產(chǎn)品屬性
產(chǎn)品名稱 | 絲裂原活化蛋白激酶1/ERK 1/2重組兔單抗 | 貨號 | YS-K7958 |
英文名稱 | ERK1/2 Recombinant Rabbit mAb | 用途 | 僅供科研實驗 |
商品介紹
產(chǎn)品應(yīng)用:
Not yet tested in other applications.
Optimal working dilutions must be determined by the end user.
英文別名:ERK1+ERK2; ERK 1; ERK 2; ERK-2; ERK1; ERK2; ERT1; ERT2; Extracellular signal regulated kinase 1; Extracellular signal regulated kinase 2; Extracellular signal-regulated kinase 2; HS44KDAP; HUMKER1A; Insulin stimulated MAP2 kinase; MAP kinase 1; MAP kinase 2; MAP kinase isoform p42; MAP kinase isoform p44; MAPK 1; MAPK 2; MAPK 3; MAPK1; MAPK2; MAPK3; MGC20180; Microtubule associated protein 2 kinase; Mitogen activated protein kinase 1; Mitogen activated protein kinase 2; Mitogen activated protein kinase 3; Mitogen-activated protein kinase 1; Mitogen-activated protein kinase 2; MK01_HUMAN; MK03_HUMAN; p38; p40; p41; p41mapk; p42 MAPK; p42-MAPK; p42MAPK; p44 ERK1; p44 MAPK; p44ERK1; p44MAPK; PRKM 1; PRKM 2; PRKM 3; PRKM1; PRKM2; PRKM3; Protein kinase mitogen activated 1; Protein kinase mitogen activated 2; Protein kinase mitogen activated 3; Protein tyrosine kinase ERK 2.
交叉反應(yīng):Human,Mouse,Rat
抗體來源:Rabbit
免疫原:KLH conjugated synthetic peptide derived from human ERK1/2
亞型:IgG
性狀:Liquid
純化方法:affinity purified by Protein A
克隆類型:Recombinant
克隆號：3A12
理論分子量：42/44 kDa
濃度：1mg/ml
儲存液：0.01M TBS (pH7.4) with 1% BSA, 0.02% Proclin300 and 50% Glycerol.
保存條件：Shipped at 4℃. Store at -20℃ for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles.
注意事項：This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
原理特點
采用重組技術(shù)生產(chǎn)的兔源單克隆抗體，批次間一致性極高。它精準識別ERK1/2，無輕鏈干擾，特別適合多重免疫熒光和定量分析。重組兔單抗的親和力成熟和特異性優(yōu)于傳統(tǒng)雜交瘤單抗，是信號通路定量研究的可靠選擇。
靶點背景
重組兔單克隆抗體由基因工程構(gòu)建穩(wěn)定表達株，相比傳統(tǒng)雜交瘤單抗，特異性更高、批間差異極小、穩(wěn)定性強。
靶點依舊為 p44/p42 ERK1/2 總蛋白，適配 WB、IHC、IF、ELISA 多平臺實驗。
適合高通量篩選、臨床樣本批量檢測、長期重復對照實驗，無鼠源抗體交叉干擾問題。
公司正在出售的產(chǎn)品
磷酸化細胞周期檢測點激酶2抗體 | PE-Cy7標記的羊抗小鼠IgM | SPRY1 Antibody Blocking Peptide |
白介素1受體2抗體 | PE-Cy5.5標記的兔抗豬IgG H&L | DIRAS3 Antibody Blocking Peptide |
精子生成相關(guān)蛋白3抗體 | Alexa Fluor 555標記的兔抗人IgM | SPG11 Antibody Blocking Peptide |
4號染色體開放閱讀框22抗體 | 羅丹明標記的兔抗人IgG H&L F(ab')2 | Netrin 5 Antibody Blocking Peptide |
