本試劑盒靶向腸道沙門氏菌屬通用保守基因，可廣譜檢測各類腸道沙門氏菌核酸，快速判定樣本是否存在腸道沙門氏菌感染。腸道沙門氏菌是食品、畜禽養(yǎng)殖中高發(fā)致病菌，易引發(fā)群體性腸道感染，本試劑盒通用性強、篩查效率高，適用于食品微生物檢測、畜禽養(yǎng)殖常態(tài)化篩查、臨床腸道感染病原初篩。
產(chǎn)品名稱 | 腸道沙門氏菌PCR檢測試劑盒 | 貨號 | YS-P014704 |
英文名稱 | Salmonella entericaPCR | 規(guī)格 | 50T |
有效期 | 12個月 | 保存 | -20℃保存 |
基礎(chǔ)原理：
引物選取腸道沙門氏菌物種特異性保守基因，可識別該菌種全部血清型核酸。
抽提糞便、食品樣本細菌 DNA，去除微生物雜質(zhì)后進行 PCR 擴增。
擴增陽性提示樣本存在腸道沙門氏菌，適用于菌種水平篩查。
?操作步驟?：
1. DNA提?。颖局苽鋮^(qū)）
使用自選方法或兼容試劑盒提取樣本DNA，建議濃度≥10 ng/μL，A260/A280比值1.8-2.0。
2. 標(biāo)準(zhǔn)曲線制備（獨立操作區(qū)）
標(biāo)記6管為梯度稀釋點（如7-2），每管加45 μL DEPC水。
取5 μL陽性對照依次稀釋，混勻后作為標(biāo)準(zhǔn)品（避免污染）。
3. PCR反應(yīng)體系配制（試劑配制區(qū)）
按以下比例配制（示例）：
| 組分 | 體積（μL） |
| 2× Master Mix | 10 |
| 引物混合液 | 2 |
| DNA模板 | 2 |
| DEPC水 | 6 |
4. 上機檢測
程序設(shè)置：預(yù)變性95℃ 3 min；40循環(huán)（95℃ 10 s, 60℃ 30 s）；熔解曲線分析。
數(shù)據(jù)分析：根據(jù)Ct值及標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣本濃度。
?注意事項?：
1、實驗分區(qū)管理?
實驗全程需嚴(yán)格劃分三個獨立區(qū)域：?試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)、PCR擴增區(qū)?，各區(qū)實驗服、移液器及耗材?嚴(yán)禁混用?，防止交叉污染。
?2、防止污染操作?
使用帶濾芯槍頭，每步更換槍頭；
陽性對照操作應(yīng)在專用生物安全柜中進行，避免污染其他試劑；
加樣后立即蓋緊管蓋，避免氣溶膠擴散。
?3、試劑保存與使用?
所有試劑需?-20℃避光保存?，避免反復(fù)凍融，確保穩(wěn)定性；
使用前于冰上解凍并輕柔混勻，瞬時離心后使用。
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關(guān)鍵字： 腸道沙門氏菌;PCR檢測試劑盒;
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