?產(chǎn)品名稱:鼻病毒PCR檢測(cè)試劑盒
英文名稱:Rhinovirus PCR Detection Kit
貨號(hào):YS-P014953
分類:PCR檢測(cè)試劑盒
規(guī)格?:50T/盒
檢測(cè)原理:
引物靶向人鼻病毒 5'UTR 非編碼區(qū)高度保守序列,可覆蓋多種鼻病毒血清型。
提取呼吸道樣本病毒 RNA,反轉(zhuǎn)錄生成 cDNA 后再進(jìn)行 PCR 擴(kuò)增富集核酸。
借助陽性病毒 RNA 對(duì)照,排查呼吸道樣本核酸提取失敗造成的漏檢問題。
實(shí)驗(yàn)流程:
樣本處理(樣本處理區(qū))
推薦使用磁珠法或離心柱法提取核酸,避免交叉污染。
試劑配制(試劑準(zhǔn)備區(qū))
反應(yīng)體系(20μL/管):19μL反應(yīng)液 + 1μL酶液,分裝后加入5μL待測(cè)核酸或質(zhì)控品。
PCR擴(kuò)增(核酸擴(kuò)增區(qū))
循環(huán)參數(shù):
預(yù)變性:95℃ 2min(1循環(huán));
擴(kuò)增:95℃ 15sec → 60℃ 30sec(45循環(huán),60℃時(shí)采集熒光信號(hào),F(xiàn)AM通道)。
結(jié)果分析
陽性:Ct值≤40,擴(kuò)增曲線呈指數(shù)增長(zhǎng);
陰性:無Ct值或曲線平直;
可疑:40<Ct≤45,需復(fù)測(cè)確認(rèn)。
質(zhì)控要求:陽性質(zhì)控Ct≤32,陰性質(zhì)控?zé)o擴(kuò)增。
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注意事項(xiàng):
所有試劑避免反復(fù)凍融,可分裝小體積凍存;融化后冰上放置不超過 2 h,酶失活會(huì)直接導(dǎo)致無擴(kuò)增條帶
陽性質(zhì)??截悢?shù)極高,開蓋全程在生物安全柜操作,防止氣溶膠污染實(shí)驗(yàn)室
所有耗材必須無核酸酶,槍頭一次性使用;實(shí)驗(yàn)后 PCR 管、廢液 121℃高壓滅菌后丟棄
試劑盒出現(xiàn)渾濁、變色、結(jié)冰分層、過期禁止使用
僅限科研檢測(cè),嚴(yán)禁用于人體臨床疾病診斷、食品出廠檢疫等合規(guī)檢測(cè)場(chǎng)景
土壤、糞便、腐殖質(zhì)樣本優(yōu)先使用磁珠法提取核酸,減少抑制劑干擾
關(guān)鍵字: 鼻病毒;PCR檢測(cè)試劑盒;
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