產(chǎn)品屬性
產(chǎn)品名稱 | 腎臟和腦蛋白抗體 | 貨號 | YS-K7408 |
英文名稱 | KIBRA Rabbit pAb | 用途 | 僅供科研實驗 |
商品介紹
產(chǎn)品應用:
Not yet tested in other applications.
Optimal working dilutions must be determined by the end user.
英文別名:HBeAg-binding protein 3; HBEBP36; KIAA0869; KIBRA; Kidney and brain protein; Protein KIBRA; Protein WWC1; WW and C2 domain containing 1; WW C2 and coiled-coil domain containing 1; WW domain-containing protein 1; WWC1; KIBRA_HUMAN.
交叉反應:Human,Mouse,Rat
抗體來源:Rabbit
免疫原:KLH conjugated synthetic peptide derived from human KIBRA
亞型:IgG
性狀:Liquid
純化方法:affinity purified by Protein A
克隆類型:Polyclonal
理論分子量：125 kDa
濃度：1mg/ml
儲存液：0.01M TBS (pH7.4) with 1% BSA, 0.02% Proclin300 and 50% Glycerol.
保存條件：Shipped at 4℃. Store at -20℃ for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles.
注意事項：This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
原理特點
靶向在腎臟和腦組織中存在交叉表達的蛋白。這類蛋白通常涉及水電解質(zhì)轉(zhuǎn)運、代謝酶或神經(jīng)肽信號，其雙重分布解釋了尿毒癥腦病、高血壓腦腎軸等臨床現(xiàn)象。該抗體為研究器官間對話提供了工具。靶點背景
蛋白定位：高表達于腎臟腎小管、大腦海馬區(qū)神經(jīng)元，廣泛分布于上皮、神經(jīng)組織細胞質(zhì)與細胞膜。生理病理功能：Hippo 通路關(guān)鍵調(diào)控蛋白，抑制 YAP/TAZ 轉(zhuǎn)錄活性，抑制腎臟間質(zhì)纖維化、腎囊腫增殖；大腦中調(diào)控突觸可塑性、記憶形成；突變與阿爾茨海默病、遺傳性腦認知異常相關(guān)。
應用方向：腎纖維化、多囊腎發(fā)病機制、神經(jīng)退行性疾病、器官組織增殖穩(wěn)態(tài)調(diào)控研究。
公司正在出售的產(chǎn)品
丙酰輔酶A羧化酶α鏈抗體 | PE-Cy5.5標記的小鼠抗人IgM | LIPN Antibody Blocking Peptide |
NUP54抗體 | 生物素標記的驢抗人IgG H&L | NRL Antibody Blocking Peptide |
fos相關(guān)抗原2抗體 | 膠體金標記的小鼠抗人IgM | CD14 Antibody Blocking Peptide |
磷脂酶DDHD2抗體 | 辣根過氧化物酶標記的驢抗人IgG H&L | Recombinant human IL-13 protein, N-His-Avi (HEK293) |
SETD6蛋白抗體 | PE-Cy5.5標記的羊抗人IgG H&L | DNAJC4 Antibody Blocking Peptide |
LYRM4蛋白抗體 | PE標記的羊抗大鼠IgG H&L | CCL3 Antibody Blocking Peptide |
電壓門控鉀通道Kv4.1抗體 | 腎臟和腦蛋白抗體PE標記的兔抗小鼠IgM | phospho-ESR1 (p-Ser167) Antibody Blocking Peptide |
泛素載體蛋白L6抗體 | 辣根過氧化物酶標記的兔抗豬IgG H&L | FUT11 Antibody Blocking Peptide |
鞘磷脂合成酶2抗體 | Alexa Fluor 488標記的小鼠抗豚鼠IgG H&L | MCM8 Antibody Blocking Peptide |
樣本處理與實驗操作
1. Western Blot（免疫印跡）
樣本制備
細胞樣本：PBS洗滌2-3次，加入RIPA裂解液（含1% PMSF和磷酸酶抑制劑），冰上裂解30分鐘，12000rpm離心15分鐘取上清，BCA法定量蛋白濃度
組織樣本：液氮研磨成粉末，加入裂解液冰上裂解，離心后取上清，調(diào)整蛋白濃度至一致
變性處理：加入5×SDS上樣緩沖液，95℃加熱5-10分鐘，冷卻后上樣
抗體孵育
轉(zhuǎn)膜完成后，用5% BSA或牛奶封閉液室溫封閉1-2小時
一抗稀釋后4℃孵育過夜（12-16小時），或室溫孵育1-2小時；孵育時保證膜完全浸沒在抗體溶液中
TBST緩沖液洗滌3次，每次5分鐘；加入二抗（1:5000-1:10000稀釋）室溫孵育1-2小時
再次洗滌后，用ECL發(fā)光液顯影，通過凝膠成像系統(tǒng)采集圖像
2. IHC-P（石蠟切片免疫組化）
樣本前處理
脫蠟水化：依次放入二甲苯（2次，每次10分鐘）、無水乙醇、95%乙醇、80%乙醇、70%乙醇（各5分鐘），最后用PBS沖洗
抗原修復：將切片放入檸檬酸鹽緩沖液（pH6.0）中，微波爐加熱至沸騰，保持10-15分鐘，自然冷卻至室溫
封閉處理：3% H?O?室溫孵育10分鐘滅活內(nèi)源性過氧化物酶，PBS沖洗后用10%山羊血清封閉30分鐘
抗體孵育
一抗稀釋后滴加在切片上，4℃孵育過夜；孵育時置于濕盒中，防止液體揮發(fā)
次日室溫復溫30分鐘，PBS沖洗3次，每次5分鐘；加入二抗（生物素標記）室溫孵育30分鐘
PBS沖洗后，加入ABC復合物室溫孵育30分鐘，DAB顯色劑顯色（顯微鏡下觀察控制時間，通常3-10分鐘），蘇木素復染后脫水封片
3. ICC/IF（細胞免疫熒光）
樣本制備
細胞爬片培養(yǎng)至70-80%匯合度，PBS洗滌2次，4%多聚甲醛固定15-20分鐘
通透處理（根據(jù)抗體類型選擇）：0.1% Triton X-100室溫孵育10分鐘，PBS沖洗3次
封閉處理：5% BSA室溫封閉30-60分鐘，減少非特異性結(jié)合
抗體孵育
一抗稀釋后滴加在爬片上，4℃孵育過夜，或室溫孵育1-2小時
PBS沖洗3次，每次5分鐘；加入熒光標記二抗（1:200-1:500稀釋），室溫避光孵育30-60分鐘
再次沖洗后，用抗淬滅封片液封片，熒光顯微鏡或共聚焦顯微鏡下觀察采集圖像
4. ELISA（酶聯(lián)免疫吸附試驗）
包被與封閉
用包被緩沖液（如碳酸鹽緩沖液pH9.6）稀釋抗原至合適濃度，每孔加入100μl，4℃包被過夜
棄去包被液，PBST洗滌3次，每次3分鐘；加入封閉液（5% BSA）每孔200μl，37℃孵育1-2小時
抗體孵育
一抗按比例稀釋后，每孔加入100μl，37℃孵育1-2小時，或4℃孵育過夜
PBST洗滌3次，加入稀釋好的酶標二抗，每孔100μl，37℃孵育1小時
洗滌后加入底物溶液（如TMB）每孔100μl，37℃避光顯色10-20分鐘，加入終止液（2M H?SO?），用酶標儀在450nm波長讀取OD值
關(guān)鍵字： 腎臟和腦蛋白抗體;Rabbit;125 kDa;
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