SK-MEL-1人皮膚黑色素瘤細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基
產(chǎn)品信息:
培養(yǎng)基成分 MEM(含NEAA)+10% FBS+1% P/S
產(chǎn)品形態(tài) 液體
細(xì)菌檢測(cè) 陰性
真菌檢測(cè) 陰性
支原體檢測(cè) 陰性
產(chǎn)品濃度 1×
SK-MEL-1細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基由團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過(guò)長(zhǎng)期測(cè)試,本產(chǎn)品可保持SK-MEL-1細(xì)胞最佳的生長(zhǎng)狀態(tài)。
本產(chǎn)品中已包含SK-MEL-1 細(xì)胞生長(zhǎng)所需的各種成分,無(wú)需添加任何成分,可直接用于SK-MEL-1細(xì)胞的培養(yǎng)。
產(chǎn)品規(guī)格 125mL×4
pH 7.4-7.8
細(xì)胞生長(zhǎng)實(shí)驗(yàn) 細(xì)胞生長(zhǎng)良好,形態(tài)正常
內(nèi)毒素含量 < 3 EU/mL
儲(chǔ)存條件 2-8℃,避光儲(chǔ)存
運(yùn)輸條件 冰袋運(yùn)輸
有效期 6個(gè)月
操作步驟:
1. 細(xì)胞接收處理
?凍存細(xì)胞?:干冰運(yùn)輸?shù)截浐?,立即轉(zhuǎn)入液氮儲(chǔ)存,或24小時(shí)內(nèi)放至-80℃冰箱暫存,再盡快復(fù)蘇。
?活細(xì)胞(T25瓶)?:75%酒精消毒瓶身,放入培養(yǎng)箱靜置2小時(shí),鏡檢觀(guān)察匯合度:達(dá)到80%以上即可傳代,不足則更換新鮮培養(yǎng)基后繼續(xù)培養(yǎng)。
2. 細(xì)胞復(fù)蘇
1、提前將完全培養(yǎng)基放入37℃水浴預(yù)熱;從液氮取出凍存管,暫時(shí)放-80℃讓殘余液氮揮發(fā)。
2、用鑷子夾住凍存管,放入37℃水浴快速晃動(dòng),1分鐘左右完全融化(注意不要沒(méi)過(guò)管口)。
3、酒精消毒凍存管外壁,將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至含6-7mL完全培養(yǎng)基的離心管,1100rpm室溫離心4分鐘。
4、棄上清,用1mL新鮮完全培養(yǎng)基重懸,轉(zhuǎn)移至含4mL培養(yǎng)基的T25培養(yǎng)瓶,做好標(biāo)記后放入培養(yǎng)箱培養(yǎng)。
常見(jiàn)的基礎(chǔ)培養(yǎng)基類(lèi)型:
根據(jù)細(xì)胞類(lèi)型的不同,實(shí)驗(yàn)室常選用不同的基礎(chǔ)培養(yǎng)基:
DMEM(Dulbecco改良型Eagle培養(yǎng)基):應(yīng)用最廣的廣譜貼壁細(xì)胞培養(yǎng)基,有高糖和低糖配方可選,適用于成纖維細(xì)胞、腫瘤細(xì)胞等。
RPMI 1640:專(zhuān)為懸浮細(xì)胞設(shè)計(jì),含有豐富的氨基酸和維生素,是淋巴細(xì)胞、雜交瘤細(xì)胞及免疫學(xué)研究的首選。
MEM(最低必需培養(yǎng)基):成分精簡(jiǎn)的基礎(chǔ)通用型培養(yǎng)基,成本低,適合常規(guī)貼壁細(xì)胞系。
DMEM/F12:結(jié)合了DMEM的高營(yíng)養(yǎng)和F12的成分多樣性,非常適合原代細(xì)胞、難養(yǎng)細(xì)胞株以及低血清/無(wú)血清培養(yǎng)。
IMDM:高度富集的營(yíng)養(yǎng)強(qiáng)化型培養(yǎng)基,適用于對(duì)營(yíng)養(yǎng)要求苛刻的造血細(xì)胞、T淋巴細(xì)胞等高密度快速增殖細(xì)胞。
特殊功能培養(yǎng)基:如Neurobasal(神經(jīng)元專(zhuān)用)、Essential 8?(人多能干細(xì)胞無(wú)異種無(wú)飼養(yǎng)層培養(yǎng))等,針對(duì)特定細(xì)胞具有極高的專(zhuān)一性。
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細(xì)胞培養(yǎng)注意事項(xiàng):
無(wú)菌操作與污染防范
嚴(yán)防支原體污染:支原體被稱(chēng)為“最安靜的實(shí)驗(yàn)殺手”,通常不會(huì)引起培養(yǎng)基渾濁或明顯改變細(xì)胞形態(tài),但會(huì)嚴(yán)重干擾細(xì)胞代謝與基因表達(dá)。建議將PCR檢測(cè)法作為日常篩查的常規(guī)手段。
規(guī)范抗生素使用:除特殊篩選系統(tǒng)外,正常培養(yǎng)狀態(tài)下不建議添加任何抗生素。若確需防止細(xì)菌污染,可加入青霉素-鏈霉素雙抗溶液(終濃度為青霉素100 U/mL,鏈霉素100 μg/mL)。
杜絕交叉污染:預(yù)熱后未用完的培養(yǎng)基絕對(duì)不可倒回原瓶;分裝時(shí)避免瓶口接觸容器內(nèi)壁,操作完畢后立即密封。所有廢棄培養(yǎng)基必須經(jīng)高壓滅菌后方可處理。
關(guān)鍵字: SK-MEL-1 ; 人皮膚黑色素瘤;細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基;
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上海撫生實(shí)業(yè)有限公司(Shanghai Fusheng Industrial Co., Ltd.,China)先后與天津中醫(yī)學(xué)院、復(fù)旦大學(xué)、上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院、上海交通大學(xué)、 華東師范大學(xué)、第二軍醫(yī)大學(xué)、南京大學(xué),暨南大學(xué),南京工業(yè)大學(xué),曙光醫(yī)院、華山醫(yī)院、瑞金醫(yī)院、上海有機(jī)研究所、中科院上海分院等多家單位建立了良好的合作關(guān)系。
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