1號染色體開放閱讀框159抗體 | PE-Cy5.5標記的小鼠抗牛IgG H&L | HAS1 Antibody Blocking Peptide |
蛋白激酶C結(jié)合蛋白NELL1抗體 | Alexa Fluor 350標記的兔抗人IgG H&L F(ab')2 | DSTYK Antibody Blocking Peptide |
磷酸化巨噬細胞集落刺激因子受體抗體 | 絲裂原活化蛋白激酶1/ERK 1/2重組兔單抗Alexa Fluor 350標記的兔抗人IgG H&L | CTDSPL2 Antibody Blocking Peptide |
外周髓鞘蛋白-22抗體 | PE-Cy7標記的兔抗牛IgG H&L | Phospho-MKK7 (Ser271/Thr275) Antibody Blocking Peptide |
白細胞介素-20抗體 | 辣根過氧化物酶標記的驢抗豚鼠IgG H&L | IQCA1 Antibody Blocking Peptide |
樣本處理與實驗操作
1. Western Blot（免疫印跡）
樣本制備
細胞樣本：PBS洗滌2-3次，加入RIPA裂解液（含1% PMSF和磷酸酶抑制劑），冰上裂解30分鐘，12000rpm離心15分鐘取上清，BCA法定量蛋白濃度
組織樣本：液氮研磨成粉末，加入裂解液冰上裂解，離心后取上清，調(diào)整蛋白濃度至一致
變性處理：加入5×SDS上樣緩沖液，95℃加熱5-10分鐘，冷卻后上樣
抗體孵育
轉(zhuǎn)膜完成后，用5% BSA或牛奶封閉液室溫封閉1-2小時
一抗稀釋后4℃孵育過夜（12-16小時），或室溫孵育1-2小時；孵育時保證膜完全浸沒在抗體溶液中
TBST緩沖液洗滌3次，每次5分鐘；加入二抗（1:5000-1:10000稀釋）室溫孵育1-2小時
再次洗滌后，用ECL發(fā)光液顯影，通過凝膠成像系統(tǒng)采集圖像
2. IHC-P（石蠟切片免疫組化）
樣本前處理
脫蠟水化：依次放入二甲苯（2次，每次10分鐘）、無水乙醇、95%乙醇、80%乙醇、70%乙醇（各5分鐘），最后用PBS沖洗
抗原修復：將切片放入檸檬酸鹽緩沖液（pH6.0）中，微波爐加熱至沸騰，保持10-15分鐘，自然冷卻至室溫
封閉處理：3% H?O?室溫孵育10分鐘滅活內(nèi)源性過氧化物酶，PBS沖洗后用10%山羊血清封閉30分鐘
抗體孵育
一抗稀釋后滴加在切片上，4℃孵育過夜；孵育時置于濕盒中，防止液體揮發(fā)
次日室溫復溫30分鐘，PBS沖洗3次，每次5分鐘；加入二抗（生物素標記）室溫孵育30分鐘
PBS沖洗后，加入ABC復合物室溫孵育30分鐘，DAB顯色劑顯色（顯微鏡下觀察控制時間，通常3-10分鐘），蘇木素復染后脫水封片
3. ICC/IF（細胞免疫熒光）
樣本制備
細胞爬片培養(yǎng)至70-80%匯合度，PBS洗滌2次，4%多聚甲醛固定15-20分鐘
通透處理（根據(jù)抗體類型選擇）：0.1% Triton X-100室溫孵育10分鐘，PBS沖洗3次
封閉處理：5% BSA室溫封閉30-60分鐘，減少非特異性結(jié)合
抗體孵育
一抗稀釋后滴加在爬片上，4℃孵育過夜，或室溫孵育1-2小時
PBS沖洗3次，每次5分鐘；加入熒光標記二抗（1:200-1:500稀釋），室溫避光孵育30-60分鐘
再次沖洗后，用抗淬滅封片液封片，熒光顯微鏡或共聚焦顯微鏡下觀察采集圖像
4. ELISA（酶聯(lián)免疫吸附試驗）
包被與封閉
用包被緩沖液（如碳酸鹽緩沖液pH9.6）稀釋抗原至合適濃度，每孔加入100μl，4℃包被過夜
棄去包被液，PBST洗滌3次，每次3分鐘；加入封閉液（5% BSA）每孔200μl，37℃孵育1-2小時
抗體孵育
一抗按比例稀釋后，每孔加入100μl，37℃孵育1-2小時，或4℃孵育過夜
PBST洗滌3次，加入稀釋好的酶標二抗，每孔100μl，37℃孵育1小時
洗滌后加入底物溶液（如TMB）每孔100μl，37℃避光顯色10-20分鐘，加入終止液（2M H?SO?），用酶標儀在450nm波長讀取OD值
關(guān)鍵字： 絲裂原活化蛋白激酶1/ERK 1/2重組;Rabbit;42/44 kDa;
上海研生實業(yè)有限公司成立于2011年專業(yè)銷售各種科學實驗產(chǎn)品，包括分子生物學、細胞生物學、免疫學、等多個研究及應(yīng)用領(lǐng)域。旗下有“上研生"品牌。
我們努力將歐美進口品牌的產(chǎn)品推薦給各類研究人員；另一方面也非常重視國內(nèi)科研市場的產(chǎn)品開發(fā)，推出了一系列具有競爭力的產(chǎn)品和服務(wù)。
同時國家對于生物行業(yè)的發(fā)展給予極大的重視，更多地側(cè)重于科研的投入。公司的服務(wù)和業(yè)務(wù)在同行獲得認可。也具備豐富的管理經(jīng)驗，同時我們建立了集技術(shù)支持、售后服務(wù)等多方位的服務(wù)體系。我們有激情、有理想，更有責任感，是您科研道路上值得信賴的伙伴。
公司的理念是：以誠信為本，努力打造優(yōu)質(zhì)品牌，為您提供產(chǎn)品的售中、售后服務(wù)。