本試劑盒靶向甲型脊髓灰質(zhì)炎病毒專屬基因序列，采用特異性PCR擴(kuò)增技術(shù)，可精準(zhǔn)篩查樣本中的甲型脊髓灰質(zhì)炎病毒核酸。產(chǎn)品亞型特異性極強(qiáng)，可區(qū)分甲型與其他亞型脊髓灰質(zhì)炎病毒，檢測快速、靈敏度高，適用于腸道病毒分型檢測、小兒麻痹癥病原鑒別、疫苗監(jiān)測及流行病學(xué)毒株分類調(diào)研。
產(chǎn)品名稱 | 甲型脊髓灰質(zhì)炎病毒PCR檢測試劑盒 | 貨號(hào) | YS-P015069 |
英文名稱 | Poliovirus Type A PCR Detection Kit | 規(guī)格 | 50T |
有效期 | 12個(gè)月 | 保存 | -20℃保存 |
基礎(chǔ)原理：
引物針對(duì)甲型脊髓灰質(zhì)炎病毒 VP1 基因特異性位點(diǎn)設(shè)計(jì)，實(shí)現(xiàn)血清型專屬擴(kuò)增識(shí)別。
提取送檢樣本病毒 RNA 反轉(zhuǎn)錄為 cDNA 模板，通過 PCR 擴(kuò)增富集甲型毒株核酸。
與其他型別脊灰病毒核酸做對(duì)照，保障分型檢測結(jié)果精準(zhǔn)無誤。
?操作步驟?：
（一）反應(yīng)體系配制（冰上操作，防酶失活與污染）
按 “水→緩沖液→dNTP→引物→模板→Taq 酶” 順序加樣（酶最后加，避免失活）。
輕輕渦旋混勻，短暫離心（3000rpm，10s），使液體沉至管底。
無熱蓋的 PCR 儀：加 1 滴礦物油覆蓋液面，防止蒸發(fā)。
（二）PCR 程序設(shè)置（標(biāo)準(zhǔn) 35 循環(huán)）
預(yù)變性：94℃，3-5min（徹底變性模板 DNA）。
循環(huán)階段（35 次）：
變性：94℃，30s（雙鏈解鏈）。
退火：55-65℃，30s（引物結(jié)合模板，按引物 Tm 值調(diào)整）。
延伸：72℃，1min/kb（Taq 酶合成新鏈，1kb 片段約 1min）。
終延伸：72℃，5-10min（確保片段完整延伸）。
保溫：4℃，∞（防止非特異性復(fù)性，短期保存）。
（三）產(chǎn)物檢測（瓊脂糖凝膠電泳）
制膠：1% 瓊脂糖凝膠（1g 瓊脂糖 + 100mL 1×TAE 緩沖液），加熱融化后加核酸染料，倒膠插梳，凝固 30min。
上樣：取 5μL PCR 產(chǎn)物 + 1μL 上樣緩沖液，點(diǎn)樣；同時(shí)加 DNA Marker（分子量對(duì)照）。
電泳：120V，20-30min，至溴酚藍(lán)遷移至凝膠 2/3 處。
成像：凝膠成像系統(tǒng)觀察條帶，目標(biāo)片段位置與預(yù)期一致則為陽性。
四、參數(shù)優(yōu)化
退火溫度（Tm）：引物 Tm 值 = 4×(G+C)+2×(A+T)，退火溫度一般低于 Tm 值 5℃，溫度過高無條帶，過低非特異性條帶多。
Mg2?濃度：1.5-2.5mM，濃度過低酶活性低、產(chǎn)量少；過高非特異性擴(kuò)增增加。
循環(huán)數(shù)：25-35 個(gè)循環(huán)，少于 25 個(gè)產(chǎn)物不足，多于 35 個(gè)易出現(xiàn)非特異性條帶。
延伸時(shí)間：按目標(biāo)片段長度調(diào)整，≤1kb 用 1min，1-3kb 用 2-3min。
?注意事項(xiàng)?：
