人磷酸化蛋白酪氨酸激酶JAK-2(phospho-Jak2)elisa試劑盒
商品屬性：
英文名稱 | human phospho-Jak2 elisa kit | 靈敏度 | 0.078125ng/mL |
檢測(cè)范圍 | 0.15625ng/mL-10ng/mL | 貨號(hào) | PH21841 |
核心參數(shù)：
檢測(cè)原理：位點(diǎn)特異性磷酸化夾心 ELISA
種屬反應(yīng)性：僅人
檢測(cè)時(shí)間：90-110min
保存條件：2-8℃冷藏，樣本需低溫預(yù)處理
特異性：特異性識(shí)別磷酸化 JAK2，與非磷酸化型無(wú)交叉
板內(nèi)變異系數(shù)：≤8%
夾心法數(shù)據(jù)：
| 校準(zhǔn)品濃度(ng/mL) | 10.00 | 5.00 | 2.50 | 1.25 | 0.63 | 0.31 | 0.16 | 0.00 |
| OD450/630值 | 2.691 | 1.552 | 0.828 | 0.488 | 0.355 | 0.173 | 0.097 | 0.030 |
| 校正OD值 | 2.660 | 1.521 | 0.798 | 0.458 | 0.325 | 0.142 | 0.067 | 0.000
|
夾心法標(biāo)曲：
產(chǎn)品定義：
采用磷酸化位點(diǎn)特異性雙抗體夾心法：利用抗JAK2抗體包被酶標(biāo)板，捕獲樣本中的JAK2蛋白，再加入識(shí)別磷酸化位點(diǎn)的HRP標(biāo)記檢測(cè)抗體。形成的夾心復(fù)合物經(jīng)過(guò)洗滌后，加入底物產(chǎn)生顯色反應(yīng)，顏色深淺與樣本中磷酸化JAK2的濃度成正比，通過(guò)酶標(biāo)儀讀取結(jié)果并計(jì)算濃度，反映JAK-STAT信號(hào)通路活化與血液系統(tǒng)疾病相關(guān)狀態(tài)。
操作流程:
加樣
設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔、樣本孔和空白孔：標(biāo)準(zhǔn)品孔加入不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL；樣本孔先加樣本稀釋液40μL，再加待測(cè)樣本10μL（樣本最終稀釋5倍，結(jié)果需乘以5）；空白孔不加任何液體
溫育
除空白孔外，每孔加入HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體100μL，用封板膜封住反應(yīng)孔，37℃溫育60分鐘
洗板
棄去孔內(nèi)液體，在吸水紙上拍干；每孔加滿洗滌液，靜置1分鐘后棄去，重復(fù)洗板5次；最后一次洗板后需將孔內(nèi)液體徹底拍干
顯色
每孔加入底物液A、B各50μL，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘
終止反應(yīng)
每孔加入終止液50μL，此時(shí)藍(lán)色會(huì)立即轉(zhuǎn)為黃色
讀數(shù)
以空白孔調(diào)零，15分鐘內(nèi)用酶標(biāo)儀測(cè)定450nm波長(zhǎng)下各孔的吸光度（OD值）
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關(guān)鍵字： 人磷酸化蛋白酪氨酸激酶JAK-2;phospho-Jak2;elisa試劑盒;
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