原代卵泡膜細胞培養(yǎng)體系
產(chǎn)品信息：
培養(yǎng)基成分
產(chǎn)品形態(tài) 液體
細菌檢測 陰性
真菌檢測 陰性
支原體檢測 陰性
產(chǎn)品濃度 1×
原代卵泡膜細胞培養(yǎng)體系是一個為體外生長的人、大鼠、小鼠、兔等哺乳動物卵泡膜細胞設計的理想的完全培養(yǎng)基方案。本體系是一個基于碳酸氫鹽的緩沖體系，可以在孵育的5%的CO2的氣體環(huán)境下維持一個圍繞pH7.2的酸堿緩沖體系。本體系是一個無菌的液體混合系統(tǒng)，其中包含必須和非必須氨基酸、維生素、激素、生長因子、微量元素和一些其他的有機和無機化合物以及胎牛血清（10%）。本培養(yǎng)體系是基于固定配方配制的液態(tài)培養(yǎng)體系，可以為體外培養(yǎng)的人、大鼠、小鼠、兔等哺乳動物卵泡膜細胞提供一個確定適宜的平衡營養(yǎng)環(huán)境，并且可以選擇性的促進
產(chǎn)品規(guī)格 125mL×4
pH 7.4-7.8
細胞生長實驗 細胞生長良好，形態(tài)正常
內(nèi)毒素含量 < 3 EU/mL
儲存條件 2-8℃，避光儲存
運輸條件 冰袋運輸
有效期 6個月
操作步驟：
1. 細胞接收處理
?凍存細胞?：干冰運輸?shù)截浐螅⒓崔D(zhuǎn)入液氮儲存，或24小時內(nèi)放至-80℃冰箱暫存，再盡快復蘇。
?活細胞（T25瓶）?：75%酒精消毒瓶身，放入培養(yǎng)箱靜置2小時，鏡檢觀察匯合度：達到80%以上即可傳代，不足則更換新鮮培養(yǎng)基后繼續(xù)培養(yǎng)。
2. 細胞復蘇
1、提前將完全培養(yǎng)基放入37℃水浴預熱；從液氮取出凍存管，暫時放-80℃讓殘余液氮揮發(fā)。
2、用鑷子夾住凍存管，放入37℃水浴快速晃動，1分鐘左右完全融化（注意不要沒過管口）。
3、酒精消毒凍存管外壁，將細胞懸液轉(zhuǎn)移至含6-7mL完全培養(yǎng)基的離心管，1100rpm室溫離心4分鐘。
4、棄上清，用1mL新鮮完全培養(yǎng)基重懸，轉(zhuǎn)移至含4mL培養(yǎng)基的T25培養(yǎng)瓶，做好標記后放入培養(yǎng)箱培養(yǎng)。
常見的基礎培養(yǎng)基類型：
根據(jù)細胞類型的不同，實驗室常選用不同的基礎培養(yǎng)基：
DMEM（Dulbecco改良型Eagle培養(yǎng)基）：應用最廣的廣譜貼壁細胞培養(yǎng)基，有高糖和低糖配方可選，適用于成纖維細胞、腫瘤細胞等。
RPMI 1640：專為懸浮細胞設計，含有豐富的氨基酸和維生素，是淋巴細胞、雜交瘤細胞及免疫學研究的首選。
MEM（最低必需培養(yǎng)基）：成分精簡的基礎通用型培養(yǎng)基，成本低，適合常規(guī)貼壁細胞系。
DMEM/F12：結(jié)合了DMEM的高營養(yǎng)和F12的成分多樣性，非常適合原代細胞、難養(yǎng)細胞株以及低血清/無血清培養(yǎng)。
IMDM：高度富集的營養(yǎng)強化型培養(yǎng)基，適用于對營養(yǎng)要求苛刻的造血細胞、T淋巴細胞等高密度快速增殖細胞。
特殊功能培養(yǎng)基：如Neurobasal（神經(jīng)元專用）、Essential 8?（人多能干細胞無異種無飼養(yǎng)層培養(yǎng)）等，針對特定細胞具有極高的專一性。
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細胞培養(yǎng)注意事項：
無菌操作與污染防范
嚴防支原體污染：支原體被稱為“最安靜的實驗殺手”，通常不會引起培養(yǎng)基渾濁或明顯改變細胞形態(tài)，但會嚴重干擾細胞代謝與基因表達。建議將PCR檢測法作為日常篩查的常規(guī)手段。
規(guī)范抗生素使用：除特殊篩選系統(tǒng)外，正常培養(yǎng)狀態(tài)下不建議添加任何抗生素。若確需防止細菌污染，可加入青霉素-鏈霉素雙抗溶液（終濃度為青霉素100 U/mL，鏈霉素100 μg/mL）。
杜絕交叉污染：預熱后未用完的培養(yǎng)基絕對不可倒回原瓶；分裝時避免瓶口接觸容器內(nèi)壁，操作完畢后立即密封。所有廢棄培養(yǎng)基必須經(jīng)高壓滅菌后方可處理。
關(guān)鍵字： 原代卵泡膜;細胞專用培養(yǎng)基;
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