避免反復(fù)凍融試劑，解凍后需充分混勻。
實(shí)驗(yàn)環(huán)境需嚴(yán)格分區(qū)（試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)、擴(kuò)增區(qū)），防止污染。
陽性對(duì)照需與樣本分裝操作。
本產(chǎn)品僅限科研用途，不可用于臨床診斷。
操作時(shí)需穿戴防護(hù)裝備，避免試劑接觸皮膚或眼睛。
樣本采集需遵循無菌原則，運(yùn)輸時(shí)使用干冰或冰袋保存。
公司正在出售的產(chǎn)品：
產(chǎn)氣莢膜梭菌PCR檢測試劑盒 | 非洲豬瘟病毒PCR檢測試劑盒科研用 | 小鼠胰島素降解酶ELISA試劑盒 |
產(chǎn)氣莢膜梭狀芽孢桿菌型PCR檢測試劑盒 | 結(jié)核分支桿菌PCR檢測試劑盒 | 小鼠胰島素受體底物1ELISA試劑盒 |
腸出血性大腸桿菌O157血清型染料法熒光定量PCR試劑盒 | 伯氏立克次氏體(柯克斯體)探針法熒光定量PCR試劑盒 | 小鼠糖缺失性轉(zhuǎn)鐵蛋白ELISA試劑盒 |
腸道病毒PCR檢測試劑盒 | 凋亡抑制蛋白Survivin基因PCR檢測試劑盒 | 小鼠胰高血糖素樣肽1ELISA試劑盒 |
傳染性造血器官壞死病毒（IHNV）RNA核酸檢測試劑盒（恒溫?zé)晒夥ǎ?/span> | 鉤端螺旋體PCR檢測試劑盒 | 小鼠血管內(nèi)皮生長因子受體2ELISA試劑盒 |
遲緩愛德華氏菌核酸檢測試劑盒（恒溫?zé)晒夥ǎ?/span> | 呼吸道病毒多重PCR檢測試劑盒 | 小鼠載脂蛋白A4ELISA試劑盒 |
傳染性非典型肺炎病毒PCR檢測試劑盒 | 副結(jié)核桿菌PCR檢測試劑盒 | 甲型脊髓灰質(zhì)炎病毒PCR檢測試劑盒小鼠血小板活化因子ELISA試劑盒 |
傳染性脾腎壞死病病毒PCR檢測試劑盒 | 脊髓灰質(zhì)炎病毒3型PCR檢測試劑盒 | 小鼠轉(zhuǎn)化生長因子β2ELISA試劑盒 |
腸粘附性大腸桿菌PCR檢測試劑盒 | 霍亂弧菌O1群PCR檢測試劑盒 | 小鼠轉(zhuǎn)化生長因子β1ELISA試劑盒 |
關(guān)鍵字： 甲型脊髓灰質(zhì)炎病毒;PCR檢測試劑盒;
上海研生實(shí)業(yè)有限公司成立于2011年專業(yè)銷售各種科學(xué)實(shí)驗(yàn)產(chǎn)品，包括分子生物學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)、免疫學(xué)、等多個(gè)研究及應(yīng)用領(lǐng)域。旗下有“上研生"品牌。
我們努力將歐美進(jìn)口品牌的產(chǎn)品推薦給各類研究人員；另一方面也非常重視國內(nèi)科研市場的產(chǎn)品開發(fā)，推出了一系列具有競爭力的產(chǎn)品和服務(wù)。
同時(shí)國家對(duì)于生物行業(yè)的發(fā)展給予極大的重視，更多地側(cè)重于科研的投入。公司的服務(wù)和業(yè)務(wù)在同行獲得認(rèn)可。也具備豐富的管理經(jīng)驗(yàn)，同時(shí)我們建立了集技術(shù)支持、售后服務(wù)等多方位的服務(wù)體系。我們有激情、有理想，更有責(zé)任感，是您科研道路上值得信賴的伙伴。
公司的理念是：以誠信為本，努力打造優(yōu)質(zhì)品牌，為您提供產(chǎn)品的售中、售后服務(wù)。