北京生夏蛋白技術(shù)有限公司/北京華利世
朱凱15810267201（手機(jī)微信）
rEndo S2 糖苷酶來源于化膿性鏈球菌，是一種IgG特異性內(nèi)切糖苷酶，該酶在大腸桿菌中表達(dá)。該酶可特異性水解天然 IgG Fc GlcNAc之后的N-糖鏈，從而使u GlcNAc 保留或保留附著的巖藻糖殘基。該酶可水解所有人類 IgG 亞類和許多其他物種的 IgG 的 Fc N-糖。用于研究抗體無巖藻糖基化水平；去糖基化抗體免疫親和特性；N-糖鏈上核心巖藻糖缺乏的ADCC效應(yīng)或在抗體Fc核心GlcNAcs的定點(diǎn)偶聯(lián)ADC藥物以及血清中IgG的巖藻糖化水平。
物理形態(tài): 凍干粉含10mM PB (pH 7.4 at 25°C), 150mM NaCl
分子量: 92.5kDa.
存儲(chǔ)條件: –20 °C冰箱冷凍.
保質(zhì)期： 凍干粉–20°C保質(zhì)期24 個(gè)月
溶解： 80ul水溶解
pH值范圍: rEndo S2糖苷酶在pH7.4活性最佳
酶切方法:
-適用酶切緩沖溶液：20mmol PB or Tris 緩沖液;， pH值在7-8范圍內(nèi)
-IgG蛋白樣品，按照200：1蛋白和蛋白酶的量使用，酶切反應(yīng)蛋白濃度控制在1ug/ul, 37°C干浴孵育30min以上
質(zhì)量控制 | Quality Control
純度：液相色譜檢測(cè)雜質(zhì)蛋白質(zhì)峰強(qiáng)度，rEndo S2糖苷酶色譜峰強(qiáng)度大于99.0%
專一性：在10 mM磷酸鈉、150 mM NaCl、pH7.4于37°C下孵育30分鐘，1ug rEndo S2可使500ug Bevacizumab抗體的核心GlcNAc糖去糖基化率≥ 98%
活性:500u/mg;單位定義:在pH7.4 PB溶液中，37°C孵育30分鐘，一個(gè)單位可使1ug人IgG的去糖基化率≥ 98%
LC-MS/MS質(zhì)譜分析:50ug Secukinumab抗體還原后加IdeS酶切孵育30min，然后分別加rEndo S2和rPNG ase F糖苷酶去糖基化,使用
QEHF質(zhì)譜分析確認(rèn)rEndo S2 糖苷酶的特異性
關(guān)鍵字： rEndo S2糖苷酶;內(nèi)切糖苷酶;糖苷內(nèi)切酶;