本試劑盒針對(duì)輪狀病毒群特異性保守基因設(shè)計(jì)檢測(cè)體系，可精準(zhǔn)識(shí)別不同群型輪狀病毒，實(shí)現(xiàn)輪狀病毒群型的快速鑒定與核酸檢測(cè)。輪狀病毒是嬰幼兒及動(dòng)物腹瀉的主要致病病原，不同群型致病性存在差異，本試劑盒特異性強(qiáng)、分型清晰，適用于臨床腹瀉病例病原分群檢測(cè)、疾控流行病學(xué)分型統(tǒng)計(jì)、嬰幼兒腸道感染病因診斷。
產(chǎn)品名稱 | 輪狀病毒群PCR檢測(cè)試劑盒 | 貨號(hào) | YS-P014692 |
英文名稱 | Rotavirus A ARTPCR | 規(guī)格 | 50T |
有效期 | 12個(gè)月 | 保存 | -20℃保存 |
基礎(chǔ)原理：
引物靶向輪狀病毒特定群別專屬 VP6 基因序列，可完成病毒群鑒別。
提取糞便樣本內(nèi)病毒 RNA，反轉(zhuǎn)錄合成 cDNA 后開展群特異性 PCR 擴(kuò)增。
通過擴(kuò)增信號(hào)判定待測(cè)輪狀病毒所屬病毒群。
?操作步驟?：
樣本處理（樣本處理區(qū)）
推薦使用磁珠法或離心柱法提取核酸，避免交叉污染。
試劑配制（試劑準(zhǔn)備區(qū)）
反應(yīng)體系（20μL/管）：19μL反應(yīng)液 + 1μL酶液，分裝后加入5μL待測(cè)核酸或質(zhì)控品。
PCR擴(kuò)增（核酸擴(kuò)增區(qū)）
循環(huán)參數(shù)：
預(yù)變性：95℃ 2min（1循環(huán)）；
擴(kuò)增：95℃ 15sec → 60℃ 30sec（45循環(huán)，60℃時(shí)采集熒光信號(hào)，F(xiàn)AM通道）。
結(jié)果分析
陽性：Ct值≤40，擴(kuò)增曲線呈指數(shù)增長；
陰性：無Ct值或曲線平直；
可疑：40<Ct≤45，需復(fù)測(cè)確認(rèn)。
質(zhì)控要求：陽性質(zhì)控Ct≤32，陰性質(zhì)控?zé)o擴(kuò)增。
?注意事項(xiàng)?：
所有耗材必須無核酸酶，吸頭一次性使用，禁止重復(fù)吸??；
陽性模板拷貝濃度高，開蓋操作輕柔，避免氣溶膠擴(kuò)散造成全域污染；
試劑融化后冰上放置不超過 2 h，用完立即放回 - 20℃；
廢棄 PCR 管、擴(kuò)增產(chǎn)物、實(shí)驗(yàn)廢液統(tǒng)一 121℃高壓滅菌后丟棄；
試劑盒僅用于動(dòng)植物、水產(chǎn)、微生物疫病科研檢測(cè)，禁止人體臨床檢測(cè)；
移液器、操作臺(tái)定期紫外消毒，長期污染需更換全新試劑盒全套試劑。
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關(guān)鍵字： 輪狀病毒群;PCR檢測(cè)試劑盒;
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