本試劑盒依托成熟PCR分子擴(kuò)增技術(shù)，靶向瑟氏泰勒蟲保守核酸序列優(yōu)化檢測(cè)體系，可高效檢測(cè)牛羊血液、組織樣本中的瑟氏泰勒蟲核酸。試劑盒適配瑟氏泰勒蟲流行檢測(cè)場(chǎng)景，靈敏度高、重復(fù)性好，可精準(zhǔn)鑒別瑟氏泰勒蟲與其他泰勒蟲病原，適用于牛羊養(yǎng)殖疫病常態(tài)化篩查、臨床病例診斷、蜱傳原蟲病流行病學(xué)調(diào)查。
產(chǎn)品名稱 | 瑟氏泰勒蟲PCR檢測(cè)試劑盒 | 貨號(hào) | YS-P014837 |
英文名稱 | Theileria sergentiPCR | 規(guī)格 | 50T |
有效期 | 12個(gè)月 | 保存 | -20℃保存 |
基礎(chǔ)原理：
處理動(dòng)物抗凝血液樣本，裂解細(xì)胞獲取瑟氏泰勒蟲原蟲 DNA；
利用瑟氏泰勒蟲專屬引物擴(kuò)增其 18S 小亞基核糖體 RNA 基因；
通過電泳檢測(cè)擴(kuò)增片段，快速篩查瑟氏泰勒蟲感染情況。
?操作步驟?：
1. 樣本處理
提取待測(cè)樣本RNA，建議使用商品化RNA提取試劑盒。
2. 陽(yáng)性對(duì)照稀釋（示例：6個(gè)梯度）
標(biāo)記離心管（7至2號(hào)），每管加入45μL模板稀釋液。
按10倍梯度稀釋陽(yáng)性對(duì)照，避免交叉污染。
3. PCR反應(yīng)體系配制（20μL/反應(yīng)）
| 組分 | 體積（μL） |
| RT-PCR反應(yīng)液 | 10 |
| 熒光染料 | 0.5 |
| 引物混合液 | 2 |
| RNA模板 | 2 |
| RNase-free水 | 補(bǔ)至20 |
4. 上機(jī)程序
逆轉(zhuǎn)錄：50℃ 15分鐘（可選，根據(jù)病毒RNA特性調(diào)整）。
預(yù)變性：95℃ 2分鐘。
循環(huán)：95℃ 15秒 → 60℃ 30秒（采集熒光信號(hào)），共40循環(huán)。
?注意事項(xiàng)?：
1、實(shí)驗(yàn)分區(qū)管理?
實(shí)驗(yàn)全程需嚴(yán)格劃分三個(gè)獨(dú)立區(qū)域：?試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)、PCR擴(kuò)增區(qū)?，各區(qū)實(shí)驗(yàn)服、移液器及耗材?嚴(yán)禁混用?，防止交叉污染。
?2、防止污染操作?
使用帶濾芯槍頭，每步更換槍頭；
陽(yáng)性對(duì)照操作應(yīng)在專用生物安全柜中進(jìn)行，避免污染其他試劑；
加樣后立即蓋緊管蓋，避免氣溶膠擴(kuò)散。
?3、試劑保存與使用?
所有試劑需?-20℃避光保存?，避免反復(fù)凍融，確保穩(wěn)定性；
使用前于冰上解凍并輕柔混勻，瞬時(shí)離心后使用。
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關(guān)鍵字： 瑟氏泰勒蟲;PCR檢測(cè)試劑盒;
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