。
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關(guān)鍵字： 單胞菌通用;PCR檢測試劑盒;
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