乳腺癌易感基因2抗體
原理特點
乳腺癌易感基因2（BRCA2）編碼的蛋白是核心抑癌蛋白，主要參與DNA損傷修復(fù)、基因組穩(wěn)定性維持，抑制乳腺細胞惡性突變與腫瘤發(fā)生。該抗體可特異性結(jié)合BRCA2蛋白抗原，精準檢測蛋白表達水平與胞內(nèi)定位，評估細胞DNA損傷修復(fù)能力與抑癌功能狀態(tài)；同時可干擾BRCA2蛋白功能，抑制DNA損傷修復(fù)，加劇基因組不穩(wěn)定，用于研究乳腺癌遺傳易感、腫瘤突變及靶向治療機制。
英文名稱:BRCA2 Rabbit pAb
中文名稱:乳腺癌易感基因2抗體
Not yet tested in other applications.
Optimal working dilutions must be determined by the end user.
英文別名:BRCA2_HUMAN; Breast cancer type 2 susceptibility protein; FACD; FANCD1; Fanconi anemia group D1 protein; BRCA 2; BRCA2 DNA repair associated; FAD; FAD1; GLM3; BRCC2; FANCD; PNCA2; XRCC11; BROVCA2;
交叉反應(yīng):Mouse,Rat
抗體來源:Rabbit
免疫原:KLH conjugated synthetic peptide derived from human BRCA2
亞型:IgG
性狀:Liquid
純化方法:affinity purified by Protein A
克隆類型:Polyclonal
克隆號：None
理論分子量：384 kDa
濃度：1mg/ml
儲存液：0.01M TBS (pH7.4) with 1% BSA, 0.02% Proclin300 and 50% Glycerol.
保存條件：Shipped at 4℃. Store at -20℃ for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles.
注意事項：This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
靶點背景
靶點背景：抑癌蛋白，同源重組 DNA 修復(fù)核心，突變大幅升高乳腺、卵巢癌遺傳發(fā)病風險，基因組穩(wěn)定性守護者。
作用原理：BRCA2 大片段重組蛋白免疫，識別核定位全長修復(fù)蛋白。
產(chǎn)品特點：細胞核清晰染色；遺傳性乳腺癌篩查、PARP 抑制劑敏感性預(yù)測實驗關(guān)鍵試劑。
樣本處理與實驗操作
1. Western Blot（免疫印跡）
樣本制備
細胞樣本：PBS洗滌2-3次，加入RIPA裂解液（含1% PMSF和磷酸酶抑制劑），冰上裂解30分鐘，12000rpm離心15分鐘取上清，BCA法定量蛋白濃度
組織樣本：液氮研磨成粉末，加入裂解液冰上裂解，離心后取上清，調(diào)整蛋白濃度至一致
變性處理：加入5×SDS上樣緩沖液，95℃加熱5-10分鐘，冷卻后上樣
抗體孵育
轉(zhuǎn)膜完成后，用5% BSA或牛奶封閉液室溫封閉1-2小時
一抗稀釋后4℃孵育過夜（12-16小時），或室溫孵育1-2小時；孵育時保證膜完全浸沒在抗體溶液中
TBST緩沖液洗滌3次，每次5分鐘；加入二抗（1:5000-1:10000稀釋）室溫孵育1-2小時
再次洗滌后，用ECL發(fā)光液顯影，通過凝膠成像系統(tǒng)采集圖像
2. IHC-P（石蠟切片免疫組化）
樣本前處理
脫蠟水化：依次放入二甲苯（2次，每次10分鐘）、無水乙醇、95%乙醇、80%乙醇、70%乙醇（各5分鐘），最后用PBS沖洗
抗原修復(fù)：將切片放入檸檬酸鹽緩沖液（pH6.0）中，微波爐加熱至沸騰，保持10-15分鐘，自然冷卻至室溫
封閉處理：3% H?O?室溫孵育10分鐘滅活內(nèi)源性過氧化物酶，PBS沖洗后用10%山羊血清封閉30分鐘
抗體孵育
一抗稀釋后滴加在切片上，4℃孵育過夜；孵育時置于濕盒中，防止液體揮發(fā)
次日室溫復(fù)溫30分鐘，PBS沖洗3次，每次5分鐘；加入二抗（生物素標記）室溫孵育30分鐘
PBS沖洗后，加入ABC復(fù)合物室溫孵育30分鐘，DAB顯色劑顯色（顯微鏡下觀察控制時間，通常3-10分鐘），蘇木素復(fù)染后脫水封片
3. ICC/IF（細胞免疫熒光）
樣本制備
細胞爬片培養(yǎng)至70-80%匯合度，PBS洗滌2次，4%多聚甲醛固定15-20分鐘
通透處理（根據(jù)抗體類型選擇）：0.1% Triton X-100室溫孵育10分鐘，PBS沖洗3次
封閉處理：5% BSA室溫封閉30-60分鐘，減少非特異性結(jié)合
抗體孵育
一抗稀釋后滴加在爬片上，4℃孵育過夜，或室溫孵育1-2小時
PBS沖洗3次，每次5分鐘；加入熒光標記二抗（1:200-1:500稀釋），室溫避光孵育30-60分鐘
再次沖洗后，用抗淬滅封片液封片，熒光顯微鏡或共聚焦顯微鏡下觀察采集圖像
4. ELISA（酶聯(lián)免疫吸附試驗）
包被與封閉
用包被緩沖液（如碳酸鹽緩沖液pH9.6）稀釋抗原至合適濃度，每孔加入100μl，4℃包被過夜
棄去包被液，PBST洗滌3次，每次3分鐘；加入封閉液（5% BSA）每孔200μl，37℃孵育1-2小時
抗體孵育
一抗按比例稀釋后，每孔加入100μl，37℃孵育1-2小時，或4℃孵育過夜
PBST洗滌3次，加入稀釋好的酶標二抗，每孔100μl，37℃孵育1小時
洗滌后加入底物溶液（如TMB）每孔100μl，37℃避光顯色10-20分鐘，加入終止液（2M H?SO?），用酶標儀在450nm波長讀取OD值
公司正在出售的產(chǎn)品
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苯乙醇胺甲基轉(zhuǎn)移酶抗體 | Cy7標記的兔抗長爪沙鼠IgG H&L | 2-Naphthalenecarboxylic acid Antibody Blocking Peptide |
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磷脂酶B1膜相關(guān)蛋白抗體 | Alexa Fluor 647標記的小鼠抗人IgG H&L | GOT2 Antibody Blocking Peptide |
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關(guān)鍵字： 乳腺癌易感基因2抗體;Rabbit;384 kDa;
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