產(chǎn)品屬性
產(chǎn)品名稱 | 血藍蛋白抗體 | 貨號 | YS-K7674 |
英文名稱 | KLH Mouse pAb | 用途 | 僅供科研實驗 |
商品介紹
產(chǎn)品應用:
Not yet tested in other applications.
Optimal working dilutions must be determined by the end user.
英文別名:Keyhole limpet hemocyanin(KLH); KLH 1; KLH1; Keyhole limpet hemocyanin A; KLH-A; Hemocyanin 1; hemocyanin A chain.
交叉反應:
抗體來源:Mouse
免疫原:KLH protein
亞型:IgG
性狀:Liquid
純化方法:affinity purified by Protein A
克隆類型:Polyclonal
理論分子量：800-900 kDa
濃度：1mg/ml
儲存液：0.01M TBS (pH7.4) with 1% BSA, 0.02% Proclin300 and 50% Glycerol.
保存條件：Shipped at 4℃. Store at -20℃ for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles.
注意事項：This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
原理特點
靶向KLH，是來自鑰孔戚血藍蛋白的含銅呼吸蛋白。它作為大分子載體蛋白與半抗原偶聯(lián)增強免疫原性，是抗體生產(chǎn)中常用的載體和免疫原。該抗體用于免疫學研究和抗體生產(chǎn)中的載體檢測。
靶點背景
KLH 是軟體動物、節(jié)肢動物體內(nèi)含銅呼吸蛋白，無脊椎動物氧氣轉(zhuǎn)運載體，免疫原性極強。
實驗室經(jīng)典免疫載體蛋白，偶聯(lián)小分子半抗原（多肽、激素、藥物）制備多抗 / 單抗。
臨床用于膀胱癌免疫治療；KLH 本身幾乎無交叉反應，是抗體制備首選佐劑載體蛋白。
公司正在出售的產(chǎn)品
乳腺ai相關蛋白1抗體 | 兔抗豚鼠IgG | SAR1B Antibody Blocking Peptide |
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核心實驗操作方法
1. Western Blot（WB）
抗體孵育
一抗孵育：用5%脫脂牛奶或BSA稀釋抗體至推薦濃度（如1:1000），4℃搖床緩慢孵育過夜；或室溫孵育1-2小時，孵育時保證膜完全浸沒在抗體溶液中。
洗滌：用TBST緩沖液洗滌3次，每次5分鐘，洗去未結(jié)合的一抗；加入HRP標記二抗（1:5000-1:10000稀釋），室溫孵育1小時。
顯影：再次洗滌后，加入ECL發(fā)光液孵育1-2分鐘，用化學發(fā)光成像儀采集圖像，根據(jù)信號強度調(diào)整曝光時間。
2. 免疫組化（IHC）
抗體孵育
一抗孵育：滴加稀釋后的一抗（如1:200）于組織切片上，置于濕盒中4℃孵育過夜；次日室溫復溫30分鐘，PBS沖洗3次，每次5分鐘。
二抗結(jié)合：加入生物素標記二抗（1:200）室溫孵育30分鐘，PBS沖洗后加入ABC復合物（1:100）室溫孵育30分鐘。
顯色封片：DAB顯色劑顯色3-10分鐘（顯微鏡下觀察控制時間），蘇木素復染1分鐘，梯度乙醇脫水后中性樹膠封片。
3. 免疫熒光（IF）
抗體孵育
一抗孵育：用5% BSA稀釋抗體至工作濃度（如1:100），滴加在細胞爬片上，4℃避光孵育過夜；室溫復溫后PBS沖洗3次，每次5分鐘。
二抗結(jié)合：加入熒光標記二抗（如FITC標記抗兔IgG，1:200），室溫避光孵育30-60分鐘；PBS沖洗后用抗淬滅封片液封片。
觀察：熒光顯微鏡或共聚焦顯微鏡下觀察，激發(fā)波長根據(jù)二抗標記物選擇（如FITC為488nm）。
4. ELISA實驗
包被與孵育
包被：用包被緩沖液（pH9.6碳酸鹽緩沖液）稀釋抗原至1-10μg/ml，每孔加入100μl，4℃過夜孵育。
封閉與一抗孵育：棄去包被液，PBST洗滌3次，加入5% BSA封閉液200μl/孔，37℃孵育1小時；加入稀釋后的一抗100μl/孔，37℃孵育1-2小時或4℃過夜。
檢測：洗滌后加入酶標二抗（1:5000），37℃孵育1小時；TMB底物溶液顯色10-30分鐘，2M硫酸終止反應后，酶標儀450nm波長讀取OD值。
關鍵字： 血藍蛋白抗體;800-900 kDa;Mouse;
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