產品屬性
產品名稱 | 絲裂原活化蛋白激酶磷酸酶-1抗體 | 貨號 | YS-K7458 |
英文名稱 | MKP1 Rabbit pAb | 用途 | 僅供科研實驗 |
商品介紹
產品應用:
Not yet tested in other applications.
Optimal working dilutions must be determined by the end user.
英文別名:DUSP1; Mitogen activated protein kinase phosphatase 1; CL 100; CL100; Dual Specificity Phosphatase 1; Dual specificity protein phosphatase 1; Dual specificity protein phosphatase hVH1; DUSP 1; DUSP-1; EC 3.1.3.16; EC 3.1.3.48; HVH 1; HVH1; MAP kinase phosphatase 1; MKP 1; MKP-1; Protein tyrosine phosphatase CL100; PTPN 10; PTPN10; Serine/threonine specific protein phosphatase; VH 1; VH1; 3ch134; Mkp1; Ptpn16.
交叉反應:Human
抗體來源:Rabbit
免疫原:KLH conjugated synthetic peptide derived from human DUSP1
亞型:IgG
性狀:Liquid
純化方法:affinity purified by Protein A
克隆類型:Polyclonal
克隆號：None
理論分子量：39 kDa
濃度：1mg/ml
儲存液：0.01M TBS (pH7.4) with 1% BSA, 0.02% Proclin300 and 50% Glycerol.
保存條件：Shipped at 4℃. Store at -20℃ for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles.
注意事項：This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
原理特點
MKP-1是雙特異性磷酸酶，定位于細胞核。它通過去磷酸化ERK、JNK和p38的活化環(huán)蘇氨酸/酪氨酸殘基，負反饋抑制MAPK信號。該抗體用于研究MAPK信號終止機制，在炎癥消退、代謝調控和腫瘤耐藥中意義重大。
靶點背景
MKP1 是雙特異性磷酸酶，核心功能是去磷酸化滅活 ERK、p38、JNK 三大 MAPK 激酶，負反饋抑制 MAPK 級聯(lián)通路。
受糖皮質激素、氧化應激誘導上調，可抑制過度炎癥反應；腫瘤中 MKP1 表達失衡會解除對致癌 MAPK 的抑制。
連接激素調控、炎癥穩(wěn)態(tài)、腫瘤發(fā)生，是免疫調節(jié)、腫瘤靶向聯(lián)合治療研究靶點。
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核心實驗操作方法
1. Western Blot（WB）
抗體孵育
一抗孵育：用5%脫脂牛奶或BSA稀釋抗體至推薦濃度（如1:1000），4℃搖床緩慢孵育過夜；或室溫孵育1-2小時，孵育時保證膜完全浸沒在抗體溶液中。
洗滌：用TBST緩沖液洗滌3次，每次5分鐘，洗去未結合的一抗；加入HRP標記二抗（1:5000-1:10000稀釋），室溫孵育1小時。
顯影：再次洗滌后，加入ECL發(fā)光液孵育1-2分鐘，用化學發(fā)光成像儀采集圖像，根據(jù)信號強度調整曝光時間。
2. 免疫組化（IHC）
抗體孵育
一抗孵育：滴加稀釋后的一抗（如1:200）于組織切片上，置于濕盒中4℃孵育過夜；次日室溫復溫30分鐘，PBS沖洗3次，每次5分鐘。
二抗結合：加入生物素標記二抗（1:200）室溫孵育30分鐘，PBS沖洗后加入ABC復合物（1:100）室溫孵育30分鐘。
顯色封片：DAB顯色劑顯色3-10分鐘（顯微鏡下觀察控制時間），蘇木素復染1分鐘，梯度乙醇脫水后中性樹膠封片。
3. 免疫熒光（IF）
抗體孵育
一抗孵育：用5% BSA稀釋抗體至工作濃度（如1:100），滴加在細胞爬片上，4℃避光孵育過夜；室溫復溫后PBS沖洗3次，每次5分鐘。
二抗結合：加入熒光標記二抗（如FITC標記抗兔IgG，1:200），室溫避光孵育30-60分鐘；PBS沖洗后用抗淬滅封片液封片。
觀察：熒光顯微鏡或共聚焦顯微鏡下觀察，激發(fā)波長根據(jù)二抗標記物選擇（如FITC為488nm）。
4. ELISA實驗
包被與孵育
包被：用包被緩沖液（pH9.6碳酸鹽緩沖液）稀釋抗原至1-10μg/ml，每孔加入100μl，4℃過夜孵育。
封閉與一抗孵育：棄去包被液，PBST洗滌3次，加入5% BSA封閉液200μl/孔，37℃孵育1小時；加入稀釋后的一抗100μl/孔，37℃孵育1-2小時或4℃過夜。
檢測：洗滌后加入酶標二抗（1:5000），37℃孵育1小時；TMB底物溶液顯色10-30分鐘，2M硫酸終止反應后，酶標儀450nm波長讀取OD值。
關鍵字： 絲裂原活化蛋白激酶磷酸酶-1抗體;Rabbit;39 kDa;
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