?產(chǎn)品名稱:產(chǎn)毒副溶血弧菌PCR試劑盒
英文名稱:Toxigenic Vibrio parahaemolyticus PCR Detection Kit
貨號:YS-P014964
分類:PCR檢測試劑盒
規(guī)格?:50T/盒
檢測原理:
引物針對副溶血弧菌 tdh/trh 溶血毒力基因設(shè)計,可精準(zhǔn)區(qū)分無毒株與可致病產(chǎn)毒株,避免環(huán)境普通副溶血弧菌造成誤檢。
提取水產(chǎn)品、嘔吐排泄物等樣本的細(xì)菌基因組 DNA 作為擴增模板,在優(yōu)化緩沖體系下啟動特異性核酸擴增反應(yīng)。
實驗同步設(shè)置無毒副溶血弧菌陰性對照,可有效排查非特異性擴增,保障食品中毒溯源檢測結(jié)果可靠。
實驗流程:
DNA提?。颖局苽鋮^(qū))
使用自選方法或兼容的核酸提取試劑盒純化樣本DNA,確保無抑制劑殘留。
標(biāo)準(zhǔn)曲線制備(樣本制備區(qū))
標(biāo)記6支離心管為7至2號,每管加入45 μL DEPC-H2O(需使用帶濾芯槍頭)。
梯度稀釋陽性對照:
7號管:加入5 μL 1×10^8拷貝/μL陽性對照,震蕩混勻,得1×10^7拷貝/μL標(biāo)準(zhǔn)品;
依次稀釋至2號管,最終濃度跨5個數(shù)量級(1×10^7至1×10^3拷貝/μL)。
所有標(biāo)準(zhǔn)品置于冰上備用,避免反復(fù)凍融。
試劑配制(試劑準(zhǔn)備區(qū))
反應(yīng)液避光解凍后渦旋混勻,短暫離心分裝至PCR管。
每反應(yīng)體系20 μL,含預(yù)混引物、熒光染料及緩沖液。
加樣(樣本處理區(qū))
分別加入5 μL待測DNA或標(biāo)準(zhǔn)品至反應(yīng)管,陰性對照以DEPC-H2O替代。
蓋緊管蓋,避免氣泡干擾。
PCR擴增(核酸擴增區(qū))
按以下程序運行定量PCR儀:
預(yù)變性:95℃ 2分鐘;
循環(huán)階段(40次):95℃ 15秒 → 60℃ 30秒(采集熒光信號);
熔解曲線分析(可選)。
公司正在出售的產(chǎn)品:
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注意事項:
所有試劑避免反復(fù)凍融,可分裝小體積凍存;融化后冰上放置不超過 2 h,酶失活會直接導(dǎo)致無擴增條帶
陽性質(zhì)??截悢?shù)極高,開蓋全程在生物安全柜操作,防止氣溶膠污染實驗室
所有耗材必須無核酸酶,槍頭一次性使用;實驗后 PCR 管、廢液 121℃高壓滅菌后丟棄
試劑盒出現(xiàn)渾濁、變色、結(jié)冰分層、過期禁止使用
僅限科研檢測,嚴(yán)禁用于人體臨床疾病診斷、食品出廠檢疫等合規(guī)檢測場景
土壤、糞便、腐殖質(zhì)樣本優(yōu)先使用磁珠法提取核酸,減少抑制劑干擾
關(guān)鍵字: 產(chǎn)毒副溶血弧菌PCR試劑盒;PCR檢測試劑盒;
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