人磷酸化α-突觸核蛋白Ser129(p-α-SYN)elisa試劑盒
商品屬性：
英文名稱 | human p-α-SYN elisa kit | 靈敏度 | 0.078125ng/mL |
檢測范圍 | 0.15625ng/mL-10ng/mL | 貨號 | PH21299 |
核心參數(shù)：
檢測原理：磷酸化特異性雙抗體夾心法 ELISA
種屬反應(yīng)性：僅識別人源 Ser129 位點磷酸化亞型
檢測時間：90-110min
保存條件：2-8℃低溫避光，避免反復(fù)凍融
特異性：僅識別 Ser129 磷酸化型，不結(jié)合總蛋白及其他磷酸化位點
板內(nèi)變異系數(shù)：≤8%
夾心法數(shù)據(jù)：
| 校準(zhǔn)品濃度(ng/mL) | 10.00 | 5.00 | 2.50 | 1.25 | 0.63 | 0.31 | 0.16 | 0.00 |
| OD450/630值 | 2.691 | 1.552 | 0.828 | 0.488 | 0.355 | 0.173 | 0.097 | 0.030 |
| 校正OD值 | 2.660 | 1.521 | 0.798 | 0.458 | 0.325 | 0.142 | 0.067 | 0.000
|
夾心法標(biāo)曲：
產(chǎn)品定義：
采用磷酸化位點特異性雙抗體夾心法：將抗人α-突觸核蛋白的抗體包被于酶標(biāo)板，捕獲樣本中的α-突觸核蛋白，再加入識別Ser129磷酸化位點的HRP標(biāo)記檢測抗體。經(jīng)過孵育、洗滌后，加入底物TMB顯色，顏色深淺與樣本中磷酸化α-突觸核蛋白Ser129的含量呈正相關(guān)，通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣本濃度，反映帕金森病等神經(jīng)退行性病變相關(guān)狀態(tài)。
操作步驟:
?試劑準(zhǔn)備?：所有試劑恢復(fù)至室溫（18–25℃），洗滌液如有結(jié)晶需加熱溶解；
?標(biāo)準(zhǔn)品配制?：將凍干標(biāo)準(zhǔn)品用1mL標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液溶解，得2000 pg/mL原液，再倍比稀釋成7個濃度梯度，另設(shè)空白孔（僅稀釋液）；
?加樣?：每孔加入50μL樣本或標(biāo)準(zhǔn)品，37℃孵育30–60分鐘；
?洗板?：棄去孔內(nèi)液體，用1×洗滌液洗板5次，拍干；
?加酶標(biāo)抗體?：每孔加入100μL檢測抗體-HRP，37℃孵育1小時；
?洗板?：同上；
?顯色?：每孔加入50μL底物A + 50μL底物B，37℃避光孵育10–30分鐘；
?終止?：每孔加入50μL終止液，顏色由藍(lán)變黃；
?讀數(shù)?：在450 nm波長下用酶標(biāo)儀測定OD值，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣本濃度。
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關(guān)鍵字： 人磷酸化α-突觸核蛋白Ser129;p-α-SYN;elisa試劑盒;
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