核轉錄調節(jié)因子YY1 （核內參）重組兔單抗
原理特點
該重組兔單抗靶向核轉錄調節(jié)因子YY1，原理是特異性結合YY1蛋白保守位點，YY1為廣泛表達的核內恒定表達蛋白，表達量穩(wěn)定、不受細胞刺激及病理狀態(tài)影響，可作為細胞核內參蛋白校準核蛋白樣本上樣量。產(chǎn)品特點為重組抗體純度高、特異性無雜帶，核內表達穩(wěn)定性極強，無組織與細胞特異性差異，可精準校正核蛋白實驗的系統(tǒng)誤差，適配Western Blot、免疫組化核內參校準，同時可同步檢測YY1轉錄因子的表達變化，兼具內參校準與靶標檢測雙重功能。
英文名稱:YY1 Recombinant Rabbit mAb, Nuclear Loading Control
中文名稱:核轉錄調節(jié)因子YY1 （核內參）重組兔單抗
Not yet tested in other applications.
Optimal working dilutions must be determined by the end user.
英文別名:Yin Yang 1; YY1 transcription factor; CF1; delta; delta transcription factor; NF E1; NFE1; Transcriptional repressor protein YY1; UCR motif DNA binding protein; UCRBP; Yin and yang 1; Yin Yang 1; Ying Yang 1; YY 1; YY 1 transcription factor; TYY1_HUMAN.
交叉反應:Human,Mouse,Rat
抗體來源:Rabbit
免疫原:Recombinant human YY1
亞型:IgG
性狀:Liquid
純化方法:affinity purified by Protein A
克隆類型:Recombinant
克隆號：5F2
理論分子量：46 kDa
濃度：1mg/ml
儲存液：0.01M TBS (pH7.4) with 1% BSA, 0.02% Proclin300 and 50% Glycerol.
保存條件：Shipped at 4℃. Store at -20℃ for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles.
注意事項：This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
靶點背景
內參特性：核轉錄調節(jié)因子YY1是廣泛表達的轉錄因子，在細胞核中表達穩(wěn)定，常用于Western Blot、免疫組化等實驗的核內參，校正蛋白上樣量差異和實驗誤差。
轉錄調控功能：YY1通過結合不同基因啟動子區(qū)域，發(fā)揮轉錄激活或抑制作用，參與細胞增殖、分化、凋亡等多種細胞過程調控，其功能異常與腫瘤、心血管疾病等相關。
實驗優(yōu)勢：重組兔單抗制備的YY1抗體特異性高、背景低，可同時作為內參和功能研究工具，適用于基因表達調控、細胞信號通路研究，確保實驗結果準確性和可靠性。
樣本處理與實驗操作
1. Western Blot（免疫印跡）
樣本制備
細胞樣本：PBS洗滌2-3次，加入RIPA裂解液（含1% PMSF和磷酸酶抑制劑），冰上裂解30分鐘，12000rpm離心15分鐘取上清，BCA法定量蛋白濃度
組織樣本：液氮研磨成粉末，加入裂解液冰上裂解，離心后取上清，調整蛋白濃度至一致
變性處理：加入5×SDS上樣緩沖液，95℃加熱5-10分鐘，冷卻后上樣
抗體孵育
轉膜完成后，用5% BSA或牛奶封閉液室溫封閉1-2小時
一抗稀釋后4℃孵育過夜（12-16小時），或室溫孵育1-2小時；孵育時保證膜完全浸沒在抗體溶液中
TBST緩沖液洗滌3次，每次5分鐘；加入二抗（1:5000-1:10000稀釋）室溫孵育1-2小時
再次洗滌后，用ECL發(fā)光液顯影，通過凝膠成像系統(tǒng)采集圖像
2. IHC-P（石蠟切片免疫組化）
樣本前處理
脫蠟水化：依次放入二甲苯（2次，每次10分鐘）、無水乙醇、95%乙醇、80%乙醇、70%乙醇（各5分鐘），最后用PBS沖洗
抗原修復：將切片放入檸檬酸鹽緩沖液（pH6.0）中，微波爐加熱至沸騰，保持10-15分鐘，自然冷卻至室溫
封閉處理：3% H?O?室溫孵育10分鐘滅活內源性過氧化物酶，PBS沖洗后用10%山羊血清封閉30分鐘
抗體孵育
一抗稀釋后滴加在切片上，4℃孵育過夜；孵育時置于濕盒中，防止液體揮發(fā)
次日室溫復溫30分鐘，PBS沖洗3次，每次5分鐘；加入二抗（生物素標記）室溫孵育30分鐘
PBS沖洗后，加入ABC復合物室溫孵育30分鐘，DAB顯色劑顯色（顯微鏡下觀察控制時間，通常3-10分鐘），蘇木素復染后脫水封片
3. ICC/IF（細胞免疫熒光）
樣本制備
細胞爬片培養(yǎng)至70-80%匯合度，PBS洗滌2次，4%多聚甲醛固定15-20分鐘
通透處理（根據(jù)抗體類型選擇）：0.1% Triton X-100室溫孵育10分鐘，PBS沖洗3次
封閉處理：5% BSA室溫封閉30-60分鐘，減少非特異性結合
抗體孵育
一抗稀釋后滴加在爬片上，4℃孵育過夜，或室溫孵育1-2小時
PBS沖洗3次，每次5分鐘；加入熒光標記二抗（1:200-1:500稀釋），室溫避光孵育30-60分鐘
再次沖洗后，用抗淬滅封片液封片，熒光顯微鏡或共聚焦顯微鏡下觀察采集圖像
4. ELISA（酶聯(lián)免疫吸附試驗）
包被與封閉
用包被緩沖液（如碳酸鹽緩沖液pH9.6）稀釋抗原至合適濃度，每孔加入100μl，4℃包被過夜
棄去包被液，PBST洗滌3次，每次3分鐘；加入封閉液（5% BSA）每孔200μl，37℃孵育1-2小時
抗體孵育
一抗按比例稀釋后，每孔加入100μl，37℃孵育1-2小時，或4℃孵育過夜
PBST洗滌3次，加入稀釋好的酶標二抗，每孔100μl，37℃孵育1小時
洗滌后加入底物溶液（如TMB）每孔100μl，37℃避光顯色10-20分鐘，加入終止液（2M H?SO?），用酶標儀在450nm波長讀取OD值
公司正在出售的產(chǎn)品
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p53和DNA損傷調節(jié)蛋白1抗體 | Cy5.5標記的小鼠抗豚鼠IgG H&L | CD274 Antibody Blocking Peptide |
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山羊抗人乙肝表面抗原抗體（包被） | APC標記的兔抗小鼠IgG H&L | TSPAN15 Antibody Blocking Peptide |
關鍵字： 核轉錄調節(jié)因子YY1 （核內參）重組兔單;Rabbit;46 kDa;
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