?產(chǎn)品名稱：副牛痘病毒PCR檢測試劑盒
英文名稱：Paravaccinia VirusRTPCR
貨號：YS-P014560
分類：PCR檢測試劑盒
規(guī)格?：50T/盒
檢測原理：
提取待測樣本中的病毒基因組 DNA，利用針對副牛痘病毒保守基因設計的特異性引物，僅能與該病毒核酸序列互補配對完成退火結(jié)合。
通過 Taq DNA 聚合酶在適宜溫度循環(huán)下完成變性、退火、延伸三步擴增反應，指數(shù)級擴增目標病毒特異性核酸片段。
依據(jù)擴增產(chǎn)物條帶大小 / 熒光信號有無判定樣本是否攜帶副牛痘病毒核酸，區(qū)分陰性與陽性樣本。
實驗流程：
樣本處理（樣本處理區(qū)）
推薦使用磁珠法或離心柱法提取核酸，避免交叉污染。
試劑配制（試劑準備區(qū)）
反應體系（20μL/管）：19μL反應液 + 1μL酶液，分裝后加入5μL待測核酸或質(zhì)控品。
PCR擴增（核酸擴增區(qū)）
循環(huán)參數(shù)：
預變性：95℃ 2min（1循環(huán)）；
擴增：95℃ 15sec → 60℃ 30sec（45循環(huán)，60℃時采集熒光信號，F(xiàn)AM通道）。
結(jié)果分析
陽性：Ct值≤40，擴增曲線呈指數(shù)增長；
陰性：無Ct值或曲線平直；
可疑：40<Ct≤45，需復測確認。
質(zhì)控要求：陽性質(zhì)控Ct≤32，陰性質(zhì)控無擴增。
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注意事項：
所有耗材必須無核酸酶，吸頭一次性使用，禁止重復吸?。?/span>
陽性模板拷貝濃度高，開蓋操作輕柔，避免氣溶膠擴散造成全域污染；
試劑融化后冰上放置不超過 2 h，用完立即放回 - 20℃；
廢棄 PCR 管、擴增產(chǎn)物、實驗廢液統(tǒng)一 121℃高壓滅菌后丟棄；
試劑盒僅用于動植物、水產(chǎn)、微生物疫病科研檢測，禁止人體臨床檢測；
移液器、操作臺定期紫外消毒，長期污染需更換全新試劑盒全套試劑。
關(guān)鍵字： 副牛痘病毒;PCR檢測試劑盒;
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