Cy5標記的Strep-Tag II（標簽）單克隆抗體
原理特點
該單克隆抗體采用Cy5遠紅外熒光標記，精準靶向Strep-Tag II標簽，該標簽常用于重組蛋白的可溶性表達與親和純化。抗體僅特異性識別Strep-Tag II標簽序列，無內(nèi)源蛋白干擾，Cy5熒光波段遠離細胞自發(fā)熒光區(qū)域，信噪比極高，可實現(xiàn)低豐度融合蛋白的原位檢測與定位，適配免疫熒光成像、流式分析、蛋白表達定性定量檢測，廣泛應(yīng)用于重組蛋白工程與蛋白互作研究。
英文名稱:Strep-Tag II Mouse mAb, Cy5 conjugated
中文名稱:Cy5標記的Strep-Tag II（標簽）單克隆抗體
英文別名：Strep; Strep Tag II; Strep.Tag; Strep-Tag-II; Strep Tag-II; STREP II TAG.
靶標：Strep-Tag II（八肽標簽 NWSHPQFEK，用于親和純化）
熒光標記：Cy5；Ex=647 nm，Em=665 nm
抗體類型：小鼠單克隆
種屬反應(yīng)：物種非依賴性，特異性識別 Strep-Tag II 融合蛋白
適用實驗：WB、免疫熒光、流式、標簽蛋白示蹤
功能用途：Strep 系統(tǒng)純化后蛋白檢測、蛋白定位、雙標多色實驗
儲存：-20℃避光，避免反復凍融
靶點背景
1. Strep-Tag II 為親和純化短肽標簽，可特異性結(jié)合鏈霉親和素
2. 溫和洗脫條件即可純化可溶性目的蛋白，蛋白活性保留度高
3. 蛋白親和純化、蛋白互作、外源表達蛋白特異性檢測工具
實驗優(yōu)化與注意事項
抗體濃度優(yōu)化
方陣滴定法：設(shè)置一抗?jié)舛忍荻龋ㄈ?/span>1:200, 1:500, 1:1000）和二抗?jié)舛忍荻龋x擇信噪比最高的組合
預(yù)實驗：首次使用建議進行濃度梯度預(yù)實驗，確定最佳工作濃度
樣本處理要點
細胞樣本：貼壁細胞用細胞刮收集，懸浮細胞離心收集，盡量吸盡上清避免殘留培養(yǎng)基
組織樣本：新鮮組織建議液氮速凍后-80℃保存，避免反復凍融
磷酸化蛋白：全程冰上操作，加入磷酸酶抑制劑防止蛋白去磷酸化
結(jié)果判斷與分析
WB：觀察是否出現(xiàn)特異性條帶，陰性對照應(yīng)無條帶或明顯弱于陽性對照
IHC：陽性信號應(yīng)定位于目標蛋白的正常亞細胞結(jié)構(gòu)（如細胞核、細胞膜）
IF：觀察熒光信號是否與目標蛋白亞細胞定位一致，DAPI染色定位細胞核
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