商品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 大鼠蛋白激酶Cζ(PKCz)重組蛋白 | 型號(hào) | YS-DB459 |
物種 | Rattus norvegicus (Rat,大鼠) | 用途 | 僅供科研實(shí)驗(yàn) |
型號(hào):YS-DB459
產(chǎn)品名稱:大鼠蛋白激酶Cζ(PKCz)重組蛋白
物種:Rattus norvegicus (Rat,大鼠)
英文名稱:Recombinant Protein Kinase C Zeta (PKCz)
PKC2; PKC-Z; PRKCZ; Protein Kinase M Zeta
信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)
酶與激酶
神經(jīng)科學(xué)
物種:Rattus norvegicus (Rat,大鼠)
來源:原核表達(dá)
宿主E.coli
內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測(cè)定)
亞細(xì)胞定位::n/a
預(yù)測(cè)分子量:-
實(shí)際分子量:-(差異分析請(qǐng)參閱說明書)
片段與標(biāo)簽:N-terminal His Tag
緩沖液成份:磷酸鹽緩沖液(pH7.4,含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.)
性狀:凍干粉
純度:> 97%
等電點(diǎn):-
應(yīng)用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.
規(guī)格:10μg、50μg、200μg、1mg、5mg
核心參數(shù):
適合 atypical PKC 活性檢測(cè)、NF-κB 炎癥通路、細(xì)胞極性與自噬機(jī)制研究、底物篩選及靶向小分子藥物體外篩選實(shí)驗(yàn)。
基礎(chǔ)核心參數(shù)
非典型 PKC,不依賴 Ca2?與 DAG;分子量~67 kDa;受 PI3K 下游 PIP3 調(diào)控。
核心生物功能
極性建立與細(xì)胞遷移:調(diào)控細(xì)胞骨架重組,參與上皮細(xì)胞極性、腫瘤細(xì)胞侵襲遷移,調(diào)控整合素信號(hào)。
NF-κB 經(jīng)典通路激活:磷酸化 IκB 激酶,促進(jìn) NF-κB 入核,介導(dǎo)慢性炎癥、免疫炎癥反應(yīng)。
常見實(shí)驗(yàn)場(chǎng)景操作指南:
細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)
濃度優(yōu)化:先設(shè)置預(yù)實(shí)驗(yàn)梯度(如0.1ng/mL、1ng/mL、10ng/mL、100ng/mL),檢測(cè)細(xì)胞增殖、分化或信號(hào)通路激活情況,確定最優(yōu)工作濃度。
添加時(shí)機(jī):細(xì)胞接種后24-48小時(shí),待細(xì)胞貼壁且狀態(tài)穩(wěn)定時(shí)添加重組蛋白。
更換培養(yǎng)基:若蛋白半衰期較短,需每隔24-48小時(shí)更換含新鮮蛋白的培養(yǎng)基。
免疫檢測(cè)實(shí)驗(yàn)
陽性對(duì)照設(shè)置:在ELISA或WB實(shí)驗(yàn)中,用已知濃度的重組蛋白制備標(biāo)準(zhǔn)曲線,確保定量準(zhǔn)確性。
封閉處理:若蛋白用于包被ELISA板,包被后需用5%脫脂牛奶或BSA封閉,降低非特異性結(jié)合。
抗體配對(duì):選擇針對(duì)不同表位的捕獲抗體和檢測(cè)抗體,避免與重組蛋白的標(biāo)簽產(chǎn)生交叉反應(yīng)。
蛋白相互作用實(shí)驗(yàn)
標(biāo)簽選擇:若使用Pull-down實(shí)驗(yàn),優(yōu)先選擇GST或His標(biāo)簽的重組蛋白,便于親和層析分離。
反應(yīng)條件:在生理緩沖液(如PBS)中進(jìn)行,溫度控制在4℃,避免蛋白變性。
陰性對(duì)照:設(shè)置不含目標(biāo)蛋白的對(duì)照組,排除標(biāo)簽非特異性結(jié)合的干擾。
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關(guān)鍵字: 大鼠蛋白激酶Cζ;PKCz;重組蛋白;
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