細胞表面趨化因子受體5（CD185）重組兔單抗
原理特點
重組兔單抗形式，以高特異性和批次一致性識別CXCR5。它在多色流式細胞術(shù)和IHC中精準標記濾泡輔助T細胞和B細胞亞群，是研究生發(fā)中心反應(yīng)和B細胞腫瘤微環(huán)境的可靠工具。
英文名稱:CXCR5 Recombinant Rabbit mAb
中文名稱:細胞表面趨化因子受體5（CD185）重組兔單抗
Not yet tested in other applications.
Optimal working dilutions must be determined by the end user.
英文別名:BLR 1; BLR1; Burkitt lymphoma receptor 1; Burkitt lymphoma receptor 1 GTP binding protein; C X C chemokine receptor type 5; C-X-C chemokine receptor type 5; CD 185; CD185; CD185 antigen; Chemokine C X C motif receptor 5; Chemokine CXC motif receptor 5; Chemokine receptor 5; CXC chemokine receptor type 5; CXC R5; CXC-R5; CXCR 5; CXCR-5; CXCR5_HUMAN; MDR 15; MDR-15; MDR15; MGC117347; Monocyte derived receptor 15; Monocyte-derived receptor 15.
交叉反應(yīng):Human,Mouse,Rat
抗體來源:Rabbit
免疫原:A synthesized peptide derived from human CXCR5
亞型:IgG
性狀:Liquid
純化方法:affinity purified by Protein A
克隆類型:Recombinant
克隆號：3B7
理論分子量：45 kDa
濃度：1mg/ml
儲存液：0.01M TBS (pH7.4) with 1% BSA, 0.02% Proclin300 and 50% Glycerol.
保存條件：Shipped at 4℃. Store at -20℃ for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles.
注意事項：This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
靶點背景
重組工程兔源單抗，特異性靶向 CXCR5 胞外區(qū)，無雜交瘤批次差異，親和力高于鼠源傳統(tǒng)單抗。
適配流式細胞術(shù)精準圈選 Tfh 細胞亞群，多重熒光染色無交叉非特異結(jié)合。
適合臨床人外周血、淋巴結(jié)樣本標準化定量檢測，用于自身免疫、淋巴瘤病理分型判讀。
樣本處理與實驗操作
1. Western Blot（免疫印跡）
樣本制備
細胞樣本：PBS洗滌2-3次，加入RIPA裂解液（含1% PMSF和磷酸酶抑制劑），冰上裂解30分鐘，12000rpm離心15分鐘取上清，BCA法定量蛋白濃度
組織樣本：液氮研磨成粉末，加入裂解液冰上裂解，離心后取上清，調(diào)整蛋白濃度至一致
變性處理：加入5×SDS上樣緩沖液，95℃加熱5-10分鐘，冷卻后上樣
抗體孵育
轉(zhuǎn)膜完成后，用5% BSA或牛奶封閉液室溫封閉1-2小時
一抗稀釋后4℃孵育過夜（12-16小時），或室溫孵育1-2小時；孵育時保證膜完全浸沒在抗體溶液中
TBST緩沖液洗滌3次，每次5分鐘；加入二抗（1:5000-1:10000稀釋）室溫孵育1-2小時
再次洗滌后，用ECL發(fā)光液顯影，通過凝膠成像系統(tǒng)采集圖像
2. IHC-P（石蠟切片免疫組化）
樣本前處理
