耳聾相關(guān)常染色體顯性遺傳5抗體
原理特點
該抗體靶向耳聾相關(guān)常染色體顯性遺傳5編碼蛋白，該蛋白參與內(nèi)耳毛細胞發(fā)育、聽覺功能維持?？贵w特異性強，可精準檢測該耳聾相關(guān)蛋白的表達與異常缺失，適用于遺傳性耳聾發(fā)病機制、內(nèi)耳發(fā)育異常、聽覺功能調(diào)控相關(guān)科研研究。
英文名稱:DFNA5 Rabbit pAb
中文名稱:耳聾相關(guān)常染色體顯性遺傳5抗體
Not yet tested in other applications.
Optimal working dilutions must be determined by the end user.
英文別名:2310037D07Rik; 4932441K13Rik; Deafness, autosomal dominant 5; Deafness, autosomal dominant 5 protein; DFNA5 gene; DFNA5_HUMAN; Dfna5h; EG14210; Fin15; ICERE 1; ICERE-1; Inversely correlated with estrogen receptor expression 1; Non-syndromic hearing impairment protein 5; Nonsyndromic hearing impairment protein; GSDME.
交叉反應:Mouse,Rat
抗體來源:Rabbit
免疫原:KLH conjugated synthetic peptide derived from human DFNA5
亞型:IgG
性狀:Liquid
純化方法:affinity purified by Protein A
克隆類型:Polyclonal
理論分子量：54 kDa
濃度：1mg/ml
儲存液：0.01M TBS (pH7.4) with 1% BSA, 0.02% Proclin300 and 50% Glycerol.
保存條件：Shipped at 4℃. Store at -20℃ for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles.
注意事項：This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
靶點背景
聽力保護：耳聾相關(guān)常染色體顯性遺傳5（DFNA5/GSDME）是Gasdermin家族成員，在細胞凋亡時被Caspase-3切割，形成N端片段，導致細胞膜穿孔和細胞焦亡，參與聽力保護。
疾病關(guān)聯(lián)：DFNA5基因突變可導致非綜合征性常染色體顯性遺傳性耳聾，其抗體可用于疾病診斷和研究聽力保護機制。
腫瘤關(guān)聯(lián)：GSDME在多種腫瘤中表達異常，參與腫瘤細胞的凋亡和焦亡，其抗體可用于檢測GSDME表達，評估腫瘤預后和治療效果。
核心實驗操作方法
1. Western Blot（WB）
抗體孵育
一抗孵育：用5%脫脂牛奶或BSA稀釋抗體至推薦濃度（如1:1000），4℃搖床緩慢孵育過夜；或室溫孵育1-2小時，孵育時保證膜完全浸沒在抗體溶液中。
洗滌：用TBST緩沖液洗滌3次，每次5分鐘，洗去未結(jié)合的一抗；加入HRP標記二抗（1:5000-1:10000稀釋），室溫孵育1小時。
顯影：再次洗滌后，加入ECL發(fā)光液孵育1-2分鐘，用化學發(fā)光成像儀采集圖像，根據(jù)信號強度調(diào)整曝光時間。
2. 免疫組化（IHC）
抗體孵育
一抗孵育：滴加稀釋后的一抗（如1:200）于組織切片上，置于濕盒中4℃孵育過夜；次日室溫復溫30分鐘，PBS沖洗3次，每次5分鐘。
二抗結(jié)合：加入生物素標記二抗（1:200）室溫孵育30分鐘，PBS沖洗后加入ABC復合物（1:100）室溫孵育30分鐘。
顯色封片：DAB顯色劑顯色3-10分鐘（顯微鏡下觀察控制時間），蘇木素復染1分鐘，梯度乙醇脫水后中性樹膠封片。
3. 免疫熒光（IF）
抗體孵育
一抗孵育：用5% BSA稀釋抗體至工作濃度（如1:100），滴加在細胞爬片上，4℃避光孵育過夜；室溫復溫后PBS沖洗3次，每次5分鐘。
二抗結(jié)合：加入熒光標記二抗（如FITC標記抗兔IgG，1:200），室溫避光孵育30-60分鐘；PBS沖洗后用抗淬滅封片液封片。
觀察：熒光顯微鏡或共聚焦顯微鏡下觀察，激發(fā)波長根據(jù)二抗標記物選擇（如FITC為488nm）。
4. ELISA實驗
包被與孵育
包被：用包被緩沖液（pH9.6碳酸鹽緩沖液）稀釋抗原至1-10μg/ml，每孔加入100μl，4℃過夜孵育。
封閉與一抗孵育：棄去包被液，PBST洗滌3次，加入5% BSA封閉液200μl/孔，37℃孵育1小時；加入稀釋后的一抗100μl/孔，37℃孵育1-2小時或4℃過夜。
檢測：洗滌后加入酶標二抗（1:5000），37℃孵育1小時；TMB底物溶液顯色10-30分鐘，2M硫酸終止反應后，酶標儀450nm波長讀取OD值。
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關(guān)鍵字： 耳聾相關(guān)常染色體顯性遺傳5抗體;Rabbit;54 kDa;
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