神經(jīng)上皮細胞轉(zhuǎn)化基因1抗體
原理特點
神經(jīng)上皮細胞轉(zhuǎn)化基因1編碼蛋白是調(diào)控神經(jīng)上皮細胞增殖、惡變轉(zhuǎn)化的關(guān)鍵蛋白，參與神經(jīng)組織發(fā)育、神經(jīng)腫瘤發(fā)生與細胞周期調(diào)控。該抗體可特異性結(jié)合靶基因編碼蛋白抗原，檢測蛋白表達水平，評估神經(jīng)上皮細胞增殖與惡變狀態(tài)；同時可阻斷蛋白介導(dǎo)的細胞周期調(diào)控信號，抑制神經(jīng)細胞異常增殖與腫瘤轉(zhuǎn)化，助力神經(jīng)腫瘤發(fā)病機制研究。
英文名稱:NET1 Rabbit pAb
中文名稱:神經(jīng)上皮細胞轉(zhuǎn)化基因1抗體
Not yet tested in other applications.
Optimal working dilutions must be determined by the end user.
英文別名:Neuroepithelial cell-transforming gene 1 protein; Proto-oncogene p65 Net1; Rho guanine nucleotide exchange factor 8; ARHGEF8; ARHG8_HUMAN;
交叉反應(yīng):Human,Mouse,Rat
抗體來源:Rabbit
免疫原:KLH conjugated synthetic peptide derived from human NET1
亞型:IgG
性狀:Liquid
純化方法:affinity purified by Protein A
克隆類型:Polyclonal
克隆號：None
理論分子量：65 kDa
濃度：1mg/ml
儲存液：0.01M TBS (pH7.4) with 1% BSA, 0.02% Proclin300 and 50% Glycerol.
保存條件：Shipped at 4℃. Store at -20℃ for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles.
注意事項：This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
靶點背景
靶點背景：NET1 是 RhoA 特異性鳥苷酸交換因子，定位于神經(jīng)上皮、腫瘤細胞胞質(zhì)，屬于促侵襲轉(zhuǎn)化蛋白。
核心生理功能：激活 RhoA 通路重塑細胞骨架，促進神經(jīng)上皮細胞遷移；過表達誘發(fā)上皮惡性轉(zhuǎn)化、腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移。
研究應(yīng)用價值：神經(jīng)上皮源性腫瘤、腦膠質(zhì)瘤、腫瘤轉(zhuǎn)移分子機制；檢測 NET1 表達判斷腫瘤侵襲潛能。
樣本處理與實驗操作
1. Western Blot（免疫印跡）
樣本制備
細胞樣本：PBS洗滌2-3次，加入RIPA裂解液（含1% PMSF和磷酸酶抑制劑），冰上裂解30分鐘，12000rpm離心15分鐘取上清，BCA法定量蛋白濃度
組織樣本：液氮研磨成粉末，加入裂解液冰上裂解，離心后取上清，調(diào)整蛋白濃度至一致
變性處理：加入5×SDS上樣緩沖液，95℃加熱5-10分鐘，冷卻后上樣
抗體孵育
轉(zhuǎn)膜完成后，用5% BSA或牛奶封閉液室溫封閉1-2小時
一抗稀釋后4℃孵育過夜（12-16小時），或室溫孵育1-2小時；孵育時保證膜完全浸沒在抗體溶液中
TBST緩沖液洗滌3次，每次5分鐘；加入二抗（1:5000-1:10000稀釋）室溫孵育1-2小時
再次洗滌后，用ECL發(fā)光液顯影，通過凝膠成像系統(tǒng)采集圖像
2. IHC-P（石蠟切片免疫組化）
樣本前處理
脫蠟水化：依次放入二甲苯（2次，每次10分鐘）、無水乙醇、95%乙醇、80%乙醇、70%乙醇（各5分鐘），最后用PBS沖洗
抗原修復(fù)：將切片放入檸檬酸鹽緩沖液（pH6.0）中，微波爐加熱至沸騰，保持10-15分鐘，自然冷卻至室溫
封閉處理：3% H?O?室溫孵育10分鐘滅活內(nèi)源性過氧化物酶，PBS沖洗后用10%山羊血清封閉30分鐘
抗體孵育
一抗稀釋后滴加在切片上，4℃孵育過夜；孵育時置于濕盒中，防止液體揮發(fā)
次日室溫復(fù)溫30分鐘，PBS沖洗3次，每次5分鐘；加入二抗（生物素標(biāo)記）室溫孵育30分鐘
