整合素α3β1抗體
原理特點
靶向α3β1整合素異二聚體,是層粘連蛋白-332和-511的受體。它在上皮細胞基底面表達,維持基底膜完整性和細胞極性。該抗體用于研究上皮粘附和腫瘤侵襲。
英文名稱:Integrin Alpha 3 + Beta 1 Rabbit pAb
中文名稱:整合素α3β1抗體

Not yet tested in other applications.
Optimal working dilutions must be determined by the end user.
英文別名:Integrin alpha 3/beta 1; Integrin VLA 4 beta subunit; alpha 3 subunit of VLA 3 receptor; CD29; CD49C; Fibronectin receptor; Fibronectin receptor beta subunit; Galactoprotein B3; GAPB3; VL3A; VLA 3 alpha chain; VLA3a.
交叉反應(yīng):Human,Mouse,Rat
抗體來源:Rabbit
免疫原:KLH conjugated synthetic peptide derived from human Integrin Alpha 3(976-1025aa) + Beta 1(35-47aa)
亞型:IgG
性狀:Liquid
純化方法:affinity purified by Protein A
克隆類型:Polyclonal
理論分子量:115 kDa
濃度:1mg/ml
儲存液:0.01M TBS (pH7.4) with 1% BSA, 0.02% Proclin300 and 50% Glycerol.
保存條件:Shipped at 4℃. Store at -20℃ for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles.
注意事項:This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
靶點背景
α3β1 整合素主要配體層粘連蛋白,調(diào)控上皮基底膜錨定、皮膚腎臟上皮形態(tài)發(fā)育、細胞極性維持。
腫瘤中 α3β1 異常激活,介導(dǎo)基底膜侵襲、遠處定植轉(zhuǎn)移;高表達提示肺癌、乳腺癌、卵巢癌惡性程度高。
上皮基底黏附核心整合素,用于腫瘤侵襲、皮膚創(chuàng)傷修復(fù)、腎病基底膜損傷研究。
核心實驗操作方法
1. Western Blot(WB)
抗體孵育
一抗孵育:用5%脫脂牛奶或BSA稀釋抗體至推薦濃度(如1:1000),4℃搖床緩慢孵育過夜;或室溫孵育1-2小時,孵育時保證膜完全浸沒在抗體溶液中。
洗滌:用TBST緩沖液洗滌3次,每次5分鐘,洗去未結(jié)合的一抗;加入HRP標記二抗(1:5000-1:10000稀釋),室溫孵育1小時。
顯影:再次洗滌后,加入ECL發(fā)光液孵育1-2分鐘,用化學(xué)發(fā)光成像儀采集圖像,根據(jù)信號強度調(diào)整曝光時間。
2. 免疫組化(IHC)
抗體孵育
一抗孵育:滴加稀釋后的一抗(如1:200)于組織切片上,置于濕盒中4℃孵育過夜;次日室溫復(fù)溫30分鐘,PBS沖洗3次,每次5分鐘。
二抗結(jié)合:加入生物素標記二抗(1:200)室溫孵育30分鐘,PBS沖洗后加入ABC復(fù)合物(1:100)室溫孵育30分鐘。
顯色封片:DAB顯色劑顯色3-10分鐘(顯微鏡下觀察控制時間),蘇木素復(fù)染1分鐘,梯度乙醇脫水后中性樹膠封片。
3. 免疫熒光(IF)
抗體孵育
一抗孵育:用5% BSA稀釋抗體至工作濃度(如1:100),滴加在細胞爬片上,4℃避光孵育過夜;室溫復(fù)溫后PBS沖洗3次,每次5分鐘。
二抗結(jié)合:加入熒光標記二抗(如FITC標記抗兔IgG,1:200),室溫避光孵育30-60分鐘;PBS沖洗后用抗淬滅封片液封片。
觀察:熒光顯微鏡或共聚焦顯微鏡下觀察,激發(fā)波長根據(jù)二抗標記物選擇(如FITC為488nm)。
4. ELISA實驗
包被與孵育
包被:用包被緩沖液(pH9.6碳酸鹽緩沖液)稀釋抗原至1-10μg/ml,每孔加入100μl,4℃過夜孵育。
封閉與一抗孵育:棄去包被液,PBST洗滌3次,加入5% BSA封閉液200μl/孔,37℃孵育1小時;加入稀釋后的一抗100μl/孔,37℃孵育1-2小時或4℃過夜。
檢測:洗滌后加入酶標二抗(1:5000),37℃孵育1小時;TMB底物溶液顯色10-30分鐘,2M硫酸終止反應(yīng)后,酶標儀450nm波長讀取OD值。
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關(guān)鍵字: 整合素α3β1抗體;115 kDa;Rabbit;
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