脫蠟水化：依次放入二甲苯（2次，每次10分鐘）、無水乙醇、95%乙醇、80%乙醇、70%乙醇（各5分鐘），最后用PBS沖洗
抗原修復：將切片放入檸檬酸鹽緩沖液（pH6.0）中，微波爐加熱至沸騰，保持10-15分鐘，自然冷卻至室溫
封閉處理：3% H?O?室溫孵育10分鐘滅活內(nèi)源性過氧化物酶，PBS沖洗后用10%山羊血清封閉30分鐘
抗體孵育
一抗稀釋后滴加在切片上，4℃孵育過夜；孵育時置于濕盒中，防止液體揮發(fā)
次日室溫復溫30分鐘，PBS沖洗3次，每次5分鐘；加入二抗（生物素標記）室溫孵育30分鐘
PBS沖洗后，加入ABC復合物室溫孵育30分鐘，DAB顯色劑顯色（顯微鏡下觀察控制時間，通常3-10分鐘），蘇木素復染后脫水封片
3. ICC/IF（細胞免疫熒光）
樣本制備
細胞爬片培養(yǎng)至70-80%匯合度，PBS洗滌2次，4%多聚甲醛固定15-20分鐘
通透處理（根據(jù)抗體類型選擇）：0.1% Triton X-100室溫孵育10分鐘，PBS沖洗3次
封閉處理：5% BSA室溫封閉30-60分鐘，減少非特異性結(jié)合
抗體孵育
一抗稀釋后滴加在爬片上，4℃孵育過夜，或室溫孵育1-2小時
PBS沖洗3次，每次5分鐘；加入熒光標記二抗（1:200-1:500稀釋），室溫避光孵育30-60分鐘
再次沖洗后，用抗淬滅封片液封片，熒光顯微鏡或共聚焦顯微鏡下觀察采集圖像
4. ELISA（酶聯(lián)免疫吸附試驗）
包被與封閉
用包被緩沖液（如碳酸鹽緩沖液pH9.6）稀釋抗原至合適濃度，每孔加入100μl，4℃包被過夜
棄去包被液，PBST洗滌3次，每次3分鐘；加入封閉液（5% BSA）每孔200μl，37℃孵育1-2小時
抗體孵育
一抗按比例稀釋后，每孔加入100μl，37℃孵育1-2小時，或4℃孵育過夜
PBST洗滌3次，加入稀釋好的酶標二抗，每孔100μl，37℃孵育1小時
洗滌后加入底物溶液（如TMB）每孔100μl，37℃避光顯色10-20分鐘，加入終止液（2M H?SO?），用酶標儀在450nm波長讀取OD值
公司正在出售的產(chǎn)品
磷酸酶/磷酸二酯酶家族成員6抗體 | 辣根過氧化物酶標記的兔抗猴IgM | CNDP1 Antibody Blocking Peptide |
多纖毛素蛋白抗體 | PE-Cy7標記的兔抗豚鼠IgM | DUSP21 Antibody Blocking Peptide |
含氧酸輔酶A轉(zhuǎn)移酶1抗體 | Alexa Fluor 647標記的兔抗人IgG H&L F(ab')2 | STK4 Antibody Blocking Peptide |
胰島素樣生長因子ⅡmRNA結(jié)合蛋白2抗體 | 辣根過氧化物酶標記的兔抗牛IgG H&L | RNF44 Antibody Blocking Peptide |
α1微球蛋白單克隆抗體 | Alexa Fluor 555標記的兔抗人IgG H&L F(ab')2 | phospho-NFkBp65 (Ser536) Antibody Blocking Peptide |
SH3結(jié)構(gòu)域激酶結(jié)合蛋白1抗體 | PE-CY5標記的小鼠抗大鼠IgG H&L | SUOX Antibody Blocking Peptide |
蛋白激酶A錨定蛋白7抗體 | 細胞表面趨化因子受體5（CD185）重組兔單抗Alexa Fluor 488標記的小鼠抗牛IgG H&L | GRTP1 Antibody Blocking Peptide |
艾滋毒制約錨定蛋白抗體 | PE-Cy3標記的羊抗小鼠IgM | ACTN4 Antibody Blocking Peptide |
線粒體核糖體蛋白S5抗體 | 鏈霉親和素標記山羊抗小鼠IgG H&L | IQCJ Antibody Blocking Peptide |
關(guān)鍵字： 細胞表面趨化因子受體5（CD185）重組;Rabbit;45 kDa;
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