產(chǎn)品屬性

產(chǎn)品名稱 | 骨鈣蛋白/骨鈣素抗體 | 貨號 | YS-K6897 |
英文名稱 | Osteocalcin Rabbit pAb | 用途 | 僅供科研實(shí)驗(yàn) |
商品介紹

產(chǎn)品應(yīng)用:
Not yet tested in other applications.
Optimal working dilutions must be determined by the end user.
英文別名:OSTCN_HUMAN; BGLAP; Bone Gla protein; BGP; Gamma-carboxyglutamic acid-containing protein; bone gamma-carboxyglutamate protein; OC; OCN;
交叉反應(yīng):Human,Mouse
抗體來源:Rabbit
免疫原:KLH conjugated synthetic peptide derived from human BGP
亞型:IgG
性狀:Liquid
純化方法:affinity purified by Protein A
克隆類型:Polyclonal
克隆號:None
理論分子量:11 kDa
濃度:1mg/ml
儲(chǔ)存液:0.01M TBS (pH7.4) with 1% BSA, 0.02% Proclin300 and 50% Glycerol.
保存條件:Shipped at 4℃. Store at -20℃ for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles.
注意事項(xiàng):This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
原理特點(diǎn)

該抗體靶向骨鈣素,是成骨細(xì)胞特異性分泌蛋白,是成骨分化、骨形成的標(biāo)志性分子,精準(zhǔn)反映骨合成代謝水平,同時(shí)參與糖脂代謝調(diào)控??贵w組織特異性強(qiáng),可精準(zhǔn)識別骨組織特異性骨鈣素,靈敏度高,是檢測成骨活性、評估骨代謝狀態(tài)、研究骨科疾病的核心工具抗體。
靶點(diǎn)背景

骨代謝標(biāo)志物:骨鈣素(OCN)是成骨細(xì)胞分泌的非膠原蛋白,參與骨礦化和骨形成,可作為骨形成的特異性標(biāo)志物,反映成骨細(xì)胞活性和骨代謝狀態(tài)。
多組織調(diào)控:除參與骨代謝外,OCN還可調(diào)控胰島素分泌、脂肪代謝和能量平衡,其水平與糖尿病、肥胖等代謝性疾病相關(guān)。
臨床意義:血清OCN水平可用于評估骨質(zhì)疏松癥、骨腫瘤等疾病的骨代謝狀態(tài),監(jiān)測抗骨質(zhì)疏松治療效果;其抗體可用于檢測OCN表達(dá)和活性,研究骨代謝和代謝性疾病機(jī)制。
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核心實(shí)驗(yàn)操作方法

1. Western Blot(WB)
抗體孵育
一抗孵育:用5%脫脂牛奶或BSA稀釋抗體至推薦濃度(如1:1000),4℃搖床緩慢孵育過夜;或室溫孵育1-2小時(shí),孵育時(shí)保證膜完全浸沒在抗體溶液中。
洗滌:用TBST緩沖液洗滌3次,每次5分鐘,洗去未結(jié)合的一抗;加入HRP標(biāo)記二抗(1:5000-1:10000稀釋),室溫孵育1小時(shí)。
顯影:再次洗滌后,加入ECL發(fā)光液孵育1-2分鐘,用化學(xué)發(fā)光成像儀采集圖像,根據(jù)信號強(qiáng)度調(diào)整曝光時(shí)間。
2. 免疫組化(IHC)
抗體孵育
一抗孵育:滴加稀釋后的一抗(如1:200)于組織切片上,置于濕盒中4℃孵育過夜;次日室溫復(fù)溫30分鐘,PBS沖洗3次,每次5分鐘。
二抗結(jié)合:加入生物素標(biāo)記二抗(1:200)室溫孵育30分鐘,PBS沖洗后加入ABC復(fù)合物(1:100)室溫孵育30分鐘。
顯色封片:DAB顯色劑顯色3-10分鐘(顯微鏡下觀察控制時(shí)間),蘇木素復(fù)染1分鐘,梯度乙醇脫水后中性樹膠封片。
3. 免疫熒光(IF)
抗體孵育
一抗孵育:用5% BSA稀釋抗體至工作濃度(如1:100),滴加在細(xì)胞爬片上,4℃避光孵育過夜;室溫復(fù)溫后PBS沖洗3次,每次5分鐘。
二抗結(jié)合:加入熒光標(biāo)記二抗(如FITC標(biāo)記抗兔IgG,1:200),室溫避光孵育30-60分鐘;PBS沖洗后用抗淬滅封片液封片。
觀察:熒光顯微鏡或共聚焦顯微鏡下觀察,激發(fā)波長根據(jù)二抗標(biāo)記物選擇(如FITC為488nm)。
4. ELISA實(shí)驗(yàn)
包被與孵育
包被:用包被緩沖液(pH9.6碳酸鹽緩沖液)稀釋抗原至1-10μg/ml,每孔加入100μl,4℃過夜孵育。
封閉與一抗孵育:棄去包被液,PBST洗滌3次,加入5% BSA封閉液200μl/孔,37℃孵育1小時(shí);加入稀釋后的一抗100μl/孔,37℃孵育1-2小時(shí)或4℃過夜。
檢測:洗滌后加入酶標(biāo)二抗(1:5000),37℃孵育1小時(shí);TMB底物溶液顯色10-30分鐘,2M硫酸終止反應(yīng)后,酶標(biāo)儀450nm波長讀取OD值。
關(guān)鍵字: 骨鈣蛋白/骨鈣素抗體;Rabbit;11 kDa;
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