本試劑盒針對(duì)單端孢霉屬真菌的共有保守基因序列設(shè)計(jì)通用擴(kuò)增引物，可廣譜檢測(cè)各類單端孢霉屬致病真菌核酸。單端孢霉屬真菌易引發(fā)糧食、飼料霉變及人畜真菌感染，本試劑盒通用性強(qiáng)、檢測(cè)范圍廣，特異性不與其他霉菌、細(xì)菌交叉反應(yīng)，可適配糧食樣本、飼料樣本、環(huán)境樣本及臨床感染樣本檢測(cè)，適用于食品檢疫、畜牧養(yǎng)殖、環(huán)境監(jiān)測(cè)及臨床真菌檢測(cè)等多個(gè)場(chǎng)景。
產(chǎn)品名稱 | 單端孢霉屬通用PCR檢測(cè)試劑盒 | 貨號(hào) | YS-P014873 |
英文名稱 | Trichothecium spp.PCR | 規(guī)格 | 50T |
有效期 | 12個(gè)月 | 保存 | -20℃保存 |
基礎(chǔ)原理：
引物靶向單端孢霉屬共有保守 ITS 序列，可檢測(cè)屬內(nèi)多種致病菌株。
對(duì)霉變樣本、組織樣本破壁提取真菌 DNA，作為 PCR 擴(kuò)增模板。
若擴(kuò)增出目的片段，即可判定樣本含有單端孢霉屬真菌核酸。
?操作步驟?：
1. 樣本處理
提取待測(cè)樣本RNA，建議使用商品化RNA提取試劑盒。
2. 陽(yáng)性對(duì)照稀釋（示例：6個(gè)梯度）
標(biāo)記離心管（7至2號(hào)），每管加入45μL模板稀釋液。
按10倍梯度稀釋陽(yáng)性對(duì)照，避免交叉污染。
3. PCR反應(yīng)體系配制（20μL/反應(yīng)）
| 組分 | 體積（μL） |
| RT-PCR反應(yīng)液 | 10 |
| 熒光染料 | 0.5 |
| 引物混合液 | 2 |
| RNA模板 | 2 |
| RNase-free水 | 補(bǔ)至20 |
4. 上機(jī)程序
逆轉(zhuǎn)錄：50℃ 15分鐘（可選，根據(jù)病毒RNA特性調(diào)整）。
預(yù)變性：95℃ 2分鐘。
循環(huán)：95℃ 15秒 → 60℃ 30秒（采集熒光信號(hào)），共40循環(huán)。
?注意事項(xiàng)?：
避免反復(fù)凍融試劑，解凍后需充分混勻。
實(shí)驗(yàn)環(huán)境需嚴(yán)格分區(qū)（試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)、擴(kuò)增區(qū)），防止污染。
陽(yáng)性對(duì)照需與樣本分裝操作。
本產(chǎn)品僅限科研用途，不可用于臨床診斷。
操作時(shí)需穿戴防護(hù)裝備，避免試劑接觸皮膚或眼睛。
樣本采集需遵循無菌原則，運(yùn)輸時(shí)使用干冰或冰袋保存。
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