胰島素樣生長因子ⅡmRNA結(jié)合蛋白1抗體
原理特點(diǎn)
靶向IGF2BP1，是RNA結(jié)合蛋白家族成員。它結(jié)合IGF-2等mRNA的3'UTR，穩(wěn)定轉(zhuǎn)錄本并促進(jìn)翻譯，在胚胎發(fā)育和腫瘤中高表達(dá)，促進(jìn)細(xì)胞遷移和侵襲。該抗體用于研究RNA調(diào)控和腫瘤進(jìn)展。
英文名稱:IGF2BP1 Rabbit pAb
中文名稱:胰島素樣生長因子ⅡmRNA結(jié)合蛋白1抗體
Not yet tested in other applications.
Optimal working dilutions must be determined by the end user.
英文別名:CRD BP; Coding region determinant-binding protein; CRD-BP; CRDBP; IF2B1; IF2B1_HUMAN; IGF II mRNA binding protein 1; IGF-II mRNA-binding protein 1; IGF2 mRNA binding protein 1; IGF2 mRNA-binding protein 1; IGF2BP1; IMP 1; IMP-1; IMP1; Insulin like growth factor 2 mRNA binding protein 1; Insulin-like growth factor 2 mRNA-binding protein 1; VICKZ family member 1; VICKZ1; ZBP 1; ZBP-1; ZBP1; Zip code binding protein 1; Zip code-binding protein 1; Zipcode binding protein 1; Zipcode-binding protein 1.
交叉反應(yīng):Human,Mouse,Rat
抗體來源:Rabbit
免疫原:KLH conjugated synthetic peptide derived from human IGF2BP1/IMP1
亞型:IgG
性狀:Liquid
純化方法:affinity purified by Protein A
克隆類型:Polyclonal
理論分子量：63 kDa
濃度：1mg/ml
儲(chǔ)存液：0.01M TBS (pH7.4) with 1% BSA, 0.02% Proclin300 and 50% Glycerol.
保存條件：Shipped at 4℃. Store at -20℃ for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles.
注意事項(xiàng)：This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
靶點(diǎn)背景
RNA 結(jié)合蛋白，穩(wěn)定 IGF2 mRNA、調(diào)控翻譯效率，沉默抑癌轉(zhuǎn)錄本；
促進(jìn)胚胎發(fā)育、細(xì)胞侵襲、干細(xì)胞干性維持；
高表達(dá)于肝癌、卵巢癌、結(jié)直腸癌，作為腫瘤預(yù)后不良標(biāo)志物。
樣本處理與實(shí)驗(yàn)操作
1. Western Blot（免疫印跡）
樣本制備
細(xì)胞樣本：PBS洗滌2-3次，加入RIPA裂解液（含1% PMSF和磷酸酶抑制劑），冰上裂解30分鐘，12000rpm離心15分鐘取上清，BCA法定量蛋白濃度
組織樣本：液氮研磨成粉末，加入裂解液冰上裂解，離心后取上清，調(diào)整蛋白濃度至一致
變性處理：加入5×SDS上樣緩沖液，95℃加熱5-10分鐘，冷卻后上樣
抗體孵育
轉(zhuǎn)膜完成后，用5% BSA或牛奶封閉液室溫封閉1-2小時(shí)
一抗稀釋后4℃孵育過夜（12-16小時(shí)），或室溫孵育1-2小時(shí)；孵育時(shí)保證膜完全浸沒在抗體溶液中
TBST緩沖液洗滌3次，每次5分鐘；加入二抗（1:5000-1:10000稀釋）室溫孵育1-2小時(shí)
