?產(chǎn)品名稱:無乳鏈球菌PCR檢測試劑盒
英文名稱:Streptococcus agalactiaePCR
貨號:YS-P014781
分類:PCR檢測試劑盒
規(guī)格?:50T/盒
檢測原理:
引物針對無乳鏈球菌 cfb 毒力基因保守序列設計,可特異性識別該菌。
從乳汁、生殖道等樣本提取細菌 DNA,通過 PCR 擴增富集目的基因片段。
根據(jù)擴增產(chǎn)物電泳結果,快速篩查奶牛乳腺炎及人源無乳鏈球菌感染。
實驗流程:
1. DNA提?。颖局苽鋮^(qū))
使用自選方法或兼容試劑盒提取樣本DNA,建議濃度≥10 ng/μL,A260/A280比值1.8-2.0。
2. 標準曲線制備(獨立操作區(qū))
標記6管為梯度稀釋點(如7-2),每管加45 μL DEPC水。
取5 μL陽性對照依次稀釋,混勻后作為標準品(避免污染)。
3. PCR反應體系配制(試劑配制區(qū))
按以下比例配制(示例):
| 組分 | 體積(μL) |
| 2× Master Mix | 10 |
| 引物混合液 | 2 |
| DNA模板 | 2 |
| DEPC水 | 6 |
4. 上機檢測
程序設置:預變性95℃ 3 min;40循環(huán)(95℃ 10 s, 60℃ 30 s);熔解曲線分析。
數(shù)據(jù)分析:根據(jù)Ct值及標準曲線計算樣本濃度。
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注意事項:
所有試劑避免反復凍融,可分裝小體積凍存;融化后冰上放置不超過 2 h,酶失活會直接導致無擴增條帶
陽性質(zhì)粒拷貝數(shù)極高,開蓋全程在生物安全柜操作,防止氣溶膠污染實驗室
所有耗材必須無核酸酶,槍頭一次性使用;實驗后 PCR 管、廢液 121℃高壓滅菌后丟棄
試劑盒出現(xiàn)渾濁、變色、結冰分層、過期禁止使用
僅限科研檢測,嚴禁用于人體臨床疾病診斷、食品出廠檢疫等合規(guī)檢測場景
土壤、糞便、腐殖質(zhì)樣本優(yōu)先使用磁珠法提取核酸,減少抑制劑干擾
關鍵字: 無乳鏈球菌;PCR檢測試劑盒;
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