產(chǎn)品屬性
產(chǎn)品名稱 | 糖皮質(zhì)激素誘導(dǎo)腫瘤壞死因子受體抗體 | 貨號(hào) | YS-K7477 |
英文名稱 | TNFRSF18 Rabbit pAb | 用途 | 僅供科研實(shí)驗(yàn) |
商品介紹
產(chǎn)品應(yīng)用:
Not yet tested in other applications.
Optimal working dilutions must be determined by the end user.
英文別名:Activation inducible TNFR family receptor; Activation-inducible TNFR family receptor; AITR; CD357; GITR; GITR D; GITR-D; GITRD; Glucocorticoid induced TNFR related protein; glucocorticoid-induced tnf receptor ligand; glucocorticoid-induced tnf receptors ligand; Glucocorticoid-induced TNFR-related protein; TNF receptor superfamily activation inducible protein; TNFRSF 18; TNR18_HUMAN; Tumor necrosis factor receptor superfamily member 18; Tumor necrosis factor receptor superfamily member 18 precursor;
交叉反應(yīng):Human
抗體來源:Rabbit
免疫原:KLH conjugated synthetic peptide derived from mouse TNFRSF18
亞型:IgG
性狀:Liquid
純化方法:affinity purified by Protein A
克隆類型:Polyclonal
理論分子量：24 kDa
濃度：1mg/ml
儲(chǔ)存液：0.01M TBS (pH7.4) with 1% BSA, 0.02% Proclin300 and 50% Glycerol.
保存條件：Shipped at 4℃. Store at -20℃ for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles.
注意事項(xiàng)：This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
原理特點(diǎn)
GITR是TNF受體超家族成員，組成性高表達(dá)在調(diào)節(jié)性T細(xì)胞（Treg）上，活化T細(xì)胞也上調(diào)表達(dá)。其配體GITRL在抗原呈遞細(xì)胞上表達(dá)，激活GITR信號(hào)可增強(qiáng)效應(yīng)T細(xì)胞功能并減弱Treg抑制活性。該抗體是腫瘤免疫治療和自身免疫研究中重要的免疫檢查點(diǎn)工具。
靶點(diǎn)背景
GITR 表達(dá)于 Treg、效應(yīng) T 細(xì)胞、巨噬細(xì)胞，糖皮質(zhì)激素可上調(diào)其表達(dá)，雙向調(diào)控免疫平衡。
激活 GITR 削弱調(diào)節(jié)性 T 細(xì)胞免疫抑制，增強(qiáng)抗腫瘤 CD8?T 殺傷能力，是熱門免疫檢查點(diǎn)靶點(diǎn)。
腫瘤免疫聯(lián)合治療、自身免疫病免疫平衡調(diào)控、移植排斥研究核心受體。
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核心實(shí)驗(yàn)操作方法
1. Western Blot（WB）
抗體孵育
一抗孵育：用5%脫脂牛奶或BSA稀釋抗體至推薦濃度（如1:1000），4℃搖床緩慢孵育過夜；或室溫孵育1-2小時(shí)，孵育時(shí)保證膜完全浸沒在抗體溶液中。
洗滌：用TBST緩沖液洗滌3次，每次5分鐘，洗去未結(jié)合的一抗；加入HRP標(biāo)記二抗（1:5000-1:10000稀釋），室溫孵育1小時(shí)。
顯影：再次洗滌后，加入ECL發(fā)光液孵育1-2分鐘，用化學(xué)發(fā)光成像儀采集圖像，根據(jù)信號(hào)強(qiáng)度調(diào)整曝光時(shí)間。
2. 免疫組化（IHC）
抗體孵育
一抗孵育：滴加稀釋后的一抗（如1:200）于組織切片上，置于濕盒中4℃孵育過夜；次日室溫復(fù)溫30分鐘，PBS沖洗3次，每次5分鐘。
二抗結(jié)合：加入生物素標(biāo)記二抗（1:200）室溫孵育30分鐘，PBS沖洗后加入ABC復(fù)合物（1:100）室溫孵育30分鐘。
顯色封片：DAB顯色劑顯色3-10分鐘（顯微鏡下觀察控制時(shí)間），蘇木素復(fù)染1分鐘，梯度乙醇脫水后中性樹膠封片。
3. 免疫熒光（IF）
抗體孵育
一抗孵育：用5% BSA稀釋抗體至工作濃度（如1:100），滴加在細(xì)胞爬片上，4℃避光孵育過夜；室溫復(fù)溫后PBS沖洗3次，每次5分鐘。
二抗結(jié)合：加入熒光標(biāo)記二抗（如FITC標(biāo)記抗兔IgG，1:200），室溫避光孵育30-60分鐘；PBS沖洗后用抗淬滅封片液封片。
觀察：熒光顯微鏡或共聚焦顯微鏡下觀察，激發(fā)波長根據(jù)二抗標(biāo)記物選擇（如FITC為488nm）。
4. ELISA實(shí)驗(yàn)
包被與孵育
包被：用包被緩沖液（pH9.6碳酸鹽緩沖液）稀釋抗原至1-10μg/ml，每孔加入100μl，4℃過夜孵育。
封閉與一抗孵育：棄去包被液，PBST洗滌3次，加入5% BSA封閉液200μl/孔，37℃孵育1小時(shí)；加入稀釋后的一抗100μl/孔，37℃孵育1-2小時(shí)或4℃過夜。
檢測：洗滌后加入酶標(biāo)二抗（1:5000），37℃孵育1小時(shí)；TMB底物溶液顯色10-30分鐘，2M硫酸終止反應(yīng)后，酶標(biāo)儀450nm波長讀取OD值。
關(guān)鍵字： 糖皮質(zhì)激素誘導(dǎo)腫瘤壞死因子受體抗體;Rabbit;24 kDa;
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