再次洗滌后，用ECL發(fā)光液顯影，通過凝膠成像系統(tǒng)采集圖像
2. IHC-P（石蠟切片免疫組化）
樣本前處理
脫蠟水化：依次放入二甲苯（2次，每次10分鐘）、無水乙醇、95%乙醇、80%乙醇、70%乙醇（各5分鐘），最后用PBS沖洗
抗原修復(fù)：將切片放入檸檬酸鹽緩沖液（pH6.0）中，微波爐加熱至沸騰，保持10-15分鐘，自然冷卻至室溫
封閉處理：3% H?O?室溫孵育10分鐘滅活內(nèi)源性過氧化物酶，PBS沖洗后用10%山羊血清封閉30分鐘
抗體孵育
一抗稀釋后滴加在切片上，4℃孵育過夜；孵育時(shí)置于濕盒中，防止液體揮發(fā)
次日室溫復(fù)溫30分鐘，PBS沖洗3次，每次5分鐘；加入二抗（生物素標(biāo)記）室溫孵育30分鐘
PBS沖洗后，加入ABC復(fù)合物室溫孵育30分鐘，DAB顯色劑顯色（顯微鏡下觀察控制時(shí)間，通常3-10分鐘），蘇木素復(fù)染后脫水封片
3. ICC/IF（細(xì)胞免疫熒光）
樣本制備
細(xì)胞爬片培養(yǎng)至70-80%匯合度，PBS洗滌2次，4%多聚甲醛固定15-20分鐘
通透處理（根據(jù)抗體類型選擇）：0.1% Triton X-100室溫孵育10分鐘，PBS沖洗3次
封閉處理：5% BSA室溫封閉30-60分鐘，減少非特異性結(jié)合
抗體孵育
一抗稀釋后滴加在爬片上，4℃孵育過夜，或室溫孵育1-2小時(shí)
PBS沖洗3次，每次5分鐘；加入熒光標(biāo)記二抗（1:200-1:500稀釋），室溫避光孵育30-60分鐘
再次沖洗后，用抗淬滅封片液封片，熒光顯微鏡或共聚焦顯微鏡下觀察采集圖像
4. ELISA（酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)）
包被與封閉
用包被緩沖液（如碳酸鹽緩沖液pH9.6）稀釋抗原至合適濃度，每孔加入100μl，4℃包被過夜
棄去包被液，PBST洗滌3次，每次3分鐘；加入封閉液（5% BSA）每孔200μl，37℃孵育1-2小時(shí)
抗體孵育
一抗按比例稀釋后，每孔加入100μl，37℃孵育1-2小時(shí)，或4℃孵育過夜
PBST洗滌3次，加入稀釋好的酶標(biāo)二抗，每孔100μl，37℃孵育1小時(shí)
洗滌后加入底物溶液（如TMB）每孔100μl，37℃避光顯色10-20分鐘，加入終止液（2M H?SO?），用酶標(biāo)儀在450nm波長讀取OD值
公司正在出售的產(chǎn)品
組蛋白去乙?；笍?fù)合亞基SAP18抗體 | 兔抗羊IgM | ANT1/2/3/4 Antibody Blocking Peptide |
NDUFB4蛋白抗體 | 羊抗大鼠IgG | ELOB Antibody Blocking Peptide |
橋粒斑菲素蛋白4抗體 | 兔抗小鼠IgG-Fc | MMP9 Antibody Blocking Peptide |
神經(jīng)細(xì)胞分化因子1抗體 | 兔抗牛血清白蛋白抗血清 | PSMA2 Antibody Blocking Peptide |
肌動(dòng)蛋白結(jié)合蛋白2B抗體 | 兔抗人IgA抗血清 | CD24 Antibody Blocking Peptide |
原ai基因wnt7a蛋白抗體 | 羊抗小鼠IgM | claudin-5 Antibody Blocking Peptide |
鈣激活鉀通道蛋白α1抗體 | 胰島素樣生長因子ⅡmRNA結(jié)合蛋白1抗體兔抗馬IgG抗血清 | KDM2A Antibody Blocking Peptide |
FCP1蛋白抗體 | 小鼠抗山羊IgG單克隆抗體 | Phospho-SMAD2 (Ser465/467) Antibody Blocking Peptide |
Bax重組兔單抗 | 羊抗小鼠IgG抗血清 | FCAMR Antibody Blocking Peptide |
關(guān)鍵字： 胰島素樣生長因子ⅡmRNA結(jié)合蛋白1抗體;Rabbit;63 kDa;
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