產(chǎn)朊假絲酵母探針法qPCR試劑盒(不含內(nèi)參)
產(chǎn)品及特點
產(chǎn)朊假絲酵母（Candida utilis）也被稱作產(chǎn)朊圓酵母或食用圓酵母，是一種營養(yǎng)價值極高的微生物。它不僅蛋白質(zhì)和維生素B的含量豐富，甚至超過了啤酒酵母。產(chǎn)朊假絲酵母能夠利用多種碳源，包括五碳糖和六碳糖，即使在有氧條件下也不會產(chǎn)生酒精。這種特性使其在工業(yè)應(yīng)用中具有巨大的潛力。它能夠轉(zhuǎn)化造紙工業(yè)的亞硫酸廢液、糖蜜、淀粉廠廢液以及木材水解液等副產(chǎn)品和廢料，生產(chǎn)出既適合人類也適合動物食用的高質(zhì)量蛋白質(zhì)。此外，產(chǎn)朊假絲酵母的分布非常廣泛，可以在多種環(huán)境中找到，如酒廠的酵母沉淀物、牛的消化道、花朵以及人類的唾液等。由于其能夠利用多種碳源和氮源合成高營養(yǎng)價值的蛋白質(zhì)，產(chǎn)朊假絲酵母被認(rèn)為是生產(chǎn)食用、藥用或飼料用單細(xì)胞蛋白的理想菌種。
綜上所述，產(chǎn)朊假絲酵母不僅是一種營養(yǎng)豐富的微生物，而且其在工業(yè)生產(chǎn)中的多功能性和環(huán)境適應(yīng)性使其成為一種極具價值的生物資源。因此快速檢測產(chǎn)朊假絲酵母具有重要的意義。為此，本公司以探針法qPCR技術(shù)為基礎(chǔ)開發(fā)了產(chǎn)朊假絲酵母的檢測試劑盒，它有下列特點：
1. 即開即用，用戶只需要提供樣品DNA模板。
2. 引物和探針經(jīng)過優(yōu)化，分析靈敏度高，可以達到100拷貝/反應(yīng)。
3. 提供陽性對照，便于區(qū)分假陰性樣品。
4. 特異性高，引物是根據(jù)產(chǎn)朊假絲酵母DNA高度保守區(qū)設(shè)計，不會跟其他生物的DNA發(fā)生交叉反應(yīng)。
5. 既可用于定性檢測，又可用于定量檢測。定量檢測時線性范圍至少為5個數(shù)量級。
6. 本產(chǎn)品足夠50次20 μL體系的探針法qPCR反應(yīng)。
7. 本產(chǎn)品只能用于科研。
規(guī)格及成分
成分 | 規(guī)格 | 包裝 |
2×Probe qPCR MasterMix | 0.5mL | 0.5mL本色管 |
熒光PCR專用模板稀釋液 | 1mL | 1.5mL綠蓋管 |
超純水 | 1mL | 1.5mL藍蓋管 |
產(chǎn)朊假絲酵母qPCR引物-探針干粉 | 50次 | 0.5mL棕色管 |
產(chǎn)朊假絲酵母qPCR陽性對照(1E7拷貝/μL) | 50μL | 0.5mL黃蓋管 |
使用手冊 | 1份 | 無 |
本產(chǎn)品采用五孔盒包裝 |
注 意：引物-探針干粉在使用前需要短暫離心，然后在離心管中加入165 μL的超純水充分混勻后得到引物-探針混合液再使用，未用完的需要-20℃保存。 |
稀釋標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品
（以1E1-1E6拷貝/μL這6個10倍稀釋度為例）。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分。
1. 標(biāo)記6個離心管，分別為6、5、4、3、2、1。
2. 用帶芯槍頭分別加入45 μL熒光PCR專用模板稀釋液，用帶芯槍頭，下同）。
3. 在6號管中加入5 μL 1E7拷貝/μL 的陽性對照(試劑盒提供)，充分震蕩1分鐘，得1E6拷貝/μL的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
4. 換槍頭，在5號管中加入5 μL 1E6拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩1分鐘，得1E5拷貝/μL的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
5. 換槍頭，在4號管中加入5 μL 1E5拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩1分鐘，得1E4拷貝/μL的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
6. 重復(fù)上面的操作直到得到6個稀釋度的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
樣品DNA的制備
7. 如果有N個樣品，設(shè)置N+2個提取，多出的一個是PC（樣品制備陽性對照），一個是NC（樣品制備陰性對照）?？梢杂?0 μL上步所得第4號稀釋液再加上一定量的水使總體積跟每次樣本制備所要求的起始樣本體積一樣，以此作為PC。另外用水作為NC。
8. 用自選方法純化樣品的DNA，本試劑盒跟市場上大多數(shù)DNA提取試劑盒兼容，也可以選購本公司的免提取核酸釋放劑。
數(shù)據(jù)處理
1. 如果樣本制備陽性對照或PCR陽性對照(包括標(biāo)曲樣本)結(jié)果為陰性，則整個實驗無效，不需要分析數(shù)據(jù)，需要重新樣本制備，重新進行PCR擴增或跟廠家聯(lián)系。如果樣本制備陰性對照或PCR陰性對照結(jié)果為陽性，說明環(huán)境污染，則整個實驗無效，不需要分析數(shù)據(jù)，需要跟廠家聯(lián)系。
2. 如果陰性對照和陽性對照均正常，則實驗有效，可以進入后續(xù)分析。
3. 如果把本試劑盒用于定量檢測，則以陽性對照濃度的log值為橫軸，以Ct值為縱軸，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。再以待測樣品的Ct值從標(biāo)準(zhǔn)曲線上推算出樣品DNA濃度的log值，再推算出其濃度。
4. 如果把本試劑盒用于定性檢測，只判斷陽性或陰性，則陰性對照Ct必須沒有讀數(shù)，或者大于或等于40。陽性對照必須有熒光對數(shù)增長，有典型擴增曲線，Ct值應(yīng)該小于40。對待測樣品，如果其Ct沒有讀數(shù)、大于或等于40則均為陰性，如果小于40則為陽性。
自備試劑
樣品DNA，超純水，核酸純化試劑盒。
運輸及保存
低溫運輸，-20℃保存，有效期1年。
關(guān)鍵字： qRT-PCR試劑盒 ; 探針法試劑盒 ; 產(chǎn)朊假絲酵母探針法 ;
上海酶聯(lián)生物科技有限公司，成立之初，獲得國內(nèi)外酶聯(lián)免疫同行的大力支持，公司為了感恩于同行無私的幫助，特取意酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒（ELISA試劑盒）的“酶聯(lián)”兩字，時刻銘記回報社會，公司已制定十年內(nèi)，將公司打造成國內(nèi)酶聯(lián)免疫試劑盒（ELISA試劑盒）行業(yè)超級航母，并且，這么多年，我們一直是為了這個愿景，堅定不移的努力奮斗著。