本試劑盒基于實(shí)時(shí)熒光PCR技術(shù)，特異性針對(duì)蛙病毒基因組保守區(qū)域設(shè)計(jì)檢測體系，可精準(zhǔn)檢測兩棲類動(dòng)物樣本中的蛙病毒核酸。蛙病毒是引發(fā)蛙類、蟾蜍等兩棲動(dòng)物大規(guī)模死亡的主要病原，傳染性強(qiáng)、致死率高，本試劑盒特異性高、無交叉反應(yīng)，可適配蛙類組織、水體環(huán)境樣本等多種檢測樣本，適用于水產(chǎn)養(yǎng)殖疫病防控、兩棲動(dòng)物種質(zhì)資源保護(hù)、水域生態(tài)病原監(jiān)測等場景。
產(chǎn)品名稱 | 蛙病毒PCR檢測試劑盒 | 貨號(hào) | YS-P014668 |
英文名稱 | RanavirusPCR | 規(guī)格 | 50T |
有效期 | 12個(gè)月 | 保存 | -20℃保存 |
基礎(chǔ)原理：
引物靶向蛙病毒保守 DNA 聚合酶基因，可特異性識(shí)別蛙病毒家族病原核酸。
提取蛙類組織、水體樣本內(nèi)病毒核酸，經(jīng)反復(fù)熱循環(huán)擴(kuò)增靶標(biāo)片段提升檢出靈敏度。
根據(jù)擴(kuò)增結(jié)果判定樣本是否存在蛙病毒感染，用于兩棲類疫病監(jiān)測。
?操作步驟?：
樣本制備：
使用CTAB法或商業(yè)DNA提取試劑盒從組織中提取基因組DNA。
建議DNA濃度≥20 ng/μL，A260/A280比值1.8~2.0。
反應(yīng)體系配制（20 μL體系示例）：
預(yù)混PCR Master Mix（含染料、dNTPs、Taq酶等）
特異性引物混合液
模板DNA（2~5 μL）
補(bǔ)充無核酸酶水至終體積。
PCR擴(kuò)增程序：
預(yù)變性：95℃ 5分鐘；
循環(huán)階段（40~45 cycles）：95℃ 10秒 → 60℃ 30秒（采集熒光信號(hào)）；
熔解曲線分析：60~95℃（可選，用于驗(yàn)證擴(kuò)增特異性）。
結(jié)果判讀：
陽性：Ct值≤35且熔解曲線峰單一；
陰性：Ct值≥40或無擴(kuò)增曲線；
可疑：35<Ct值<40，建議復(fù)測或結(jié)合熔解曲線分析。
?注意事項(xiàng)?：
分區(qū)操作：試劑配制、樣品處理、PCR擴(kuò)增需在獨(dú)立區(qū)域進(jìn)行，避免交叉污染
無菌操作：使用帶濾芯槍頭、一次性手套和專用工作服
試劑準(zhǔn)備：所有試劑使用前需完全融化，震蕩混勻后短暫離心
避光保存：含熒光探針的試劑需避光保存和操作
防止污染：陽性對(duì)照操作需最后進(jìn)行，實(shí)驗(yàn)后用10%次氯酸或75%酒精消毒工作臺(tái)
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關(guān)鍵字： 蛙病毒;PCR檢測試劑盒;
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