粘蛋白4抗體
原理特點(diǎn)
靶向MUC4，是跨膜粘蛋白家族成員。它在正常上皮中低表達(dá)，在胰腺癌、肺癌等腫瘤中顯著上調(diào)，通過激活ErbB2和抑制凋亡促進(jìn)腫瘤進(jìn)展。該抗體用于研究腫瘤侵襲和早期診斷標(biāo)志物。
英文名稱:MUC4 Rabbit pAb
中文名稱:粘蛋白4抗體
Not yet tested in other applications.
Optimal working dilutions must be determined by the end user.
英文別名:Mucin4; Mucin-4; Mucin 4; MUC-4; Ascites sialoglycoprotein; ASGP; Pancreatic adenocarcinoma mucin; Testis mucin; Tracheobronchial mucin; Mucin-4 alpha chain; Ascites sialoglycoprotein 1; ASGP-1; Mucin-4 beta chain; Ascites sialoglycoprotein 2; ASGP-2; Mucin 4 cell surface associated; Mucin 4 tracheobronchial; Tracheobronchial mucin Fragment; MUC4_HUMAN.
交叉反應(yīng):Human,Mouse
抗體來源:Rabbit
免疫原:KLH conjugated synthetic peptide derived from human Mucin-4 beta chain
亞型:IgG
性狀:Liquid
純化方法:affinity purified by Protein A
克隆類型:Polyclonal
理論分子量：80 kDa
濃度：1mg/ml
儲(chǔ)存液：0.01M TBS (pH7.4) with 1% BSA, 0.02% Proclin300 and 50% Glycerol.
保存條件：Shipped at 4℃. Store at -20℃ for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles.
注意事項(xiàng)：This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
靶點(diǎn)背景
MUC4 跨膜粘蛋白，正常表達(dá)氣道、生殖道上皮，調(diào)節(jié)上皮潤(rùn)滑與免疫屏障，結(jié)合 ErbB2 受體調(diào)控上皮生長(zhǎng)。
胰腺癌、膽管癌、肺鱗癌中 MUC4 顯著上調(diào)，阻斷細(xì)胞間黏附、激活 HER2 促增殖信號(hào)，是胰腺導(dǎo)管腺癌高特異性標(biāo)志物。
鑒別胰腺良性囊腫與惡性腺癌，評(píng)估腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移潛能，適配石蠟切片 IHC、細(xì)胞 WB 實(shí)驗(yàn)。
核心實(shí)驗(yàn)操作方法
1. Western Blot（WB）
抗體孵育
一抗孵育：用5%脫脂牛奶或BSA稀釋抗體至推薦濃度（如1:1000），4℃搖床緩慢孵育過夜；或室溫孵育1-2小時(shí)，孵育時(shí)保證膜完全浸沒在抗體溶液中。
洗滌：用TBST緩沖液洗滌3次，每次5分鐘，洗去未結(jié)合的一抗；加入HRP標(biāo)記二抗（1:5000-1:10000稀釋），室溫孵育1小時(shí)。
顯影：再次洗滌后，加入ECL發(fā)光液孵育1-2分鐘，用化學(xué)發(fā)光成像儀采集圖像，根據(jù)信號(hào)強(qiáng)度調(diào)整曝光時(shí)間。
2. 免疫組化（IHC）
抗體孵育
一抗孵育：滴加稀釋后的一抗（如1:200）于組織切片上，置于濕盒中4℃孵育過夜；次日室溫復(fù)溫30分鐘，PBS沖洗3次，每次5分鐘。
二抗結(jié)合：加入生物素標(biāo)記二抗（1:200）室溫孵育30分鐘，PBS沖洗后加入ABC復(fù)合物（1:100）室溫孵育30分鐘。
顯色封片：DAB顯色劑顯色3-10分鐘（顯微鏡下觀察控制時(shí)間），蘇木素復(fù)染1分鐘，梯度乙醇脫水后中性樹膠封片。
3. 免疫熒光（IF）
抗體孵育
一抗孵育：用5% BSA稀釋抗體至工作濃度（如1:100），滴加在細(xì)胞爬片上，4℃避光孵育過夜；室溫復(fù)溫后PBS沖洗3次，每次5分鐘。
二抗結(jié)合：加入熒光標(biāo)記二抗（如FITC標(biāo)記抗兔IgG，1:200），室溫避光孵育30-60分鐘；PBS沖洗后用抗淬滅封片液封片。
觀察：熒光顯微鏡或共聚焦顯微鏡下觀察，激發(fā)波長(zhǎng)根據(jù)二抗標(biāo)記物選擇（如FITC為488nm）。
4. ELISA實(shí)驗(yàn)
包被與孵育
包被：用包被緩沖液（pH9.6碳酸鹽緩沖液）稀釋抗原至1-10μg/ml，每孔加入100μl，4℃過夜孵育。
封閉與一抗孵育：棄去包被液，PBST洗滌3次，加入5% BSA封閉液200μl/孔，37℃孵育1小時(shí)；加入稀釋后的一抗100μl/孔，37℃孵育1-2小時(shí)或4℃過夜。
檢測(cè)：洗滌后加入酶標(biāo)二抗（1:5000），37℃孵育1小時(shí)；TMB底物溶液顯色10-30分鐘，2M硫酸終止反應(yīng)后，酶標(biāo)儀450nm波長(zhǎng)讀取OD值。
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關(guān)鍵字： 粘蛋白4抗體;80 kDa;Rabbit;
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