有絲分裂激酶A抗體
原理特點(diǎn)
靶向Aurora A，是絲/蘇氨酸激酶，定位于中心體和紡錘體極。它調(diào)控中心體成熟、紡錘體組裝和有絲分裂進(jìn)入，在多種腫瘤中擴(kuò)增和過表達(dá)。該抗體用于研究細(xì)胞周期和腫瘤靶向治療。
英文名稱:Aurora A Rabbit pAb
中文名稱:有絲分裂激酶A抗體
Not yet tested in other applications.
Optimal working dilutions must be determined by the end user.
英文別名:AIK; ARK-1; ARK1; AURA; AURKA; Aurora 2; Aurora Family Kinase 1; aurora kinase A; Aurora Related Kinase 1; Aurora-related kinase 1; Aurora/IPL1 Like Kinase; Aurora/IPL1 Related Kinase 1; Aurora/IPL1-related kinase 1; AURORA2; AYK1; BRAK; Breast Tumor Amplified Kinase; Breast tumor-amplified kinase; BTAK; hARK1; IAK; IPL1 Aurora Related Kinase 1; IPL1 Related Kinase; MGC34538; OTTHUMP00000031340; OTTHUMP00000031341; OTTHUMP00000031342; OTTHUMP00000031343; OTTHUMP00000031344; OTTHUMP00000031345; OTTHUMP00000166071; OTTHUMP00000166072; PPP1R47; Protein phosphatase 1, regulatory subunit 47; Serine/threonine kinase 15; Serine/threonine kinase 6; Serine/threonine kinase; Serine/threonine kinase; Serine/threonine-protein kinase 15; Serine/threonine-protein kinase 6; Serine/threonine-protein kinase aurora-A; STK15; STK6; AURKA_MOUSE; STK7.
交叉反應(yīng):Mouse
抗體來源:Rabbit
免疫原:KLH conjugated synthetic peptide derived from mouse Aurora A
亞型:IgG
性狀:Liquid
純化方法:affinity purified by Protein A
克隆類型:Polyclonal
理論分子量：48 kDa
濃度：1mg/ml
儲存液：0.01M TBS (pH7.4) with 1% BSA, 0.02% Proclin300 and 50% Glycerol.
保存條件：Shipped at 4℃. Store at -20℃ for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles.
注意事項(xiàng)：This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
靶點(diǎn)背景
MAPK 下游絲氨酸激酶，磷酸化 eIF4E 啟動翻譯；
調(diào)控細(xì)胞周期、應(yīng)激翻譯、腫瘤促癌蛋白合成；
高表達(dá)促進(jìn)實(shí)體瘤增殖、轉(zhuǎn)移、放化療抵抗。
核心實(shí)驗(yàn)操作方法
1. Western Blot（WB）
抗體孵育
一抗孵育：用5%脫脂牛奶或BSA稀釋抗體至推薦濃度（如1:1000），4℃搖床緩慢孵育過夜；或室溫孵育1-2小時，孵育時保證膜完全浸沒在抗體溶液中。
洗滌：用TBST緩沖液洗滌3次，每次5分鐘，洗去未結(jié)合的一抗；加入HRP標(biāo)記二抗（1:5000-1:10000稀釋），室溫孵育1小時。
顯影：再次洗滌后，加入ECL發(fā)光液孵育1-2分鐘，用化學(xué)發(fā)光成像儀采集圖像，根據(jù)信號強(qiáng)度調(diào)整曝光時間。
2. 免疫組化（IHC）
抗體孵育
一抗孵育：滴加稀釋后的一抗（如1:200）于組織切片上，置于濕盒中4℃孵育過夜；次日室溫復(fù)溫30分鐘，PBS沖洗3次，每次5分鐘。
二抗結(jié)合：加入生物素標(biāo)記二抗（1:200）室溫孵育30分鐘，PBS沖洗后加入ABC復(fù)合物（1:100）室溫孵育30分鐘。
顯色封片：DAB顯色劑顯色3-10分鐘（顯微鏡下觀察控制時間），蘇木素復(fù)染1分鐘，梯度乙醇脫水后中性樹膠封片。
3. 免疫熒光（IF）
抗體孵育
一抗孵育：用5% BSA稀釋抗體至工作濃度（如1:100），滴加在細(xì)胞爬片上，4℃避光孵育過夜；室溫復(fù)溫后PBS沖洗3次，每次5分鐘。
二抗結(jié)合：加入熒光標(biāo)記二抗（如FITC標(biāo)記抗兔IgG，1:200），室溫避光孵育30-60分鐘；PBS沖洗后用抗淬滅封片液封片。
觀察：熒光顯微鏡或共聚焦顯微鏡下觀察，激發(fā)波長根據(jù)二抗標(biāo)記物選擇（如FITC為488nm）。
4. ELISA實(shí)驗(yàn)
包被與孵育
包被：用包被緩沖液（pH9.6碳酸鹽緩沖液）稀釋抗原至1-10μg/ml，每孔加入100μl，4℃過夜孵育。
封閉與一抗孵育：棄去包被液，PBST洗滌3次，加入5% BSA封閉液200μl/孔，37℃孵育1小時；加入稀釋后的一抗100μl/孔，37℃孵育1-2小時或4℃過夜。
檢測：洗滌后加入酶標(biāo)二抗（1:5000），37℃孵育1小時；TMB底物溶液顯色10-30分鐘，2M硫酸終止反應(yīng)后，酶標(biāo)儀450nm波長讀取OD值。
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關(guān)鍵字： 有絲分裂激酶A抗體;48 kDa;Rabbit;
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