產(chǎn)品屬性
產(chǎn)品名稱 | 巨噬細(xì)胞甘露糖受體 (CD206) 抗體 | 貨號 | YS-K7047 |
英文名稱 | MRC1 Rabbit pAb | 用途 | 僅供科研實(shí)驗(yàn) |
商品介紹
產(chǎn)品應(yīng)用:
Not yet tested in other applications.
Optimal working dilutions must be determined by the end user.
英文別名:Mannose Receptor; C-type lectin domain family 13 member D; CD 206; CD206; CD206 antigen; CLEC13D; CLEC13DL; Macrophage mannose receptor; Mannose receptor C type 1; MMR; MRC 1; MRC-1; MRC1_HUMAN; Macrophage mannose receptor 1; MRC1L1; C-type lectin domain family 13 member D-like; Macrophage mannose receptor 1-like protein 1.
交叉反應(yīng):Human
抗體來源:Rabbit
免疫原:KLH conjugated synthetic peptide derived from human MRC1/CD206
亞型:IgG
性狀:Liquid
純化方法:affinity purified by Protein A
克隆類型:Polyclonal
克隆號：None
理論分子量：160 kDa
濃度：1mg/ml
儲存液：0.01M TBS (pH7.4) with 1% BSA, 0.02% Proclin300 and 50% Glycerol.
保存條件：Shipped at 4℃. Store at -20℃ for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles.
注意事項(xiàng)：This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
原理特點(diǎn)
CD206是巨噬細(xì)胞表面標(biāo)志性甘露糖受體，主要表達(dá)于M2型巨噬細(xì)胞，介導(dǎo)病原體甘露糖殘基識別、抗原呈遞及炎癥抑制、組織修復(fù)調(diào)控。該抗體可特異性結(jié)合巨噬細(xì)胞表面CD206抗原表位，精準(zhǔn)靶向M2型巨噬細(xì)胞，可用于巨噬細(xì)胞亞型鑒定、靶向標(biāo)記及蛋白表達(dá)定量檢測；同時(shí)可通過封閉受體結(jié)合位點(diǎn)，阻斷CD206介導(dǎo)的病原體吞噬、免疫調(diào)節(jié)信號通路，抑制巨噬細(xì)胞極化與組織修復(fù)功能，助力研究炎癥微環(huán)境、腫瘤免疫、病原體免疫逃逸機(jī)制。
靶點(diǎn)背景
靶點(diǎn)全稱：Mannose Receptor，CD206，甘露糖受體
蛋白生理功能：M2 型抗炎巨噬細(xì)胞經(jīng)典表面標(biāo)志物；介導(dǎo)甘露糖化病原體、凋亡細(xì)胞、糖蛋白內(nèi)吞攝取，調(diào)控免疫抑制、組織修復(fù)
研究應(yīng)用方向：巨噬細(xì)胞 M1/M2 極化分型、腫瘤相關(guān)巨噬細(xì)胞 TAM 檢測、寄生蟲感染、慢性炎癥、組織纖維化
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樣本處理與實(shí)驗(yàn)操作
1. Western Blot（免疫印跡）
樣本制備
細(xì)胞樣本：PBS洗滌2-3次，加入RIPA裂解液（含1% PMSF和磷酸酶抑制劑），冰上裂解30分鐘，12000rpm離心15分鐘取上清，BCA法定量蛋白濃度
組織樣本：液氮研磨成粉末，加入裂解液冰上裂解，離心后取上清，調(diào)整蛋白濃度至一致
變性處理：加入5×SDS上樣緩沖液，95℃加熱5-10分鐘，冷卻后上樣
抗體孵育
轉(zhuǎn)膜完成后，用5% BSA或牛奶封閉液室溫封閉1-2小時(shí)
一抗稀釋后4℃孵育過夜（12-16小時(shí)），或室溫孵育1-2小時(shí)；孵育時(shí)保證膜完全浸沒在抗體溶液中
TBST緩沖液洗滌3次，每次5分鐘；加入二抗（1:5000-1:10000稀釋）室溫孵育1-2小時(shí)
再次洗滌后，用ECL發(fā)光液顯影，通過凝膠成像系統(tǒng)采集圖像
2. IHC-P（石蠟切片免疫組化）
樣本前處理
脫蠟水化：依次放入二甲苯（2次，每次10分鐘）、無水乙醇、95%乙醇、80%乙醇、70%乙醇（各5分鐘），最后用PBS沖洗
抗原修復(fù)：將切片放入檸檬酸鹽緩沖液（pH6.0）中，微波爐加熱至沸騰，保持10-15分鐘，自然冷卻至室溫
封閉處理：3% H?O?室溫孵育10分鐘滅活內(nèi)源性過氧化物酶，PBS沖洗后用10%山羊血清封閉30分鐘
抗體孵育
一抗稀釋后滴加在切片上，4℃孵育過夜；孵育時(shí)置于濕盒中，防止液體揮發(fā)
次日室溫復(fù)溫30分鐘，PBS沖洗3次，每次5分鐘；加入二抗（生物素標(biāo)記）室溫孵育30分鐘
PBS沖洗后，加入ABC復(fù)合物室溫孵育30分鐘，DAB顯色劑顯色（顯微鏡下觀察控制時(shí)間，通常3-10分鐘），蘇木素復(fù)染后脫水封片
3. ICC/IF（細(xì)胞免疫熒光）
樣本制備
細(xì)胞爬片培養(yǎng)至70-80%匯合度，PBS洗滌2次，4%多聚甲醛固定15-20分鐘
通透處理（根據(jù)抗體類型選擇）：0.1% Triton X-100室溫孵育10分鐘，PBS沖洗3次
封閉處理：5% BSA室溫封閉30-60分鐘，減少非特異性結(jié)合
抗體孵育
一抗稀釋后滴加在爬片上，4℃孵育過夜，或室溫孵育1-2小時(shí)
PBS沖洗3次，每次5分鐘；加入熒光標(biāo)記二抗（1:200-1:500稀釋），室溫避光孵育30-60分鐘
再次沖洗后，用抗淬滅封片液封片，熒光顯微鏡或共聚焦顯微鏡下觀察采集圖像
4. ELISA（酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)）
包被與封閉
用包被緩沖液（如碳酸鹽緩沖液pH9.6）稀釋抗原至合適濃度，每孔加入100μl，4℃包被過夜
棄去包被液，PBST洗滌3次，每次3分鐘；加入封閉液（5% BSA）每孔200μl，37℃孵育1-2小時(shí)
抗體孵育
一抗按比例稀釋后，每孔加入100μl，37℃孵育1-2小時(shí)，或4℃孵育過夜
PBST洗滌3次，加入稀釋好的酶標(biāo)二抗，每孔100μl，37℃孵育1小時(shí)
洗滌后加入底物溶液（如TMB）每孔100μl，37℃避光顯色10-20分鐘，加入終止液（2M H?SO?），用酶標(biāo)儀在450nm波長讀取OD值
關(guān)鍵字： 巨噬細(xì)胞甘露糖受體 (CD206) 抗體;160 kDa;Rabbit;
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