氨基末端激酶1/2/3抗體
原理特點
該抗體廣譜靶向JNK1、JNK2、JNK3三種氨基末端激酶亞型，該家族激酶是MAPK信號通路核心分子，介導細胞應激、凋亡、炎癥及增殖調(diào)控。抗體可識別三種亞型共有的保守抗原表位，廣譜結(jié)合所有JNK亞型蛋白。特點是廣譜識別、適配性廣，可整體檢測JNK總蛋白表達水平，用于細胞應激損傷、炎癥反應、神經(jīng)損傷及腫瘤凋亡等整體通路機制研究。
英文名稱:JNK1+JNK2+JNK3 Rabbit pAb
中文名稱:氨基末端激酶1/2/3抗體
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Optimal working dilutions must be determined by the end user.
英文別名:JNK1+JNK2+JNK3; JNK1/2/3; JNK1+2+3; JNK1+JNK2+JNK3; MAPK10; c Jun N terminal kinase 1; c Jun N terminal kinase 2; c Jun N terminal kinase 3; JNK; JNK1; JNK2; JNK2ALPHA; JNK2BETA; JNK3; MAPK8; MAPK9; Mitogen activated protein kinase 10; Mitogen activated protein kinase 8; Mitogen activated protein kinase 9; SAPK(beta); Stress activated protein kinase JNK1; Stress activated protein kinase JNK2; Stress activated protein kinase JNK3; SAPK; p54a; JNK2A; JNK2B; PRKM9; JNK-55; SAPK1a; JNK2BETA; p54aSAPK; JNK2ALPHA.
交叉反應:Human,Mouse,Rat
抗體來源:Rabbit
免疫原:KLH conjugated synthetic peptide derived from human JNK1/2/3
亞型:IgG
性狀:Liquid
純化方法:affinity purified by Protein A
克隆類型:Polyclonal
理論分子量：42-47 kDa
濃度：1mg/ml
儲存液：0.01M TBS (pH7.4) with 1% BSA, 0.02% Proclin300 and 50% Glycerol.
保存條件：Shipped at 4℃. Store at -20℃ for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles.
注意事項：This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
靶點背景
MAPK家族：氨基末端激酶（JNK）屬于MAPK家族，包括JNK1、JNK2和JNK3三個亞型，在細胞應激（如紫外線照射、氧化應激、細胞因子刺激等）下激活，通過磷酸化底物蛋白調(diào)控細胞凋亡、炎癥反應和細胞分化。
亞型差異：JNK1和JNK2廣泛表達于多種組織和細胞中，參與多種生理和病理過程；JNK3主要表達于腦組織，與神經(jīng)元凋亡和神經(jīng)系統(tǒng)疾?。ㄈ缗两鹕?、阿爾茨海默?。┫嚓P(guān)。
臨床意義：JNK信號通路異常與腫瘤、心血管疾病、神經(jīng)系統(tǒng)疾病等多種疾病相關(guān)，其抗體可用于研究疾病發(fā)病機制和開發(fā)靶向JNK的治療藥物。
樣本處理與實驗操作
1. Western Blot（免疫印跡）
樣本制備
細胞樣本：PBS洗滌2-3次，加入RIPA裂解液（含1% PMSF和磷酸酶抑制劑），冰上裂解30分鐘，12000rpm離心15分鐘取上清，BCA法定量蛋白濃度
組織樣本：液氮研磨成粉末，加入裂解液冰上裂解，離心后取上清，調(diào)整蛋白濃度至一致
變性處理：加入5×SDS上樣緩沖液，95℃加熱5-10分鐘，冷卻后上樣
抗體孵育
轉(zhuǎn)膜完成后，用5% BSA或牛奶封閉液室溫封閉1-2小時
一抗稀釋后4℃孵育過夜（12-16小時），或室溫孵育1-2小時；孵育時保證膜完全浸沒在抗體溶液中
TBST緩沖液洗滌3次，每次5分鐘；加入二抗（1:5000-1:10000稀釋）室溫孵育1-2小時
再次洗滌后，用ECL發(fā)光液顯影，通過凝膠成像系統(tǒng)采集圖像
2. IHC-P（石蠟切片免疫組化）
樣本前處理
脫蠟水化：依次放入二甲苯（2次，每次10分鐘）、無水乙醇、95%乙醇、80%乙醇、70%乙醇（各5分鐘），最后用PBS沖洗
抗原修復：將切片放入檸檬酸鹽緩沖液（pH6.0）中，微波爐加熱至沸騰，保持10-15分鐘，自然冷卻至室溫
封閉處理：3% H?O?室溫孵育10分鐘滅活內(nèi)源性過氧化物酶，PBS沖洗后用10%山羊血清封閉30分鐘
抗體孵育
一抗稀釋后滴加在切片上，4℃孵育過夜；孵育時置于濕盒中，防止液體揮發(fā)
次日室溫復溫30分鐘，PBS沖洗3次，每次5分鐘；加入二抗（生物素標記）室溫孵育30分鐘
PBS沖洗后，加入ABC復合物室溫孵育30分鐘，DAB顯色劑顯色（顯微鏡下觀察控制時間，通常3-10分鐘），蘇木素復染后脫水封片
3. ICC/IF（細胞免疫熒光）
樣本制備
細胞爬片培養(yǎng)至70-80%匯合度，PBS洗滌2次，4%多聚甲醛固定15-20分鐘
通透處理（根據(jù)抗體類型選擇）：0.1% Triton X-100室溫孵育10分鐘，PBS沖洗3次
封閉處理：5% BSA室溫封閉30-60分鐘，減少非特異性結(jié)合
抗體孵育
一抗稀釋后滴加在爬片上，4℃孵育過夜，或室溫孵育1-2小時
PBS沖洗3次，每次5分鐘；加入熒光標記二抗（1:200-1:500稀釋），室溫避光孵育30-60分鐘
再次沖洗后，用抗淬滅封片液封片，熒光顯微鏡或共聚焦顯微鏡下觀察采集圖像
4. ELISA（酶聯(lián)免疫吸附試驗）
包被與封閉
用包被緩沖液（如碳酸鹽緩沖液pH9.6）稀釋抗原至合適濃度，每孔加入100μl，4℃包被過夜
棄去包被液，PBST洗滌3次，每次3分鐘；加入封閉液（5% BSA）每孔200μl，37℃孵育1-2小時
抗體孵育
一抗按比例稀釋后，每孔加入100μl，37℃孵育1-2小時，或4℃孵育過夜
PBST洗滌3次，加入稀釋好的酶標二抗，每孔100μl，37℃孵育1小時
洗滌后加入底物溶液（如TMB）每孔100μl，37℃避光顯色10-20分鐘，加入終止液（2M H?SO?），用酶標儀在450nm波長讀取OD值
公司正在出售的產(chǎn)品
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關(guān)鍵字： 氨基末端激酶1/2/3抗體;42-47 kDa;Rabbit;
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