整合素β3/CD61抗體
原理特點(diǎn)
靶向CD61,是β3整合素亞基。它與αIIb形成αIIbβ3介導(dǎo)血小板聚集,與αV形成αVβ3參與血管生成和骨吸收。該抗體用于研究血小板功能和整合素靶向治療。
英文名稱:ITGB3 Rabbit pAb
中文名稱:整合素β3/CD61抗體

Not yet tested in other applications.
Optimal working dilutions must be determined by the end user.
英文別名:Integrin beta-3; Integrin beta chain, β3 precursor; Integrin beta 3; CD 61; CD61; CD61 antigen; GP3A; GPIIIa; HPA 1; HPA 4; Integrin beta 3(platelet glycoprotein IIIa antigen CD61); Integrin beta chain beta 3; ITG B3; ITGB 3; NAIT; Platelet fibrinogen receptor beta subunit; Platelet glycoprotein IIIa; platelet glycoprotein IIIa precursor; Platelet membrane glycoprotein IIIa; PTP; ITB3_HUMAN.
交叉反應(yīng):Human,Mouse
抗體來(lái)源:Rabbit
免疫原:KLH conjugated synthetic peptide derived from human Integrin beta 3
亞型:IgG
性狀:Liquid
純化方法:affinity purified by Protein A
克隆類型:Polyclonal
理論分子量:84 kDa
濃度:1mg/ml
儲(chǔ)存液:0.01M TBS (pH7.4) with 1% BSA, 0.02% Proclin300 and 50% Glycerol.
保存條件:Shipped at 4℃. Store at -20℃ for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles.
注意事項(xiàng):This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
靶點(diǎn)背景
β3 亞基配對(duì) αⅡb(血小板)、αV(內(nèi)皮 / 腫瘤);αⅡbβ3 調(diào)控血小板聚集凝血;αVβ3 驅(qū)動(dòng)內(nèi)皮血管生成、腫瘤遷移。
腫瘤新生血管內(nèi)皮特異性高表達(dá) αVβ3,是腫瘤血管顯像、抗血管靶向治療核心靶點(diǎn)。
CD61 標(biāo)記全部 β3 整合素,可同時(shí)檢測(cè)血小板活性與腫瘤血管生成水平。
核心實(shí)驗(yàn)操作方法
1. Western Blot(WB)
抗體孵育
一抗孵育:用5%脫脂牛奶或BSA稀釋抗體至推薦濃度(如1:1000),4℃搖床緩慢孵育過夜;或室溫孵育1-2小時(shí),孵育時(shí)保證膜完全浸沒在抗體溶液中。
洗滌:用TBST緩沖液洗滌3次,每次5分鐘,洗去未結(jié)合的一抗;加入HRP標(biāo)記二抗(1:5000-1:10000稀釋),室溫孵育1小時(shí)。
顯影:再次洗滌后,加入ECL發(fā)光液孵育1-2分鐘,用化學(xué)發(fā)光成像儀采集圖像,根據(jù)信號(hào)強(qiáng)度調(diào)整曝光時(shí)間。
2. 免疫組化(IHC)
抗體孵育
一抗孵育:滴加稀釋后的一抗(如1:200)于組織切片上,置于濕盒中4℃孵育過夜;次日室溫復(fù)溫30分鐘,PBS沖洗3次,每次5分鐘。
二抗結(jié)合:加入生物素標(biāo)記二抗(1:200)室溫孵育30分鐘,PBS沖洗后加入ABC復(fù)合物(1:100)室溫孵育30分鐘。
顯色封片:DAB顯色劑顯色3-10分鐘(顯微鏡下觀察控制時(shí)間),蘇木素復(fù)染1分鐘,梯度乙醇脫水后中性樹膠封片。
3. 免疫熒光(IF)
抗體孵育
一抗孵育:用5% BSA稀釋抗體至工作濃度(如1:100),滴加在細(xì)胞爬片上,4℃避光孵育過夜;室溫復(fù)溫后PBS沖洗3次,每次5分鐘。
二抗結(jié)合:加入熒光標(biāo)記二抗(如FITC標(biāo)記抗兔IgG,1:200),室溫避光孵育30-60分鐘;PBS沖洗后用抗淬滅封片液封片。
觀察:熒光顯微鏡或共聚焦顯微鏡下觀察,激發(fā)波長(zhǎng)根據(jù)二抗標(biāo)記物選擇(如FITC為488nm)。
4. ELISA實(shí)驗(yàn)
包被與孵育
包被:用包被緩沖液(pH9.6碳酸鹽緩沖液)稀釋抗原至1-10μg/ml,每孔加入100μl,4℃過夜孵育。
封閉與一抗孵育:棄去包被液,PBST洗滌3次,加入5% BSA封閉液200μl/孔,37℃孵育1小時(shí);加入稀釋后的一抗100μl/孔,37℃孵育1-2小時(shí)或4℃過夜。
檢測(cè):洗滌后加入酶標(biāo)二抗(1:5000),37℃孵育1小時(shí);TMB底物溶液顯色10-30分鐘,2M硫酸終止反應(yīng)后,酶標(biāo)儀450nm波長(zhǎng)讀取OD值。
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關(guān)鍵字: 整合素β3/CD61抗體;84 kDa;Rabbit;
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