產(chǎn)品屬性
產(chǎn)品名稱 | 重組增強(qiáng)型綠色熒光蛋白抗體 | 貨號 | YS-K7830 |
英文名稱 | EGFP Rabbit pAb | 用途 | 僅供科研實(shí)驗(yàn) |
商品介紹
產(chǎn)品應(yīng)用:
Not yet tested in other applications.
Optimal working dilutions must be determined by the end user.
英文別名:Enhanced Green Fluorecent protein; rEGFP; Recombinant EGFP; Enhanced Green Fluorecent protein.
交叉反應(yīng):Species independent
抗體來源:Rabbit
免疫原:Recombinant EGFP protin
亞型:IgG
性狀:Liquid
純化方法:affinity purified by Protein A
克隆類型:Polyclonal
理論分子量：None
濃度：1mg/ml
儲(chǔ)存液：0.01M TBS (pH7.4) with 1% BSA, 0.02% Proclin300 and 50% Glycerol.
保存條件：Shipped at 4℃. Store at -20℃ for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles.
注意事項(xiàng)：This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
原理特點(diǎn)
靶向EGFP，是水母GFP的增強(qiáng)型突變體。它作為報(bào)告基因廣泛用于基因表達(dá)、蛋白定位和細(xì)胞示蹤。該抗體用于檢測EGFP融合蛋白表達(dá)和定位驗(yàn)證。
靶點(diǎn)背景
靶點(diǎn)基礎(chǔ)定義與編碼基因：識(shí)別 EGFP 熒光報(bào)告蛋白，人工改造 GFP 突變體，外源轉(zhuǎn)基因標(biāo)記蛋白。
核心生理生物學(xué)功能：無細(xì)胞內(nèi)源生理功能；僅作為轉(zhuǎn)基因示蹤、蛋白亞細(xì)胞定位熒光報(bào)告標(biāo)簽。
疾病關(guān)聯(lián)與科研應(yīng)用：轉(zhuǎn)基因動(dòng)物、慢病毒穩(wěn)轉(zhuǎn)細(xì)胞株蛋白表達(dá)定量；WB/IHC 驗(yàn)證 EGFP 融合蛋白表達(dá)水平。
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實(shí)驗(yàn)操作過程注意事項(xiàng)
抗體稀釋
使用專用抗體稀釋液或含BSA的緩沖液稀釋抗體，避免用純水稀釋（純水中無鹽分會(huì)導(dǎo)致抗體變性）；
嚴(yán)格按照說明書的建議稀釋比例進(jìn)行稀釋，若說明書未提供，可通過預(yù)實(shí)驗(yàn)確定最佳稀釋比例（通常1:500-1:10000）；
稀釋后的抗體需一次性用完，未用完的部分不可再次凍存。
抗體孵育
一抗孵育：通常4℃孵育過夜，可減少非特異性結(jié)合，避免室溫孵育時(shí)間過長導(dǎo)致抗體變性；
二抗孵育：室溫孵育1-2小時(shí)，孵育期間需避光（熒光二抗）；
孵育時(shí)需保證抗體均勻覆蓋樣本表面，避免產(chǎn)生氣泡；
實(shí)驗(yàn)過程中使用封閉液（如5%BSA或脫脂牛奶）封閉非特異性結(jié)合位點(diǎn)，減少背景信號。
洗滌步驟
每步孵育后，需用PBST或TBST洗滌3-5次，每次5分鐘，徹底去除未結(jié)合的抗體；
洗滌時(shí)需輕輕晃動(dòng)培養(yǎng)板或載玻片，避免用力過猛導(dǎo)致樣本脫落；
洗滌液需新鮮配制，避免使用過期或變質(zhì)的洗滌液。
關(guān)鍵字： 重組增強(qiáng)型綠色熒光蛋白抗體;Rabbit;
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