FITC標(biāo)記的聚組氨酸抗體標(biāo)簽單克隆抗體
原理特點(diǎn)
該單克隆抗體經(jīng)FITC熒光標(biāo)記，特異性識(shí)別6×His聚組氨酸標(biāo)簽，該標(biāo)簽廣泛用于原核、真核重組蛋白表達(dá)與純化?？贵w可特異性結(jié)合變性與天然狀態(tài)的His標(biāo)簽蛋白，不與宿主內(nèi)源蛋白發(fā)生交叉反應(yīng)，熒光標(biāo)記均一、背景低，適配免疫熒光定位、流式檢測(cè)、Dot blot及細(xì)胞內(nèi)重組蛋白表達(dá)驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)，操作簡(jiǎn)便、適用性廣。
英文名稱:His tag Mouse mAb, FITC conjugated
中文名稱:FITC標(biāo)記的聚組氨酸抗體標(biāo)簽單克隆抗體
英文別名：HisX6; 6His; His-Tag; 6 His epitope tag; Hexa His tag; HHHHHH epitope tag; HHHHHH tag; Histidine.
靶標(biāo)：6×His（多聚組氨酸標(biāo)簽，蛋白純化常用標(biāo)簽）
熒光基團(tuán)：FITC（異硫氰酸熒光素）；Ex≈490 nm，Em≈520 nm
抗體類型：小鼠單克隆 IgG1
用途：WB、IF、流式、ELISA，檢測(cè)原核 / 真核 His 融合蛋白
稀釋參考：WB 1:1000–1:5000；流式 1 μg/mL
儲(chǔ)存：-20℃避光，避免反復(fù)凍融
靶點(diǎn)背景
1. His 標(biāo)簽（6×His）由連續(xù)組氨酸構(gòu)成，可螯合鎳離子用于蛋白純化
2. 原核表達(dá)蛋白最常用標(biāo)簽，分子量小，幾乎不影響蛋白折疊與功能
3. 原核表達(dá)鑒定、蛋白純化鑒定、免疫熒光檢測(cè)重組蛋白表達(dá)
實(shí)驗(yàn)操作關(guān)鍵
樣本前處理
細(xì)胞樣本：用PBS緩沖液輕洗2-3次去除培養(yǎng)基殘留，固定（如4%多聚甲醛）后按需進(jìn)行通透處理（0.3% Triton X-100），封閉液（5% BSA或血清）孵育30-60分鐘以降低非特異性結(jié)合。
組織樣本：石蠟切片需先脫蠟水化，根據(jù)抗體類型選擇合適的抗原修復(fù)方法（如檸檬酸鹽緩沖液熱修復(fù)）；新鮮組織需盡快固定或冷凍保存。
抗體孵育
一抗孵育：通常4℃過(guò)夜孵育（12-16小時(shí)），或室溫孵育1-2小時(shí)；孵育時(shí)需保證樣本完全被抗體覆蓋，可放置于濕盒中防止液體揮發(fā)。
二抗結(jié)合：選擇與一抗種屬匹配的二抗，室溫避光孵育30-60分鐘；洗板/洗片需充分，通常用PBS或TBST清洗3-5次，每次5分鐘，去除未結(jié)合的二抗。
結(jié)果檢測(cè)
熒光檢測(cè)：熒光標(biāo)記抗體需避光操作，封片時(shí)使用抗淬滅劑，染色后1小時(shí)內(nèi)完成觀察，或4℃避光保存不超過(guò)4小時(shí)。
顯色反應(yīng)：酶標(biāo)抗體需嚴(yán)格控制底物孵育時(shí)間，避免顯色過(guò)度或不足；終止反應(yīng)后及時(shí)讀取數(shù)據(jù)，部分顯色產(chǎn)物易褪色需盡快分析。
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關(guān)鍵字： FITC標(biāo)記的聚組氨酸抗體標(biāo)簽單克隆抗體;His tag Mouse mAb, F;100ul;
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