FITC標(biāo)記的刺激分子B7-1蛋白單克隆抗體
原理特點(diǎn)
該單克隆抗體經(jīng)FITC綠色熒光標(biāo)記,特異性識(shí)別抗原遞呈細(xì)胞表面的B7-1共刺激分子,該分子是T細(xì)胞活化的第二信號(hào)關(guān)鍵配體,主導(dǎo)免疫激活、抗原遞呈及免疫耐受調(diào)控??贵w特異性高、熒光均一性好,可精準(zhǔn)標(biāo)記樹(shù)突狀細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、活化B細(xì)胞表面的B7-1蛋白,適合流式細(xì)胞術(shù)定量檢測(cè)細(xì)胞免疫活化水平、免疫熒光定位分析,廣泛應(yīng)用于腫瘤免疫、移植免疫及炎癥免疫機(jī)制研究。
英文名稱(chēng):CD80 Mouse mAb, FITC conjugated
中文名稱(chēng):FITC標(biāo)記的刺激分子B7-1蛋白單克隆抗體
英文別名:Activation B7-1 antigen; B lymphocyte activation antigen B7; B7; B7-1; B7-1 antigen; BB1; CD28 antigen ligand 1; CD28LG; CD28LG1; CD80 antigen(CD28 antigen ligand 1, B7-1 antigen); CD80 antigen; CD80 molecule; CD80_HUMAN; Costimulatory factor CD80; costimulatory molecule variant IgV-CD80; CTLA-4 counter-receptor B7.1; LAB7; T-lymphocyte activation antigen CD80.
標(biāo)記物:FITC 綠色熒光
靶蛋白:CD80/B7-1,共刺激分子
宿主:小鼠單克隆 IgG1 κ,克隆 2D10.4
種屬:人
應(yīng)用:流式細(xì)胞術(shù)(樹(shù)突狀細(xì)胞、活化 B 細(xì)胞分型)、免疫熒光
功能:抗原提呈細(xì)胞表面共刺激分子,結(jié)合 T 細(xì)胞 CD28 啟動(dòng) T 細(xì)胞活化,免疫應(yīng)答、自身免疫、腫瘤免疫檢查點(diǎn)研究靶點(diǎn)
儲(chǔ)存:2–8℃避光,勿凍存
靶點(diǎn)背景
1. B7-1(CD80)是抗原提呈細(xì)胞共刺激分子,表達(dá)于樹(shù)突狀細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、活化 B 細(xì)胞
2. 結(jié)合 T 細(xì)胞 CD28 傳遞共刺激信號(hào),是 T 細(xì)胞完全活化必需第二信號(hào)
3. 免疫應(yīng)答、腫瘤免疫檢查點(diǎn)、樹(shù)突狀細(xì)胞成熟度檢測(cè)關(guān)鍵指標(biāo)
實(shí)驗(yàn)優(yōu)化與注意事項(xiàng)
抗體濃度優(yōu)化
方陣滴定法:設(shè)置一抗?jié)舛忍荻龋ㄈ?/span>1:200, 1:500, 1:1000)和二抗?jié)舛忍荻?,選擇信噪比最高的組合
預(yù)實(shí)驗(yàn):首次使用建議進(jìn)行濃度梯度預(yù)實(shí)驗(yàn),確定最佳工作濃度
樣本處理要點(diǎn)
細(xì)胞樣本:貼壁細(xì)胞用細(xì)胞刮收集,懸浮細(xì)胞離心收集,盡量吸盡上清避免殘留培養(yǎng)基
組織樣本:新鮮組織建議液氮速凍后-80℃保存,避免反復(fù)凍融
磷酸化蛋白:全程冰上操作,加入磷酸酶抑制劑防止蛋白去磷酸化
結(jié)果判斷與分析
WB:觀(guān)察是否出現(xiàn)特異性條帶,陰性對(duì)照應(yīng)無(wú)條帶或明顯弱于陽(yáng)性對(duì)照
IHC:陽(yáng)性信號(hào)應(yīng)定位于目標(biāo)蛋白的正常亞細(xì)胞結(jié)構(gòu)(如細(xì)胞核、細(xì)胞膜)
IF:觀(guān)察熒光信號(hào)是否與目標(biāo)蛋白亞細(xì)胞定位一致,DAPI染色定位細(xì)胞核
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關(guān)鍵字: FITC標(biāo)記的刺激分子B7-1蛋白單克隆;CD80 Mouse mAb, FITC;100ul;
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