PBS沖洗后，加入ABC復(fù)合物室溫孵育30分鐘，DAB顯色劑顯色（顯微鏡下觀察控制時間，通常3-10分鐘），蘇木素復(fù)染后脫水封片
3. ICC/IF（細胞免疫熒光）
樣本制備
細胞爬片培養(yǎng)至70-80%匯合度，PBS洗滌2次，4%多聚甲醛固定15-20分鐘
通透處理（根據(jù)抗體類型選擇）：0.1% Triton X-100室溫孵育10分鐘，PBS沖洗3次
封閉處理：5% BSA室溫封閉30-60分鐘，減少非特異性結(jié)合
抗體孵育
一抗稀釋后滴加在爬片上，4℃孵育過夜，或室溫孵育1-2小時
PBS沖洗3次，每次5分鐘；加入熒光標(biāo)記二抗（1:200-1:500稀釋），室溫避光孵育30-60分鐘
再次沖洗后，用抗淬滅封片液封片，熒光顯微鏡或共聚焦顯微鏡下觀察采集圖像
4. ELISA（酶聯(lián)免疫吸附試驗）
包被與封閉
用包被緩沖液（如碳酸鹽緩沖液pH9.6）稀釋抗原至合適濃度，每孔加入100μl，4℃包被過夜
棄去包被液，PBST洗滌3次，每次3分鐘；加入封閉液（5% BSA）每孔200μl，37℃孵育1-2小時
抗體孵育
一抗按比例稀釋后，每孔加入100μl，37℃孵育1-2小時，或4℃孵育過夜
PBST洗滌3次，加入稀釋好的酶標(biāo)二抗，每孔100μl，37℃孵育1小時
洗滌后加入底物溶液（如TMB）每孔100μl，37℃避光顯色10-20分鐘，加入終止液（2M H?SO?），用酶標(biāo)儀在450nm波長讀取OD值
公司正在出售的產(chǎn)品
磷酸化zhongliu抑制基因P53抗體 | Alexa Fluor 647標(biāo)記的羊抗大鼠IgG H&L | ATG4C Antibody Blocking Peptide |
異構(gòu)核糖核蛋白E1抗體 | PE-CY5標(biāo)記的兔抗大鼠IgG H&L | UBE2J2 Antibody Blocking Peptide |
神經(jīng)細胞鳥苷酸置換因子NGEF抗體 | Alexa Fluor 488標(biāo)記的羊抗牛IgG H&L | TP73 Antibody Blocking Peptide |
磷酸化3磷酸肌醇依賴性蛋白激酶1 | Alexa Fluor 555標(biāo)記的兔抗人IgG H&L | CAB39L Antibody Blocking Peptide |
E3泛素蛋白連接酶144B/環(huán)指蛋白144B抗體 | 辣根過氧化物酶標(biāo)記羊抗小鼠IgG H&L(進口分裝) | RBM23 Antibody Blocking Peptide |
人泌乳素單克隆抗體 | Alexa Fluor 488標(biāo)記的兔抗牛IgM | HSPC014/C13orf12 Antibody Blocking Peptide |
FMS樣酪氨酸激酶3 | 神經(jīng)上皮細胞轉(zhuǎn)化基因1抗體Cy5.5標(biāo)記的兔抗雞IgG H&L | GADD45A Antibody Blocking Peptide |
Cy5標(biāo)記小鼠抗人CD19單克隆抗體 | PE-Cy7標(biāo)記的驢抗兔IgG H&L | STAT4 Antibody Blocking Peptide |
磷酸化xue管擴張刺激磷蛋白抗體 | 生物素標(biāo)記親和純化羊抗兔IgG (H+L)抗體 | AANAT Antibody Blocking Peptide |
關(guān)鍵字： 神經(jīng)上皮細胞轉(zhuǎn)化基因1抗體;Rabbit;65 kDa;
上海研生實業(yè)有限公司成立于2011年專業(yè)銷售各種科學(xué)實驗產(chǎn)品，包括分子生物學(xué)、細胞生物學(xué)、免疫學(xué)、等多個研究及應(yīng)用領(lǐng)域。旗下有“上研生"品牌。
我們努力將歐美進口品牌的產(chǎn)品推薦給各類研究人員；另一方面也非常重視國內(nèi)科研市場的產(chǎn)品開發(fā)，推出了一系列具有競爭力的產(chǎn)品和服務(wù)。
同時國家對于生物行業(yè)的發(fā)展給予極大的重視，更多地側(cè)重于科研的投入。公司的服務(wù)和業(yè)務(wù)在同行獲得認可。也具備豐富的管理經(jīng)驗，同時我們建立了集技術(shù)支持、售后服務(wù)等多方位的服務(wù)體系。我們有激情、有理想，更有責(zé)任感，是您科研道路上值得信賴的伙伴。
公司的理念是：以誠信為本，努力打造優(yōu)質(zhì)品牌，為您提供產(chǎn)品的售中、售后服務(wù)。