Cy5標(biāo)記的Strep-Tag II（標(biāo)簽）單克隆抗體
原理特點(diǎn)
該單克隆抗體采用Cy5遠(yuǎn)紅外熒光標(biāo)記，精準(zhǔn)靶向Strep-Tag II標(biāo)簽，該標(biāo)簽常用于重組蛋白的可溶性表達(dá)與親和純化?？贵w僅特異性識別Strep-Tag II標(biāo)簽序列，無內(nèi)源蛋白干擾，Cy5熒光波段遠(yuǎn)離細(xì)胞自發(fā)熒光區(qū)域，信噪比極高，可實(shí)現(xiàn)低豐度融合蛋白的原位檢測與定位，適配免疫熒光成像、流式分析、蛋白表達(dá)定性定量檢測，廣泛應(yīng)用于重組蛋白工程與蛋白互作研究。
英文名稱:Strep-Tag II Mouse mAb, Cy5 conjugated
中文名稱:Cy5標(biāo)記的Strep-Tag II（標(biāo)簽）單克隆抗體
英文別名：Strep; Strep Tag II; Strep.Tag; Strep-Tag-II; Strep Tag-II; STREP II TAG.
靶標(biāo)：Strep-Tag II（八肽標(biāo)簽 NWSHPQFEK，用于親和純化）
熒光標(biāo)記：Cy5；Ex=647 nm，Em=665 nm
抗體類型：小鼠單克隆
種屬反應(yīng)：物種非依賴性，特異性識別 Strep-Tag II 融合蛋白
適用實(shí)驗(yàn)：WB、免疫熒光、流式、標(biāo)簽蛋白示蹤
功能用途：Strep 系統(tǒng)純化后蛋白檢測、蛋白定位、雙標(biāo)多色實(shí)驗(yàn)
儲存：-20℃避光，避免反復(fù)凍融
靶點(diǎn)背景
1. Strep-Tag II 為親和純化短肽標(biāo)簽，可特異性結(jié)合鏈霉親和素
2. 溫和洗脫條件即可純化可溶性目的蛋白，蛋白活性保留度高
3. 蛋白親和純化、蛋白互作、外源表達(dá)蛋白特異性檢測工具
實(shí)驗(yàn)優(yōu)化與注意事項(xiàng)
抗體濃度優(yōu)化
方陣滴定法：設(shè)置一抗?jié)舛忍荻龋ㄈ?/span>1:200, 1:500, 1:1000）和二抗?jié)舛忍荻龋x擇信噪比最高的組合
預(yù)實(shí)驗(yàn)：首次使用建議進(jìn)行濃度梯度預(yù)實(shí)驗(yàn)，確定最佳工作濃度
樣本處理要點(diǎn)
細(xì)胞樣本：貼壁細(xì)胞用細(xì)胞刮收集，懸浮細(xì)胞離心收集，盡量吸盡上清避免殘留培養(yǎng)基
組織樣本：新鮮組織建議液氮速凍后-80℃保存，避免反復(fù)凍融
磷酸化蛋白：全程冰上操作，加入磷酸酶抑制劑防止蛋白去磷酸化
結(jié)果判斷與分析
WB：觀察是否出現(xiàn)特異性條帶，陰性對照應(yīng)無條帶或明顯弱于陽性對照
IHC：陽性信號應(yīng)定位于目標(biāo)蛋白的正常亞細(xì)胞結(jié)構(gòu)（如細(xì)胞核、細(xì)胞膜）
IF：觀察熒光信號是否與目標(biāo)蛋白亞細(xì)胞定位一致，DAPI染色定位細(xì)胞核
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關(guān)鍵字： Cy5標(biāo)記的Strep-Tag II（標(biāo);Strep-Tag II Mouse m;100ul;
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