?產(chǎn)品名稱：偽中間型葡萄球菌PCR檢測試劑盒
英文名稱：Staphylococcus pseudintermediusPCR
貨號：YS-P014775
分類：PCR檢測試劑盒
規(guī)格?：50T/盒
檢測原理：
靶向偽中間型葡萄球菌特異性毒力基因設計擴增引物，適用于寵物皮膚病樣本篩查。
提取病灶樣本細菌 DNA 作為模板，在 Taq 聚合酶作用下擴增特異性基因片段。
對比擴增條帶與陽性對照，判斷樣本是否攜帶偽中間型葡萄球菌。
實驗流程：
DNA提取（樣本制備區(qū)）
使用自選方法或兼容的核酸提取試劑盒純化樣本DNA，確保無抑制劑殘留。
標準曲線制備（樣本制備區(qū)）
標記6支離心管為7至2號，每管加入45 μL DEPC-H2O（需使用帶濾芯槍頭）。
梯度稀釋陽性對照：
7號管：加入5 μL 1×10^8拷貝/μL陽性對照，震蕩混勻，得1×10^7拷貝/μL標準品；
依次稀釋至2號管，最終濃度跨5個數(shù)量級（1×10^7至1×10^3拷貝/μL）。
所有標準品置于冰上備用，避免反復凍融。
試劑配制（試劑準備區(qū)）
反應液避光解凍后渦旋混勻，短暫離心分裝至PCR管。
每反應體系20 μL，含預混引物、熒光染料及緩沖液。
加樣（樣本處理區(qū)）
分別加入5 μL待測DNA或標準品至反應管，陰性對照以DEPC-H2O替代。
蓋緊管蓋，避免氣泡干擾。
PCR擴增（核酸擴增區(qū)）
按以下程序運行定量PCR儀：
預變性：95℃ 2分鐘；
循環(huán)階段（40次）：95℃ 15秒 → 60℃ 30秒（采集熒光信號）；
熔解曲線分析（可選）。
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注意事項：
所有試劑避免反復凍融，可分裝小體積凍存；融化后冰上放置不超過 2 h，酶失活會直接導致無擴增條帶
陽性質?？截悢?shù)極高，開蓋全程在生物安全柜操作，防止氣溶膠污染實驗室
所有耗材必須無核酸酶，槍頭一次性使用；實驗后 PCR 管、廢液 121℃高壓滅菌后丟棄
試劑盒出現(xiàn)渾濁、變色、結冰分層、過期禁止使用
僅限科研檢測，嚴禁用于人體臨床疾病診斷、食品出廠檢疫等合規(guī)檢測場景
土壤、糞便、腐殖質樣本優(yōu)先使用磁珠法提取核酸，減少抑制劑干擾
關鍵字： 偽中間型葡萄球菌;PCR檢測試劑盒;
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