PE標記的Gasdermin D蛋白抗體
原理特點
該抗體采用藻紅蛋白(PE)高亮熒光標記,熒光量子產(chǎn)率高、發(fā)光強度大,特異性識別焦亡核心蛋白Gasdermin D(GSDMD)。GSDMD是細胞焦亡通路的關(guān)鍵執(zhí)行蛋白,被剪切活化后形成細胞膜孔道,介導(dǎo)炎癥因子釋放與細胞焦亡,是炎癥性死亡的核心標志物。該抗體可識別總GSDMD蛋白,PE熒光靈敏度極高,適合流式細胞術(shù)檢測焦亡細胞比例、免疫熒光定位分析,是細胞焦亡機制研究的核心工具。
英文名稱:GSDMD Rabbit pAb, PE conjugated
中文名稱:PE標記的Gasdermin D蛋白抗體
英文別名:DF 5L; DF5L; DFNA 5L; DFNA5L; FKSG 10; FKSG10; FLJ12150; Gasdermin D; Gasdermin domain containing 1; Gasdermin domain containing protein 1; Gasdermin domain-containing protein 1; Gasdermin-D; GasderminD; GSDMD_HUMAN; GSDMDC 1; GSDMDC1; Gasdermin-D, N-terminal; GSDMD-NT; hGSDMD-NTD; Gasdermin-D, C-terminal; GSDMD-CT; hGSDMD-CTD.
靶標:GSDMD(焦孔素 D,細胞焦亡核心執(zhí)行蛋白;活化切割為 N 端打孔結(jié)構(gòu)域)
熒光標記:PE 藻紅蛋白;Ex=488/565 nm,Em=578 nm,亮度極高
抗體類型:兔重組單克隆(EPR20859 克?。? 兔多克隆
種屬反應(yīng):人、小鼠、大鼠
適用實驗:胞內(nèi)流式細胞術(shù)(焦亡定量)、IF、IHC、WB
功能用途:炎癥、細胞焦亡通路研究,LPS + 尼日利亞菌素誘導(dǎo)焦亡模型檢測
儲存:4℃避光短期,長期 - 20℃避光
靶點背景
1. GSDMD 是細胞焦亡關(guān)鍵執(zhí)行蛋白,靜息狀態(tài)為全長無活性形式
2. 被 Caspase-1/4/5 剪切后釋放 N 端結(jié)構(gòu)域,打孔細胞膜引發(fā)焦亡炎癥性死亡
3. 炎癥、膿毒癥、感染免疫、腫瘤焦亡機制研究核心分子
實驗操作關(guān)鍵
樣本前處理
細胞樣本:用PBS緩沖液輕洗2-3次去除培養(yǎng)基殘留,固定(如4%多聚甲醛)后按需進行通透處理(0.3% Triton X-100),封閉液(5% BSA或血清)孵育30-60分鐘以降低非特異性結(jié)合。
組織樣本:石蠟切片需先脫蠟水化,根據(jù)抗體類型選擇合適的抗原修復(fù)方法(如檸檬酸鹽緩沖液熱修復(fù));新鮮組織需盡快固定或冷凍保存。
抗體孵育
一抗孵育:通常4℃過夜孵育(12-16小時),或室溫孵育1-2小時;孵育時需保證樣本完全被抗體覆蓋,可放置于濕盒中防止液體揮發(fā)。
二抗結(jié)合:選擇與一抗種屬匹配的二抗,室溫避光孵育30-60分鐘;洗板/洗片需充分,通常用PBS或TBST清洗3-5次,每次5分鐘,去除未結(jié)合的二抗。
結(jié)果檢測
熒光檢測:熒光標記抗體需避光操作,封片時使用抗淬滅劑,染色后1小時內(nèi)完成觀察,或4℃避光保存不超過4小時。
顯色反應(yīng):酶標抗體需嚴格控制底物孵育時間,避免顯色過度或不足;終止反應(yīng)后及時讀取數(shù)據(jù),部分顯色產(chǎn)物易褪色需盡快分析。
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關(guān)鍵字: PE標記的Gasdermin D蛋白抗體;GSDMD Rabbit pAb, PE;100ul;
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