三羥基三甲基輔酶A還原酶抗體
原理特點(diǎn)
三羥基三甲基輔酶A還原酶是機(jī)體膽固醇從頭合成途徑的關(guān)鍵限速酶，決定體內(nèi)膽固醇合成速率，是脂質(zhì)代謝核心調(diào)控靶點(diǎn)。該抗體可特異性結(jié)合該還原酶抗原，檢測(cè)酶蛋白表達(dá)水平，評(píng)估機(jī)體膽固醇合成代謝強(qiáng)度；同時(shí)可封閉酶催化活性中心，抑制膽固醇合成通路，降低內(nèi)源膽固醇生成，常用于高脂血癥、脂質(zhì)代謝調(diào)控及降脂機(jī)制研究。
英文名稱:HMGCR Rabbit pAb
中文名稱:三羥基三甲基輔酶A還原酶抗體
Not yet tested in other applications.
Optimal working dilutions must be determined by the end user.
英文別名:3 hydroxy 3 methylglutaryl CoA reductase; 3 hydroxy 3 methylglutaryl Coenzyme A reductase; 3 hydroxymethylglutaryl CoA reductase; 3-hydroxy-3-methylglutaryl CoA reductase(NADPH); 3-hydroxy-3-methylglutaryl-coenzyme A reductase; 3H3M; HMDH_HUMAN; HMG CoA reductase; HMG CoAR; HMG-CoA reductase; Hydroxymethylglutaryl CoA reductase; LDLCQ3; MGC103269; Red.
交叉反應(yīng):Human
抗體來(lái)源:Rabbit
免疫原:KLH conjugated synthetic peptide derived from human HMGCR
亞型:IgG
性狀:Liquid
純化方法:affinity purified by Protein A
克隆類型:Polyclonal
克隆號(hào)：None
理論分子量：97 kDa
濃度：1mg/ml
儲(chǔ)存液：0.01M TBS (pH7.4) with 1% BSA, 0.02% Proclin300 and 50% Glycerol.
保存條件：Shipped at 4℃. Store at -20℃ for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles.
注意事項(xiàng)：This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
靶點(diǎn)背景
靶點(diǎn)背景：HMGCR 是膽固醇從頭合成途徑限速酶，定位于內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜，他汀類藥物專屬作用靶點(diǎn)，肝臟表達(dá)最高。
核心生理功能：催化 HMG-CoA 轉(zhuǎn)化為甲羥戊酸，是體內(nèi)膽固醇、異戊二烯脂質(zhì)合成第一步限速環(huán)節(jié)。
研究應(yīng)用價(jià)值：高血脂、動(dòng)脈粥樣硬化、脂肪肝、腫瘤脂質(zhì)代謝研究；可檢測(cè)藥物干預(yù)后酶表達(dá)下調(diào)幅度，評(píng)價(jià)降脂藥效。
核心實(shí)驗(yàn)操作方法
1. Western Blot（WB）
抗體孵育
一抗孵育：用5%脫脂牛奶或BSA稀釋抗體至推薦濃度（如1:1000），4℃搖床緩慢孵育過(guò)夜；或室溫孵育1-2小時(shí)，孵育時(shí)保證膜完全浸沒(méi)在抗體溶液中。
洗滌：用TBST緩沖液洗滌3次，每次5分鐘，洗去未結(jié)合的一抗；加入HRP標(biāo)記二抗（1:5000-1:10000稀釋），室溫孵育1小時(shí)。
顯影：再次洗滌后，加入ECL發(fā)光液孵育1-2分鐘，用化學(xué)發(fā)光成像儀采集圖像，根據(jù)信號(hào)強(qiáng)度調(diào)整曝光時(shí)間。
2. 免疫組化（IHC）
抗體孵育
一抗孵育：滴加稀釋后的一抗（如1:200）于組織切片上，置于濕盒中4℃孵育過(guò)夜；次日室溫復(fù)溫30分鐘，PBS沖洗3次，每次5分鐘。
二抗結(jié)合：加入生物素標(biāo)記二抗（1:200）室溫孵育30分鐘，PBS沖洗后加入ABC復(fù)合物（1:100）室溫孵育30分鐘。
顯色封片：DAB顯色劑顯色3-10分鐘（顯微鏡下觀察控制時(shí)間），蘇木素復(fù)染1分鐘，梯度乙醇脫水后中性樹(shù)膠封片。
3. 免疫熒光（IF）
抗體孵育
一抗孵育：用5% BSA稀釋抗體至工作濃度（如1:100），滴加在細(xì)胞爬片上，4℃避光孵育過(guò)夜；室溫復(fù)溫后PBS沖洗3次，每次5分鐘。
二抗結(jié)合：加入熒光標(biāo)記二抗（如FITC標(biāo)記抗兔IgG，1:200），室溫避光孵育30-60分鐘；PBS沖洗后用抗淬滅封片液封片。
觀察：熒光顯微鏡或共聚焦顯微鏡下觀察，激發(fā)波長(zhǎng)根據(jù)二抗標(biāo)記物選擇（如FITC為488nm）。
4. ELISA實(shí)驗(yàn)
包被與孵育
包被：用包被緩沖液（pH9.6碳酸鹽緩沖液）稀釋抗原至1-10μg/ml，每孔加入100μl，4℃過(guò)夜孵育。
封閉與一抗孵育：棄去包被液，PBST洗滌3次，加入5% BSA封閉液200μl/孔，37℃孵育1小時(shí)；加入稀釋后的一抗100μl/孔，37℃孵育1-2小時(shí)或4℃過(guò)夜。
檢測(cè)：洗滌后加入酶標(biāo)二抗（1:5000），37℃孵育1小時(shí)；TMB底物溶液顯色10-30分鐘，2M硫酸終止反應(yīng)后，酶標(biāo)儀450nm波長(zhǎng)讀取OD值。
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關(guān)鍵字： 三羥基三甲基輔酶A還原酶抗體;Rabbit;97 kDa;
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