細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)分子SMAD3重組兔單抗
原理特點(diǎn)
重組兔單抗形式，以高特異性和低背景識(shí)別SMAD3。它在ChIP和定量Western blot中表現(xiàn)優(yōu)異，適用于研究SMAD3的DNA結(jié)合活性和轉(zhuǎn)錄調(diào)控功能，是TGF-β信號(hào)精準(zhǔn)研究工具。
英文名稱:Smad3 Recombinant Rabbit mAb
中文名稱:細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)分子SMAD3重組兔單抗
Not yet tested in other applications.
Optimal working dilutions must be determined by the end user.
英文別名:hMAD 3; hSMAD3; HSPC193; JV15 2; JV152; MAD(mothers against decapentaplegic Drosophila) homolog 3; MAD3; MADH 3; MADH3; Mothers against decapentaplegic homolog 3; Mothers against DPP homolog 3; SMA and MAD related protein 3; SMAD 3; SMAD; SMAD-3; SMAD3_HUMAN.
交叉反應(yīng):Human,Mouse,Rat
抗體來(lái)源:Rabbit
免疫原:A synthesized peptide derived from human SMAD3
亞型:IgG
性狀:Liquid
純化方法:affinity purified by Protein A
克隆類型:Recombinant
克隆號(hào)：3D1
理論分子量：47 kDa
濃度：1mg/ml
儲(chǔ)存液：0.01M TBS (pH7.4) with 1% BSA, 0.02% Proclin300 and 50% Glycerol.
保存條件：Shipped at 4℃. Store at -20℃ for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles.
注意事項(xiàng)：This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
靶點(diǎn)背景
重組兔單克隆批次穩(wěn)定性極強(qiáng)，抗原結(jié)合活性均一，適合高通量藥物篩選平臺(tái)批量檢測(cè) p-SMAD3。
熒光多標(biāo)兼容，可同時(shí)標(biāo)記胞核 p-SMAD3 與胞質(zhì)總 SMAD3，直觀展示通路激活核轉(zhuǎn)位效率。
極低非特異性背景，適用于微量原代細(xì)胞（原代成纖維、腎小管上皮）低豐度蛋白檢測(cè)。
樣本處理標(biāo)準(zhǔn)流程
1. 細(xì)胞樣本制備
洗滌：用預(yù)冷PBS輕貼細(xì)胞表面洗滌2-3次，避免用力沖洗導(dǎo)致細(xì)胞脫落。
固定與通透：4℃預(yù)冷的4%多聚甲醛固定15-20分鐘；如需檢測(cè)胞內(nèi)蛋白，用0.1-0.3% Triton X-100室溫通透10-15分鐘。
封閉：用5% BSA或10%胎牛血清室溫封閉30-60分鐘，減少非特異性結(jié)合。
2. 組織樣本制備
石蠟切片：依次放入二甲苯（2次，每次10分鐘）、梯度乙醇（100%→95%→80%→70%，各5分鐘）脫蠟水化；檸檬酸緩沖液（pH6.0）熱修復(fù)10-15分鐘，自然冷卻至室溫。
新鮮組織：取材后立即用4%多聚甲醛固定24-48小時(shí)，或-80℃冷凍保存；冷凍切片厚度控制在5-10μm，貼片后自然干燥30分鐘。
3. WB蛋白樣本制備
用RIPA裂解液（含1% PMSF和磷酸酶抑制劑）冰上裂解細(xì)胞30分鐘，12000rpm離心15分鐘取上清。
BCA法或Bradford法定量蛋白濃度，調(diào)整至上樣量一致；加入5×SDS上樣緩沖液，95℃加熱5-10分鐘變性，-20℃保存?zhèn)溆谩?/span>
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關(guān)鍵字： 細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)分子SMAD3重組兔單抗;Rabbit;47 kDa;
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